维生素类药物的分析演示文稿

维生素类药物的分析演示文稿当前第1页\共有176页\编于星期四\7点优选维生素类药物的分析当前第2页\共有176页\编于星期四\7点教学目标掌握维生素A与维生素B1的结构、性质及鉴别试验；熟悉紫外三点校正法测定维生素A含量的原理及计算；当前第3页\共有176页\编于星期四\7点分类

VitA、D2、D3、E、K1

等

脂溶性水溶性

VitB族(B1、B2、B6、B12)VitC、叶酸、烟酸、泛酸等。按溶解度分当前第4页\共有176页\编于星期四\7点维生素A结构-H维生素A醇-COCH3维生素A醋酸酯-COC15H31维生素A棕榈酸酯R:当前第5页\共有176页\编于星期四\7点结构VitA2VitA3当前第6页\共有176页\编于星期四\7点结构鲸醇当前第7页\共有176页\编于星期四\7点结构与性质溶解性紫外吸收不稳定性与三氯化锑反应325~328nm当前第8页\共有176页\编于星期四\7点结构与性质

△或有金属离子存在时氧化↑共轭多烯侧链：易被氧化当前第9页\共有176页\编于星期四\7点环氧化物VitA醛VitA酸结构与性质当前第10页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验三氯化锑反应(Carr-Price反应)条件：无水无醇CHCl3紫红蓝色®¾¾¾®¾3SbClVitA当前第11页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验当前第12页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验维生素AChP（2010）[鉴别]取本品1滴，加三氯甲烷10ml振摇使溶解；取2滴，加三氯甲烷2ml与25%三氯化锑的三氯甲烷溶液0.5ml，即显蓝色，渐变成紫红色。三氯化锑反应当前第13页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验（BP（2000））UV法λmax为326nm一个吸收峰λmax为350～390nm三个吸收峰当前第14页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验当前第15页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验USP显色剂磷钼酸规定斑点颜色和Rf值BP

对照品法显色剂三氯化锑TLC法当前第16页\共有176页\编于星期四\7点含量测定立体异构体氧化降解产物合成中间体UV法(三点校正法)维生素A2维生素A3环氧化物维生素A醛维生素A酸当前第17页\共有176页\编于星期四\7点含量测定维生素A的含量用生物效价即国际单位（IU/g）来表示。规定：效价1IU=0.344µg

全反式维生素A醋酸酯1IU=0.300µg

全反式维生素A醇每1g全反式维生素A醋酸酯/醇相当于多少国际单位？当前第18页\共有176页\编于星期四\7点含量测定换算因子意义：单位E数值所相当的效价。%1cm当前第19页\共有176页\编于星期四\7点含量测定当前第20页\共有176页\编于星期四\7点含量测定当前第21页\共有176页\编于星期四\7点含量测定三点校正法（法定方法）1.原理：（1）杂质的吸收在310-340nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；（2）物质对光的吸收具有加和性。当前第22页\共有176页\编于星期四\7点含量测定2.波长的选择：（1）1

VitA的max（328nm或325nm）（2）23

分别在1的两侧各选一点当前第23页\共有176页\编于星期四\7点含量测定测定对象：VitA醋酸酯=12nm测定对象：VitA醇1=325nm,2=310nm,3=334nm第一法:等波长差法第二法:等吸收比法当前第24页\共有176页\编于星期四\7点含量测定测定法（1）基本步骤:第一步A的选择选择依据：所选A值中杂质的干扰已基本消除。当前第25页\共有176页\编于星期四\7点含量测定第二步求注意：

C为混合样品的浓度

当前第26页\共有176页\编于星期四\7点第三步求效价含量测定第四步：求标示量％当前第27页\共有176页\编于星期四\7点含量测定

方法：（2）

第一法维生素A醋酸酯当前第28页\共有176页\编于星期四\7点含量测定

判断

是否在326～329nm之间在326～329nm之间改用第二法是否

求算

并与规定值比较当前第29页\共有176页\编于星期四\7点含量测定

规定值差值当前第30页\共有176页\编于星期四\7点

判断差值是否超过规定值的有一个以上超过无超过

计算

A328（校正）

用A328计算含量测定当前第31页\共有176页\编于星期四\7点含量测定当前第32页\共有176页\编于星期四\7点03%－15%－3%第二法第二法含量测定当前第33页\共有176页\编于星期四\7点含量测定适用于维生素A醇（等吸收比法）

第一法无法消除杂质干扰时用此法[皂化法、6/7A法]（3）第二法当前第34页\共有176页\编于星期四\7点含量测定水溶性脂溶性当前第35页\共有176页\编于星期四\7点含量测定

