中国NMOMS诊断标记的筛选与评价

开题报告多发性硬化(MultipleSclerosis,MS)是一种炎症介导的中枢神经系统自身免疫性疾病，主要涉及细胞免疫。视神经脊髓炎(Neuromyelitisoptica(Devic’sdisease,NMO)也是一种中枢神经系统的炎症性脱髓鞘性综合症，特点主要是严重的视力损害和脊髓损害，在早期被认为不累及大脑，它与体液紊乱有关。临床孤立综合征(CIS)排除其他疾病的情况下,中枢神经系统脱髓鞘事件的急性或亚急性单次发作,持续时间在24h以上。CIS患者临床表现为脊髓、脑干或视神经受累,但是在疾病的时间演变和空间进展方面尚不能满足多发性硬化的诊断标准。CIS患者可以有MS、视神经脊髓炎、横断性脊髓炎、急性播散性脑脊髓炎等多种转归。一、概念当前1页，总共27页。鉴别的分界点在那里？开题报告如何从早期预估它的转归CISNMOMS？二、研究背景当前2页，总共27页。二、研究背景开题报告如何区分？诊断试验诊断标准新的诊断标记二分类数据灵敏度,特异度,似然比,优势比（包括集群二分类）有序数据连续数据经验ROC,拟合ROC,ROC面积,固定FPR面积等当前3页，总共27页。诊断结果（T）金标准（D）合计病例（D+）对照（D-）阳性（T+）阴性（T-）合计TP（真阳性）FP（假阳性）TP+FPTN（假阴性）TN(真阴性）FN+TNTP+FNFP+TNN二、研究背景开题报告Sen=P(T+|D+)=TP(TP+FN)=TPRSpe=P(T-|D-)=TN(FP+TN)J=Sen+Spe-1=TPR-FPRLR+=TPR/FPR=Sen/(1-Spe)LR-=(1-TPR)/(1-FPR)=(1-Sen)/Spe当前4页，总共27页。二、研究背景开题报告中国NMO/MS的诊断标准或西方国家的诊断标准是否符合中国的患者？现有的诊断指标系统评价NMO-IgG的系统评价新型诊断标记物筛选与评价缺乏当前5页，总共27页。X水平区分MS与NMO的ROC曲线当前6页，总共27页。二、研究背景开题报告1.NMO-IgG可能是区分MS与NMO的高特异性生物标记2.通过蛋白质组学筛选新型诊断标记物可能有助于进一步区分MS与NMO，提高二者的诊断准确率新型诊断标记物筛选根据单项试验的敏感度、特异度和ROC曲线等指标，同时进行多项试验联合应用、新旧指标综合分析与评估，优化中国MS或NMO患者的诊断与鉴别诊断方案，从而有助于推动我国MS或NMO研究的进展。当前7页，总共27页。（1）中国NMO-IgG血清学的流行病学临床开展NMO-IgG检测意义开题报告（2）了解NMO-IgG对中国NMO/MS的区分作用。（3）对确诊的首次的MS/NMO或CIS的患者NMO-IgG情况进行前瞻性研究，追踪疾病的转归[自然病史的追踪（阳性，阴性，不同滴度等亚组分析追踪转归与预后（生存分析等）]。（4）治疗追踪（能不能作为end-point评价指标）等。二、研究背景当前8页，总共27页。当前9页，总共27页。当前10页，总共27页。开题报告前瞻性研究当前11页，总共27页。当前12页，总共27页。二、研究背景开题报告1.NMO-IgG可能是区分MS与NMO的高特异性生物标记2.通过蛋白质组学筛选新型诊断标记物可能有助于进一步区分MS与NMO，提高二者的诊断准确率新型诊断标记物筛选根据单项试验的敏感度、特异度和ROC曲线等指标，同时进行多项试验联合应用、新旧指标综合分析与评估，优化中国MS或NMO患者的诊断与鉴别诊断方案，从而有助于推动我国MS或NMO研究的进展。当前13页，总共27页。二、研究背景开题报告2.通过蛋白质组学筛选新型诊断标记物可能有助于进一步区分MS与NMO，提高二者的诊断准确率当前14页，总共27页。二、研究背景开题报告标本来源优点缺点血液收集相对简单。（1）可溶性标记物存在昼夜效应变化（例如IL-6的变化达350%）。（2）测量水平受到肝脏生物降解及肾脏分泌影响。（3）抗凝物质应用影响血清的蛋白水平。（4）分离技术与标本贮存亦影响检测水平。（5）收集与处理的时间要严格控制。脑脊液（1）与病变位置接近，反映颅内相关的炎症过程。（2）脑脊液收集可防止肝脏生物降解及肾脏分泌作用。（1）侵入性操作。（2）量产生亦不稳定，昼夜有明显变化。（3）是否优于尿液或血液目前尚不清楚。尿液非侵入性方法取标本。（1）容易受细菌感染或污染的影响。（2）能测定的指标有限。泪液少用。少用。用于生物标记的体液当前15页，总共27页。二、研究背景开题报告authorThemejournalD'AguannoSElectrophoreticseparationsofcerebrospinalfluidproteinsinclinicalinvestigationsClinChemLabMed.2007PanSAcombineddatasetofhumancerebrospinalfluidproteinsidentifiedbymulti-dimensionalchromatographyandtandemmassspectrometry.Proteomics.2007KolarcikCPlasmaandcerebrospinalfluid-basedproteinbiomarkersformotorneurondisease.MolDiagnTher.2006BiringerRGEnhancedsequencecoverageofproteinsinhumancerebrospinalfluidusingmultipleenzymaticdigestionandlineariontrapLC-MS/MS.BriefFunctGenomicProteomic.2006SchuhmannMUBraininjuryandproteomics/peptidomics:isitrelevant?anoverviewActaNeurochirSuppl.2005RighettiPGProteomeanalysisintheclinicalchemistrylaboratory:mythorreality?ClinChimActa.2005RomeoMJCSFproteome:aproteinrepositoryforpotentialbiomarkeridentification.ExpertRevProteomics.2005YuanXProteomicsanalysisofhumancerebrospinalfluid.JChromatogrBAnalytTechnolBiomedLifeSci.2005FinnieCAspectsofthebarleyseedproteomeduringdevelopmentandgerminationBiochemSocTrans.2004RohlffCProteomicsinneuropsychiatricdisordersIntJNeuropsychopharmacol.2001RohlffCProteomicsinmolecularmedicine:applicationsincentralnervoussystemsdisorders.Electrophoresis.2000当前16页，总共27页。二、研究背景开题报告CSF蛋白组学的一些文献当前17页，总共27页。二、研究背景开题报告但是，毕竟蛋白组学是近年新兴的学科，不同于基因组学，它反映了转录后蛋白装配、修饰等过程，其技术亦日新月异，仍是将来发现疾病标记的重要方法。而在中国，MS患者的脑脊液蛋白组学的研究尚未深入，针对MS、NMO、CIS或治疗前后亚群的蛋白质分析也是目前亟待回答的问题。当然诊断的标记如能筛选出，同样仍需要我们从灵敏度、特异度、一致率、优势比、Youden指数、ROC曲线下面积进行评价它的诊断确准度。正如许多的生物标记的筛选一样，候选的标记结果往往得不出肯定的结论，而且难于重复，蛋白质组学在上述MS的脑脊液研究中结果亦是如此。当前18页，总共27页。三、研究目的、意义开题报告课题设想、目的、意义首先回顾性的分析现有的诊断标记的诊断准确度，探讨旧方法对诊断的贡献值及不足之处，为新方法的开展与评估提供理论的依据其次检测我国MS,NMO,CIS及对照组NMO-IgG抗体的诊断确准度指标，为其临床应用打下基础。

