高考生物6年题按知识点分类汇编5蛋白质的提取和分离

蛋白质的提取和分离2012广东29.（16分）食品种类多，酸碱度范围广。生物兴趣小组拟探究在食品生产应用范围较广的蛋白醐，查阅相关文献，得知：（1）pH对不同蛋白酶的活力影响有差异。据图12可知，更适宜作为食品添加剂，理由是 C蛋白酶的活力可用的量来表示。图12图1211.该蛋白酶的提取工艺流程如下:加薛保护剂 加65%乙醇4加薛保护剂 加65%乙醇4寸组织匀浆一上清液(0,-Q.IOudIrL)调提垠液pH（5.0〜9.0）,沉淀物—测酹活力（粗酶制剂）（单位：U）兴趣小组分别对陶保护剂浓度、提取液pH进行了探究实验。结果显示，朝保护剂浓度在0.02〜0.06inol/L范围内，施活力较高；提取液pH在6.0〜8.0范围内，酶活力较高。他们认为，要进•步提高粗障制剂的胸活力，以达到最佳提取效果，还需对酗保护剂浓度和提取液pH进行优化，并确定以此为探究课题。请拟定该课题名称，设计实验结果记录表。【答案】（1）木瓜蛋白酶 由图可以看出，木瓜蛋白酗的活性不随pH的变化而变化单位时间内底物消耗（产物产生）（2）课题：探究醐保护剂的最适浓度和提取液的最适pH单位时间内底物的消耗量提取液的pH6.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.0护保酶的浓剂度0.020.03

0.040.050.06【解析】（1）审题结合图形和文字，在题目中已经提供了信息“食品种类多，酸碱度范围广”，所以选择的食品添加剂应该有较广的酸碱适应范围。从图形中，可以看出木瓜蛋白酶的适应范围最广，所以可以选作食品添加剂。的的活力，•股用酶催化的底物消耗量或者产物生成量来表示。（2）实验设计，应该明确实验目的：探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适pH值，所以可以将随保护剂的浓度和提取液的pH值作为自变量，因变量为单位时间内底物的消耗量。-1-专心爱心用心.【试题点评】本题以蛋白酗在食品方面的应用为背景，考查了蛋白萌的应用、活力测定、蛋白施的提取流程等内容和学生绘制农格的能力，难度不大。2012安徽31.（24分）甲型血友病是由X染色体上的隐性基因导致的遗传病（H对h为显性）。图1中两个家系都有血友病发病史,IH2和HI3婚后生下•个性染色体组成是XXY的非血友病儿子（1染），家系中的其他成员性染色体组成均正常。□O正常男女■非血友病XXY□O正常男女■非血友病XXY患者血友病患者图1（1）根据图1， （填“能”或“不能”）确定IV2两条X染色体 的来源；II工4与正常女子结婚.推断其女儿患血友病的概率是 。 （2）两个家系的甲型血友病均由凝血因fVIH（简称F8,即抗血友病球蛋白）基因碱基对缺失所致。为探明IV2的病因，对•家系的第III、IV代成员F8基因的特异片段进行了PCR扩增，其产物电泳结果如图2所示，结合图I,推断H13的基因型是 。请用图 解和必要的文字说明IV2非血友病XXY的形成原因。（2）现III3再次怀孕，产前诊断显示胎儿（IV3）细胞的染色体为46,XY；F8基因的PCR检测结果如图2所示。由此建议IH3 = 时，在凝胶装填F8F8可治疗甲型血友病。采用凝胶色谱法从血液中分离纯化）补给（4比某些杂：若 F8色谱柱后，需要用缓冲液处理较长时间，其目的是 -蛋白先收集到，说明F8的相对分子质量较这些杂蛋白 ，构建衣达载体时，F8F8。要使乳腺细胞合成）利用转基因猪乳腺生物反应器可生产（5等调控组件重组在一起。 cDNA必须将F8基因与猪乳腺蛋白基因的 -2-专心爱心用心.F8基因cDNA可通过克隆筛选获得，该cDNA比染色体上的F8基因短，原因是该cDNA没有 。 （6）为获得更多的转基因母猪，可以采用体细胞克隆技术，将纯合转基因母猪的体细胞核注入 ，构成重组胚胎进行繁殖。 【答案】（1）不能0*•，遗传图解如下：2）XX