判断max是否在323～327nm之间取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定

计算是否当前第36页\共有176页\编于星期四\7点含量测定

判断A300/A325

是否大于0.73是否取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定

计算A325(校正)当前第37页\共有176页\编于星期四\7点含量测定当前第38页\共有176页\编于星期四\7点含量测定03%－3%当前第39页\共有176页\编于星期四\7点含量测定

VitAD胶丸中VitA的含量测定精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量差异项下（平均装量0.07985g/丸）的内容物0.1287g至10ml烧杯中，加环己烷溶解并定量转移至50ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取2.0ml，置另一50ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波长为328nm，并在下列波长处测得吸收度为当前第40页\共有176页\编于星期四\7点含量测定A300：0.374A316

：0.592A328：0.663A340：0.553A360：0.228A300/A328：0.564A316/A328：0.893A328/A328：1.000A340/A328：0.834A360/A328：0.344

求本品中维生素A占标示量的百分含量？当前第41页\共有176页\编于星期四\7点A300/A328：0.564A316/A328：0.893A328/A328：1.000A340/A328：0.834A360/A328：0.344

0.5550.9071.0000.8110.299

+0.01－0.010+0.02+0.04－－－－－=====A328(校正)=3.52(2A328-A316-A340)=3.52(2×0.663–0.592–0.553)=0.637含量测定当前第42页\共有176页\编于星期四\7点A328(校正)–A328(实测)A328(实测)×100=0.637–0.6630.663×100=-3.92E1%1cm(328nm)=A328(校正)100ms/D=0.637100×0.1287/1250=61.87含量测定当前第43页\共有176页\编于星期四\7点供试品中维生素A效价=

E1%1cm(328nm)×1900=61.87×1900=117553（IU/g）标示量%=VA效价(IU/g)×每丸内容物平均装量(g/丸)标示量(IU/丸)×100%=117553×0.0798510000×100%=93.9%含量测定当前第44页\共有176页\编于星期四\7点含量测定三氯化锑比色法：优点：简便、快速λmax618nm～620nm标准曲线法缺点呈色不稳定（5～10s内）水分干扰与标准曲线温差≤1℃专属性差三氯化锑有腐蚀性蓝色+3SbClVitA当前第45页\共有176页\编于星期四\7点氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱)HClCl-结构维生素B1（硫胺）12345615432当前第46页\共有176页\编于星期四\7点结构与性质溶解性紫外吸收硫色素反应氯化物、硫元素λmax=246nm与生物碱沉淀剂反应当前第47页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验维生素B1ChP（2010）[鉴别]

(1)取本品约5mg，加氢氧化钠试液2.5ml溶解后，加铁氰化钾试液0.5ml与正丁醇5ml，强力振摇2分钟，放置使分层，上面的醇层显强烈的蓝色荧光；加酸使成酸性，荧光即消失；再加碱使成碱性，荧光又显出。硫色素荧光反应当前第48页\共有176页\编于星期四\7点当前第49页\共有176页\编于星期四\7点硫色素O环合-2H当前第50页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验生物碱沉淀剂反应VitB1K2HgI4黄色I2-KI红色硅钨酸白色苦酮酸白色扇形当前第51页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验氯化物反应(Chp2010)硫元素反应当前第52页\共有176页\编于星期四\7点含量测定电位滴定法（一）非水减量法当前第53页\共有176页\编于星期四\7点反应摩尔比为1：2含量测定当前第54页\共有176页\编于星期四\7点（二）UV含量测定当前第55页\共有176页\编于星期四\7点含量测定片剂、注射剂=421（每片）相当于标示量的%=A=ECL规格g/片gChP2010WEA%cmD10011××%100标示量平均片重××当前第56页\共有176页\编于星期四\7点含量测定（每ml）相当于标示量的%=规格g/mlml%VEA%cm100110011×标示量稀释倍数××当前第57页\共有176页\编于星期四\7点含量测定原理荧光硫色素异丁醇铁氰化钾1VitBNaOH（三）硫色素荧光法USP当前第58页\共有176页\编于星期四\7点含量测定方法（三）硫色素荧光法USP配氧化试剂、对照品、供试品溶液测定对照品供试品空白计算当前第59页\共有176页\编于星期四\7点特点（1）灵敏度高，线性范围宽（2）代谢产物不干扰，适用于体液分析含量测定当前第60页\共有176页\编于星期四\7点结构L－抗坏血酸维生素C当前第61页\共有176页\编于星期四\7点结构与性质1、易溶于水2、水溶液呈酸性溶解性当前第62页\共有176页\编于星期四\7点结构与性质C3－OH的pKa=4.17C2－OH的pKa=11.57一元酸酸性当前第63页\共有176页\编于星期四\7点结构与性质二烯醇结构二酮基结构二烯醇结构还原性当前第64页\共有176页\编于星期四\7点结构与性质有活性有活性无活性当前第65页\共有176页\编于星期四\7点结构与性质△糖类的显色反应50℃结构与糖类相似具有糖的性质当前第66页\共有176页\编于星期四\7点结构与性质L(+)－抗坏血酸活性最强手性C（C4、C5）**光学活性当前第67页\共有176页\编于星期四\7点结构与性质与碱反应水解性当前第68页\共有176页\编于星期四\7点结构与性质当前第69页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验去氢抗坏血酸]O[VitC与氧化剂的反应当前第70页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验1、与AgNO3反应2、与2，6-二氯靛酚反应(ChP2010)氧化型玫瑰红色还原型蓝色OHˉ(ChP2010)当前第71页\共有176页\编于星期四\7点（玫瑰色）（无色）鉴别试验当前第72页\共有176页\编于星期四\7点3.其他氧化剂的反应：亚甲蓝或高锰酸钾试剂褪色