再次,通过蛋白组学的方法筛选对诊断MS,NMO有鉴别意义的生物标记,并评估其诊断的准确度。最后,进行多项试验指标的联合应用,新旧指标进行综合分析，优化诊断MS或NMO的诊断方案。当前19页，总共27页。四、研究内容开题报告（1）回顾性抽样计划研究：回顾在本课题组确诊的“多发性硬化，视神经脊髓炎”和对照病例或健康对照的资料，分析常用指标的诊断准确度，确定指标的最佳决策界值。（2）回顾性+前瞻性研究血清NMO-IgG诊断价值：a.按确诊的MS、NMO、其它神经疾病患者和健康对照分组，检测患者血清的NMO-IgG，评价试验的准确度，同时对MS和NMO组患者进行亚群分组（如治疗前后等），评价试验的诊断准确度。b.CIS患者检测NMO-IgG，评价试验的诊断准确度；随访追踪1年，观察血清阳性与阴性患者的临床转归情况，并重新评估。当前20页，总共27页。开题报告四、研究内容（3）新型的诊断标记的筛选与评价：a.收集MS、NMO、其它神经疾病患者和非神经系统疾病患对照组的脑脊液，2D电泳、质谱技术和生物信息学方法筛选可能诊断蛋白标记。b.免疫分子生物学方法反证诊断标记的在不同分组中的分布情况，评价诊断标记的诊断准确度。c.CIS患者检测该种标记物，评价试验的诊断准确度；随访追踪1年，观察脑脊液阳性与阴性患者的临床转归情况，并重新评估。（4）多元回归分析联合多种诊断标记的诊断准确度，决定最佳决策界值，优化临床诊断方案。当前21页，总共27页。二、研究背景开题报告五、关键问题与技术（1）NMO-IgG的检测原间接免疫荧光法过程繁杂，是国内难以开展该项检测的一个重要原因。由于目前已发展多项技术对该抗体进行检测，尤其是ELISA方法，简单实用，因此有望可解决这问题。（2）蛋白组学对诊断标记的筛选蛋白质组学的整个过程受影响的因素较大，而目前对体液低丰度蛋白的筛选存在一定的难度，有可能难以筛选到具有一定特异性标记物。蛋白质组学的技术日进千里，利用先进的分离筛选技术可能有助于上述缺点的改善。（3）二分度资料的分析

如何转为有序数据进行ROC曲线分析。（4）其它：金标准当前22页，总共27页。开题报告主要研究方法

确定入选病例组的“金标准”SAS，SPSS等软件对指标进行计算与评估间接荧光免疫分析NMO-IgG抗体（滴度）

蛋白组质学分析(双向电泳,质谱,信息学等）六、研究方案当前23页，总共27页。六、研究方案开题报告技术路线回顾MS/NMO/对照资料OB,BAEP,脑脊液,MRI等灵敏度特异度ROC曲线优势比似然比等重新评估上述指标的诊断准确度。为中国MS或NMO诊断与鉴别诊断提供临床决策点的依据。第一部分回顾分析现有指标的诊断准确度当前24页，总共27页。六、研究方案开题报告技术路线第二部分NMO-IgG抗体对中国NMO/MS诊断的准确度研究

确诊MS确诊NMO对照CIS患者NMO-IgG阳性阴性灵敏度，特异度，ROC曲线，优势比，似然比等阳性阴性MSNMOX灵敏度,特异度