H7N9禽流感病毒实验室检测

H7N9禽流感病毒实验室检测0122目前一页\总数三十页\编于十三点病例定义人感染H7N9禽流感疑似病例与确诊病例定义参照《人感染H7N9禽流感诊疗方案（2013年第2版）》（卫发明电〔2013〕17号）。目前二页\总数三十页\编于十三点标本采集、运送当医务人员怀疑病人感染H7N9禽流感病毒时，应当尽早采集其上、下呼吸道标本（尤其是下呼吸道标本）和发病7天内急性期血清以及与急性期血清采集时间间隔2-4周的血清等。目前三页\总数三十页\编于十三点标本采集、运送对符合卫生部发布的《人感染H7N9禽流感疫情防控方案（第二版）》中规定的病例定义的病人进行采样。上呼吸道标本（如咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液）下呼吸道标本（如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本）目前四页\总数三十页\编于十三点标本采集、运送血清标本：发病7天内急性期血清以及间隔2-4周的恢复期血清尸检标本环境标本：禽类粪便、笼具涂拭标本和环境污水等标本目前五页\总数三十页\编于十三点标本采集要求

呼吸道标本：发病早期采样，采集的呼吸道标本每份分为3管，每份不少于1ml。血清标本：每份分为2管，每管不少于0.5ml。目前六页\总数三十页\编于十三点标本采集、运送标本采集、包装、运送等应当严格按照《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》（卫生部第45号令）等生物安全相关规定执行。目前七页\总数三十页\编于十三点标本采集、运送：H7N9禽流感病毒实验室活动和样本运输按照《人间传染的病原微生物名录》中高致病性禽流感病毒进行管理。目前八页\总数三十页\编于十三点实验室检测有条件开展核酸检测的医疗机构要对呼吸道标本开展H7N9病毒核酸检测，进行病例诊断，并指导早期应用抗病毒药物；没有条件开展核酸检测的医疗机构应当尽快利用快速抗原检测试剂进行甲型流感病毒抗原检测，并将甲型流感病毒抗原检测阳性的标本送当地流感监测网络实验室进一步开展H7N9病毒核酸检测。目前九页\总数三十页\编于十三点实验室检测目前十页\总数三十页\编于十三点流感样病例强化监测尚未发生人感染H7N9禽流感病例的地区，在既往流感样病例监测工作基础上，要提高监测强度。增加标本采集和检测数量，南方省份每家流感监测哨点医院每周采集流感样病例和人感染H7N9禽流感相关病例标本20份，送当地流感监测网络实验室开展检测。目前十一页\总数三十页\编于十三点目前十二页\总数三十页\编于十三点相关技术文件目前十三页\总数三十页\编于十三点人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略标本采集为进行病例诊断，医疗机构应尽早采集病人的相关临床样本。采集的临床标本包括病人的上呼吸道标本（如咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液）、下呼吸道标本（如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本）和血清标本等。

目前十四页\总数三十页\编于十三点人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤其是下呼吸道标本）和发病7天内急性期血清以及间隔2-4周的恢复期血清。如病人死亡，应当尽可能说服家属同意尸检，及时进行尸体解剖，采集组织（如肺组织、气管、支气管组织）标本。医疗机构采集的呼吸道标本每份不少于3ml。血清标本每份分为2管，每管不少于0.5ml。目前十五页\总数三十页\编于十三点人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略对人感染H7N9禽流感确诊病例可能暴露的禽类饲养或交易等场所，由疾控机构采集禽类粪便、笼具涂拭标本和环境污水等标本，技术要求参考《职业暴露人群血清学和环境高致病性禽流感监测方案（2011年版）》。（chinacdc/jkzt/crb/rgrgzbxqlg_5295/rgrglgyh/）目前十六页\总数三十页\编于十三点人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略目前十七页\总数三十页\编于十三点人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略目前十八页\总数三十页\编于十三点人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略目前十九页\总数三十页\编于十三点当地流感监测网络实验室收到标本后24小时内，立即对呼吸道标本开展甲、乙型流感病毒通用引物，H5、H7亚型的检测。若当地流感监测网络实验室检测结果为H5、H7核酸检测阳性时，应当于12小时内将其中2管呼吸道相关原始标本送至省级疾控中心流感网络实验室。若当地流感监测网络实验室检测到甲通阳性，不能分亚型的标本，要12小时内送省级疾控中心流感网络实验室。人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略目前二十页\总数三十页\编于十三点标本分装：流感网络实验室收检的呼吸道标本每份分为3管，每管应不少于1ml。1管用于检测，另外2管用于复核和病毒分离。标本储存应在-70℃或以下温度，避免反复冻融。人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略目前二十一页\总数三十页\编于十三点H7N9禽流感病毒检测方法：目前二十二页\总数三十页\编于十三点H7N9禽流感病毒检测方法：RealtimePCR检测方法：引物探针、阳性对照由国家流感中心和四川省疾控中心统一下发请认真阅读引物探针说明。目前二十三页\总数三十页\编于十三点H7N9流感病毒检测方法将新合成的引物探针在开盖前短暂离心用RNaseFreeWater溶解，管上标记为Xul/100pmol,引物加上X的2.5倍体积的水，探针加上X的5倍体积的水，变成为使用浓度。引物/探针未溶解前（干粉状态）4℃保存。引物/探针溶解之后-20℃或-20℃以下保存（注意：反复冻融易导致引物/探针降解，建议分装保存）。

目前二十四页\总数三十页\编于十三点人感染H7N9禽流感强化监测实施方案适用范围本方案适用于各地在已发生人感染H7N9禽流感确诊病例的县（区）开展强化监测工作。仅发现动物或环境H7N9禽流感病毒检测阳性结果的地区可参考此方案，自行决定是否开展强化监测工作。目前二十五页\总数三十页\编于十三点人感染H7N9禽流感强化监测实施方案发生人感染H7N9禽流感确诊病例的县（区），应当从病例确诊后次日开始在所有二级及以上医疗机构门急诊开展为期2周的流感样病例（ILI）和住院严重急性呼吸道感染（SARI）强化监测。目前二十六页\总数三十页\编于十三点人感染H7N9禽流感强化监测实施方案.严重急性呼吸道感染（SARI）病例（1）5岁以上儿童及成人。新收入院患者具有以下4项临床表现：①急性起病；②腋下体温≥38℃；③咳嗽或咽痛；④气促（呼吸频率≥25次/分钟）或呼吸困难正在住院治疗的患者如出现上述4项临床表现，也视为严重急性呼吸道感染病例。

目前二十七页\总数三十页\编于十三点人感染H7N9禽流感强化监测实施方案（2）5岁及以下婴幼儿。新收入院患儿具有以下临床表现：①急性起病；②咳嗽或呼吸困难；③伴以下症状或体征之一：

A．气促：呼吸频率大于60次/分钟（<2个月的婴儿）；呼吸频率大于50次/分钟（2-11月龄婴儿）；呼吸频率大于40次/分钟（1-5岁）。

B．拒食或呛奶。

C．严重呕吐。

D．抽搐。

E．嗜睡或昏迷。

F．胸壁凹陷或平静时喘鸣。正在住院治疗的患儿如出现上述临床表现，也视为严重急性呼吸道感染病例。目前二十八页\总数三十页\编于十三点人感染H7N