碱性酒石酸铜砖红色沉淀

磷钼酸钼蓝

鉴别试验当前第73页\共有176页\编于星期四\7点或盐酸50℃吡咯USP鉴别试验糖类的反应当前第74页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验当前第75页\共有176页\编于星期四\7点（蓝色）(糠醛)（戊糖）50℃(吡咯)当前第76页\共有176页\编于星期四\7点BP0.01mol/LHCl鉴别试验UV薄层色谱法Chp2010VitC制剂当前第77页\共有176页\编于星期四\7点1.溶液的澄清度与颜色：有色杂质分光光度法

2.铁、铜离子：原子吸收分光光度法3.草酸：比浊杂质检查当前第78页\共有176页\编于星期四\7点含量测定指示剂淀粉指示液碘量法原理当前第79页\共有176页\编于星期四\7点含量测定H+当前第80页\共有176页\编于星期四\7点含量测定

取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6。方法当前第81页\共有176页\编于星期四\7点含量测定（1）酸性环境（2）新沸冷H2O减慢VitC被O2氧化速度（3）立即滴定

赶走水中O2减少O2的干扰方法当前第82页\共有176页\编于星期四\7点（4）附加剂干扰的排除片剂——滑石粉——过滤注射剂——抗氧剂——丙酮甲醛Na2SO3NaHSO3

Na2S2O3Na2S2O5含量测定当前第83页\共有176页\编于星期四\7点CHHOOaS3aSO+H2NHON2252HONHCOS3a含量测定当前第84页\共有176页\编于星期四\7点USPJP酚亚胺二氯靛酚，-62VitC含量测定2,6-二氯靛酚钠滴定法原理当前第85页\共有176页\编于星期四\7点自身指示终点法含量测定方法当前第86页\共有176页\编于星期四\7点（2）快速滴定2min内（1）酸性环境HPO3-HAc稳定VitC防止其他还原性物质干扰（3）剩余比色测定（定量过量）（测剩余染料）含量测定讨论当前第87页\共有176页\编于星期四\7点（4）缺点

需经常标定贮存≤一周不稳定干扰多氧化力较强含量测定当前第88页\共有176页\编于星期四\7点苯并－二氢吡喃醇结构维生素E12345678当前第89页\共有176页\编于星期四\7点名称R1R2相对活性α-生育酚β-生育酚γ-生育酚δ-生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1***结构当前第90页\共有176页\编于星期四\7点dl－α－生育酚醋酸酯结构当前第91页\共有176页\编于星期四\7点苯环+二氢吡喃环+饱和烃链1、UV2、乙酰化的酚羟基易水解]O[醌型化合物△生育酚-+orOHHVitE杂质，需检查结构与性质当前第92页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验]O[生育红硝酸反应橙红色75℃15′HNO3VitE生育酚当前第93页\共有176页\编于星期四\7点（橙红色）生育红生育酚HNO3鉴别试验强氧化剂当前第94页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验三氯化铁－联吡啶反应当前第95页\共有176页\编于星期四\7点生育酚对-生育醌[O]弱氧化剂鉴别试验当前第96页\共有176页\编于星期四\7点血红色鉴别试验当前第97页\共有176页\编于星期四\7点

=41.0～45.5λmax=284nmλmin=254nm0.01%无水乙醇中UV鉴别试验当前第98页\共有176页\编于星期四\7点薄层板硅胶G展开剂环己烷-乙醚（4：1）显色剂硫酸（105℃5′）VitERf