精（躺〉原细胞受精卵精（躺〉原细胞hY产生异常的XHI说明：：精子和HI产生正常的卵细,HHhYX结合而成X胞X在HI3形成卵细胞过程中的减数第二次分裂后期，带有基因H的姐妹染色单体移向细胞“XY受精卵。X的同i极，形成XX卵细胞，X卵细胞与正常精子结合形成X3）终止妊娠。（大 （4）洗涤平衡凝胶，并使凝胶装填紧密内含子（5）启动子（6）去核的卵母细胞【解析】小的基因型XI（）因为IV2的染色体组成可能是X,也可能是X4XY,所以不能确定，15,所以后代女性中没有患病个体。为XY&）由图可知第•条带是显性，第二条带是隐性，所以HI（23,图解如下：X基因型为X精（卵）原细胸受精卵专心爱心用心.受精卵在III3形成卵细胞过程中的减数第二次分裂后期，带有基因H的姐妹染色单体移向细胞一受精卵。XXX卵细胞，X卵细胞与正常精干结合形成XXY的同•极，形成终止妊娠。（3）由题可知,IV3是血友病患者，所以建议III3时，在凝胶装填色谱柱后，需要用缓冲液处（4）采用凝胶色谱法从血液中分离纯化F8比某些杂蛋白先收集到，说埋较长时间，其目的是洗涤平衡凝胶，并使凝胶装填紧密：若F8明F8的相时分门贡量较这些杂蛋白较大。与猪乳腺蛋白基因的）要使乳腺细胞合成F8基因cDNA,构建表达载体时，必须将F8（5比染色cDNAcDNAF8基因可通过克隆筛选获得，该启动「和终止J'•等调控组件重组在•起。没有内含九F8基因短，原因是该cDNA体上的）为获得更多的转基因母猪，可以采用体细胞克隆技术，将纯合转基因母猪的体细胞（6核注入去核卵细胞，构成重组胚胎进行繁殖。【试题点评】本题考查了遗传规律，减数分裂，血红蛋白的提取，基因工程，胚胎匚程；遗传规律是近几年的考查热点，但每年考查的都有区别，在解遗传题时，要记住•些常用解题方法，减数分裂的图示是高中生物的基本技能，会画，能理解，能够对遗传规律有个很高的认识，遗传实质都体现在其中。至于选修部分，基因工程、胚胎工程是近几年的考查热点，而血红蛋白的提取，是今年生物考试说明中有，意味着我们要认真阅读考试说明。总体来说，该题是本试卷中的难题，原因是，遗传本身对•于学生来说就难，加之选修部分题目较偏僻，从该题可以看出，安徽高考对于选修的考查，与必修部分建立了联系，进行了学科内的综合，希望学生在备考的过程中多加注意。）2011广东5.以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是（D...A.洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较少的杂蛋白移动慢（34.8分）（生物一生物技术实验）2011山东研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分广蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。柚皮।-「糊状液体।―।一皮精油।、抑菌试验乳酸菌A|——»।培养液|——►।乳酸菌素|/（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度 0答案：（3）碳源和氮源越慢-4-专心爱心用心.10分）生物技术实践09年广东38.（ 2）利用上述所得菌株制备植酸醐的流程如下图：菌体去除 透析液（I）去除〃：H中包含植酸陶等多种蛋白质。请写出种纯化得到植I中的主要成分为酸酶的方法及其依据。答案：（2）小分子杂质，凝胶色谱法：根据蛋白质之间的分子大小、吸附性质等差异进行纯化（或电泳法：根据蛋白质之间的电荷、分子大小等差异进行纯化）：2008山东34.（8分）【生物一生物技术实践】

科学家发现家蝇体内存在•种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。（1）分离该抗菌蛋白可用电泳法.其原理是根据蛋白质分子的 、大小及形状不同， 在电场中的 不同而实现分离。 答案：（1）电荷（带电情况）迁移速度 （2）碳源氮源2008江苏18.下列叙述中错误的是..A.改变NaCl溶液的浓度只能使D\A溶解而不能使其析出B.在沸水浴中，D\A遇二苯胺试剂会呈现蓝色C.加盐和加酒都能抑制微生物的生长D.密封瓶口前最好将瓶口通过火焰以防杂菌污染答案：A2007江苏38.（8分）单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是•种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病。已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb,镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有•对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者，为了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为其产前核酸分:杂交诊断和结果示意图。专心爱心用心.专心爱心用心.引起的。巧合的是，这个位点的突变 （1）从图中可见，该基因突变是由于 个胸切位点，突变基因上只3使得原来正常基因的限制胸切割位点丢失。正常基因该区域上有个胸切位点，经限制前切割后，凝胶电泳分离的切片段，与探针杂交后可显示出不同的带有2条。谱，正常基因显示 条，突变基因显示 等标记。利用核酸分子杂交原理，根据图中突变分子探针要用 （2）DNA或RNA 。…），写出作为探针的核糖核甘酸序列基因的核昔酸序列（…ACGTGTT 次妊4根据凝胶电泳带谱分析可以确定胎儿是否会患有镰刀型细胞贫血症。这对夫妇（3）的个体bb的个体是 ，中基因型BB的个体是 ，Bb娠的胎儿11-1〜11-4 。是 T）21A或变成分）（1）碱基对改变（【答案】（8UGCACAA…（或荧光分子等）…（2）放射性同位素21【-3IIY（3）II和11•分）.（《现代生物科技专题》，154107新课标广东卷香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之-o广东省冬季常受强寒潮和霜冻影病毒）引起的香蕉束，单链环状BBTVDXA响，对•香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒（顶病，对香蕉生产的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高其种质水平，具有重要意义。请根据上述材料,回答下列问题：在运用转基因？）如何利用afp基因，通过转基因技术获得抗寒能力提高的香蕉植株（5?（列举两点）香蕉的过程中，在生态安全方面可能会出现什么问题分）【答案】（15-6-专心爱心用心.（5）将afp基因插入土壤农杆菌的质粒，构建表达载体，通过农杆菌的转化导入香蕉受体细胞，成功转化的香蕉细胞通