邻氮菲分光光度法测铁专家讲座

二、试验原理1.方法原理

邻二氮菲(phen)是光度法测定微量铁很好试剂。该法灵敏度高，稳定性好，干扰易消除，故应用广泛。在pH为2~9（普通维持在pH=5-6）溶液中，Fe2+与邻二氮菲（phen）生成稳定桔红色Fe(phen)32+:

Fe2++3(phen)=Fe(phen)3

其lgk=21.3，摩尔吸光系数ع508

=1.1×104

L·mol-1·cm-1。在还原剂存在下，Fe(phen)3桔红色可保持几个月不变。Fe3+与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性较差，实际应用中加入还原剂盐酸羟胺使Fe3+还原为Fe2+，再与显色剂邻二氮菲作用显色。邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第1页二、试验原理

2、光度法原理

本方法选择性高。

Ca2+、Hg2+、Zn2+及Ag+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定;

相当于铁量40倍Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-，20倍Cr3+、Mn2+、V(V)、PO3-4，5倍Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。共存金属离子量大需掩蔽或分离。邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第2页二、试验原理

3、条件试验(略)（1）入射光波长：普通情况下，应选择被测物质最大吸收波长光为入射光。（2）显色剂用量：显色剂适当用量可经过试验确定。（3）溶液酸度：选择适合酸度，能够在不一样pH缓冲溶液中加入等量被测离子和显色剂，测其吸光度，作A-pH曲线，由曲线上选择适当pH范围。（4）有色配合物稳定性：有色配合物颜色应该稳定足够时间。（5）干扰排除：当被测试液中有其它干扰组分共存时，必须采取一定办法排除干扰。吸光光度法试验条件，如测量波长、溶液酸度、显色剂用量等，都是经过试验来确定。本试验在测定试样中铁含量之前，先做部分条件试验，方便初学者掌握确定试验条件方法。

邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第3页二、试验原理

条件试验简单方法是：变动某试验条件，固定其余条件，测得一系列吸光度值，绘制吸光度-某试验条件曲线，依据曲线确定某试验条件适宜值或适宜范围。 邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第4页三、试验仪器1.721型分光光度计；pH计；50mL-1比色管2.铁标准溶液100ug·mL-13.邻二氮菲1.5g·L-14.盐酸羟胺100g·L-15.NaAc1mol·L-16.NaOH

1mol·L-17.HCl6mol·L-1邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第5页四、试验步骤样品铁含量测定

1、铁标准曲线绘制标准贮备液配制：移取10.00mL100ug·mL-1铁标准溶液于100mL容量瓶，加2mL6mol·L-1HCl溶液，加水至刻度，摇匀。溶液Fe3+浓度为10.00μg·mL-1。标准系列配制：分别移取0.0mL（试剂空白），2.0mL，5.0mL，8.0mL，10.0mL

10.00ug·mL-1铁标准溶液于50mL比色管中，分别加入1mL盐酸羟胺，摇匀，再加入2mL邻二氮菲（phen），5mLNaAc，加水至刻度，摇匀放置10min（显色）。吸光度测定：用1cm比色皿，以试剂空白为参比(调整吸光度A为0），在510nm波长下，测定各溶液吸光度A。标准曲线绘制：以铁质量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。*注意：每加入一个试剂均需摇匀。下同。邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第6页四、试验步骤2、样品铁含量测定移取适量铁样品液(5.00mL)于50mL比色管中，加入1mL盐酸羟胺，摇匀，再加入2mL邻二氮菲（phen），5mLNaAc，加水至刻度，摇匀放置10min，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在510nm波长下，测定样品溶液吸光度。从标准曲线上查出或由回归方程计算样品液中铁含量（mg/L）。3、光度计与比色皿使用4、结束工作测量完成,关闭电源,取出吸收池,清洗晾干保留.清理工作台,罩上邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第7页五、数据统计与处理绘制工作曲线，从工作曲线上找出未知试样含量，并计算水样中铁含量（μg•mL-1）邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第8页六、注意事项1．不能颠倒各种试剂加入次序。2．每改变一次波长必须重新调零3．读数据时要注意A和T所对应数据。4．最正确波长选择好后不要再改变。5．每次测定前要注意校正。6．试验汇报中要进行数据统计，并进行处理，最终要得出结论。邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第9页七、思索题1．本试验量取各种试剂时应分