=0.7-生育酚Rf

=0.5-生育醌Rf

=0.9鉴别试验薄层色谱法当前第99页\共有176页\编于星期四\7点游离生育酚

原理酸度以NaOH滴定液（0.1mol/L）体积控制。杂质检查当前第100页\共有176页\编于星期四\7点（M生育酚=430.8）

取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不得过1.0ml。例杂质检查当前第101页\共有176页\编于星期四\7点≤2.15％限量杂质检查当前第102页\共有176页\编于星期四\7点GC法（法定方法）GC特点选择性好灵敏度高速度快分离效能好挥发性低、不稳定、极性强→衍生化易受样品蒸气压限制含量测定当前第103页\共有176页\编于星期四\7点载气→N2固定液→硅酮（OV-17）担体→硅藻土或高分子多孔小球柱温→265℃检测器→氢火焰离子化检测器(FID)内标→正三十二烷

n≥500R≥2内标法加校正因子色谱条件含量测定当前第104页\共有176页\编于星期四\7点内标法供试液（样品+内标）内标物对照液（对照+内标）是样品中不存在的物质与被测组分峰靠近能与各组分完全分离与被测组分的量接近含量测定当前第105页\共有176页\编于星期四\7点HPLC法

外标法此外，还有铈量法、比色法和荧光法含量测定当前第106页\共有176页\编于星期四\7点维生素D2(麦角骨化醇)结构维生素D12345678910111213141516171819202122232425262728当前第107页\共有176页\编于星期四\7点结构维生素D维生素D3（骨化醇）123456789101112131415161718192021222324252627当前第108页\共有176页\编于星期四\7点开环的甾体：具有甾类化合物的显色反应，可用于鉴别。手性碳原子：具有旋光性，可用于鉴别。多烯：不稳定性、紫外吸收。结构与性质当前第109页\共有176页\编于星期四\7点显色反应醋酐--硫酸反应D2

黄红紫绿

D3

黄红紫、蓝绿绿三氯化锑反应橙红色渐变粉红三氯化铁反应橙黄色二氯丙醇和乙酰氯反应绿色鉴别试验当前第110页\共有176页\编于星期四\7点比旋度鉴别维生素D2维生素D3溶剂

浓度

比旋度值无水乙醇无水乙醇40mg/ml5mg/ml+102.5°～+107.5°+105°～+112°注意事项：应于容器开启30分钟内取样，在溶液配制后30分钟内测定。鉴别试验当前第111页\共有176页\编于星期四\7点如何区别VitD2

和VitD3鉴别试验96%乙醇溶液乙醇、85%硫酸红色λmax＝570nm黄色λmax＝495nmVitD2VitD3当前第112页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验[鉴别](1)取本品约0.5mg，加三氯甲烷5ml溶解后，加醋酐0.3ml与硫酸0.1ml，振摇，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后成绿色。

(2)在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集452图）一致。维生素D2

ChP(2010)当前第113页\共有176页\编于星期四\7点鉴别试验[鉴别](1)取本品约0.5mg，加三氯甲烷5ml溶解后，加醋酐0.3ml与硫酸0.1ml，振摇，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色、蓝绿色，最后成绿色。

(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集453图）一致。(3)在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。维生素D3

ChP(2010)当前第114页\共有176页\编于星期四\7点杂质检查维生素D2中麦角甾醇的检查：加洋地黄皂苷溶液，混合，放置18h不得发生浑浊或沉淀。前维生素D的光照产物当前第115页\共有176页\编于星期四\7点含量测定

中国药典（2010年版）采用正相高效液相色谱法测定维生素D的含量，定量方法为内标法，内标物为邻苯二甲酸二甲酯，该法分为三个方法。

当前第116页\共有176页\编于星期四\7点

需要检查麦角甾醇杂质的药物是A.VitAB.VitEC.VitD2D.VitCE.VitB1D练习当前第117页\共有176页\编于星期四\7点

维生素B1注射液含量测定的方法是A.非水溶液滴定法B.异烟肼比色法C.紫外分光光度法D.Kober反应比色法E.碘量法D练习当前第118页\共有176页\编于星期四\7点练习A.亚硝基铁氰化钠反应B.硫色素反应C.硝酸反应D.三氯化锑反应E.硝酸银试液的反应

1.维生素C2.维生素E3.维生素B14.维生素AECBD当前第119页\共有176页\编于星期四\7点练习A.氨基嘧啶环与噻唑环B.共轭多烯侧链C.烯二醇和内酯环D.环状酰脲E.苯并二氢吡喃

1.抗坏血酸

2.维生素E3.维生素B14.维生素ACEAB当前第120页\共有176页\编于星期四\7点练习A.非水溶液滴定法B.GCC.HPLCD.碘量法E.三点校正法

1.抗坏血酸注射液

2.维生素E3.维生素B1原料药4.维生素ADBAE当前第121页\共有176页\编于星期四\7点当前第122页\共有176页\编于星期四\7点当前第123页\共有176页\编于星期四\7点当前第124页\共有176页\编于星期四\7点当前第125页\共有176页\编于星期四\7点当前第126页\共有176页\编于星期四\7点当前第127页\共有176页\编于星期四\7点当前第128页\共有176页\编于星期四\7点当前第129页\共有176页\编于星期四\7点当前第130页\共有176页\编于星期四\7点当前第131页\共有176页\编于星期四\7点当前第132页\共有17