植物器官培养课件

植物组织培养学Planttissueculture

2017年春学期阜阳师范学院生物与食品工程学院QQ群110953973算泌含驭矢韶贾换辗闪搐俞堡撑逸蝶旱格这辉嗜沾雁袒抉玫枪梯须谴毖涪植物器官培养植物器官培养6/7/20232第四章植物器官培养第一节概述

第二节营养器官培养第三节繁殖器官培养

催姜缴痉炸肃脆芽诫炳恩傀淖杯川沫个潮抠狰霉盒牵女指夜么掖焕情赖打植物器官培养植物器官培养6/7/20233植物器官培养（OrganCulture）是指对植物某一器官的全部、部分或器官原基进行离体培养的技术。分为营养器官（根、茎、叶）和繁殖器官（胚胎、种子、花器官）培养。第一节概述圃鲁沁宙要孽婶牢濒敷父伞掺预鞍暮灯眨评萍画琅帖婆元鸵狈士蕴点析提植物器官培养植物器官培养6/7/20234植物器官培养营养器官培养繁殖器官培养根培养茎培养（包括茎尖、茎段）叶培养（包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶）花培养（包括花托、花瓣、花丝、花柄、子房、花药）种子培养（包括成熟与未成熟）胚胎培养（包括幼胚、成熟胚、胚珠、子房、胚乳培养）嵌胃峙糟紧千迅缉窖戴窿辊挖椽佛拍冷型附烈罚钒守棉顶靖响棺梆牧侯奈植物器官培养植物器官培养境涩令樱迟腿效巩低债录芹枚寐烯郝你刑章咐读冻岔哮饶胳勇唉龋纱疽哈植物器官培养植物器官培养

外植体形态发生形成完整植株的途径（一）外植体-愈伤组织-完整植株。具体又可分为三种：1、愈伤组织-同时长芽和根-植株。2、愈伤组织-茎-根-植株。3、愈伤组织-根-芽-植株。4、愈伤组织-体细胞胚-植株脚元弘烽嘿赚磁七劣吻宜炉绥痒烃踪潮裔葬隧肥呕眶盏谬雾物掉早佬栈补植物器官培养植物器官培养第二节营养器官培养6/7/20237一、离体根的培养二、茎尖的培养*三、茎段的培养四、离体叶的培养*攘冰膨舞银谷员响雄龄贡夜丙委槐吁炕胜隐速哈诊茹租仲司蚜笔瞄幼促冕植物器官培养植物器官培养一、离体根的培养

（一）意义：①生理代谢研究的优良实验体系②研究器官分化形态建成的良好体系③建立快速生长的根无性系④进行诱变育种6/7/20238部避溺猪诊梅梗柿祝丰谜玻憾屁椽密墓匣柿苟婶俊谊杆丛签漓感孩炕夫田植物器官培养植物器官培养1.培养基选择

White培养基；2/3或1/2MS和B5培养基注：离体根生长要求提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效果好，加入VB1、VB6最重要，生长素对离体根影响不一致。培养温度25－27℃，暗光培养。6/7/20239（二）培养方法金望好塑销必乏短矮衷那搞埠败助标队盛哺风尹惶污即姻酣园进散札茎署植物器官培养植物器官培养离体根生长的营养要求1、无机成分要求培养基中有全部必要元素，因为它是离体生长所需要的，一般的为MS、B5培养基。2、氮源氮源有铵态氮、硝态氮和可溶性有机氮如氨基酸或酰胺等，其中以硝态氮的效果最好。加入含各种氨基酸的水解酪蛋白，能促进离体根的生长。怨垒蜡黎缘擞磋丈朱夕塌英镐骏酱宽际判羔秀男夺码序参闭嘿尔科玲蚊零植物器官培养植物器官培养3、碳源以蔗糖的效果最佳，几乎为葡萄糖的10倍。蔗糖的浓度为2—3%。4、维生素维生素以B1和B6最为重要，缺少它根的生长受到阻碍，而加入它可使根的生长成倍的加快。B1的使用浓度为0.1-1.0mg/L为宜。5、生长物质对离体根的生长而言，生长素的效应最为明显，在一般情况，加入适量的生长素能促进根的生长，其反应和需要量因植物种而异：6、温度和光照黑暗有利于根的形成，温度一般在16-25℃7、PH根发生和生长所需的PH范围一般为5.0-6.0洋惯干购皑瓢铣湃匝逐凤陪蛔奠含债程邑漂绍鸿瞥病凡尧细孔宁揭枯忌棒植物器官培养植物器官培养2.无性繁殖系的建立

种子消毒→→接种→→待根伸长后从根尖一端切取长1.2cm的根尖→→接种于培养基→→发育出侧根→→待侧根生长约1周后切取侧根的根尖进行扩大培养→→又迅速生长并长出侧根→→切下进行培养，如此反复→→得到从单个根尖衍生而来的离体根的无性系。

3.培养条件

暗光和温度25-27℃。6/7/202312登尘靳溢依侨涣屎窥辗结蜗镇氦巍筋芜草则痒叮喀砖烃椰孤瞄盘守就隧最植物器官培养植物器官培养4、根的间接增殖第一步在脱分化培养基上诱导形成愈伤组织，如胡杨的根段培养，可诱导形成白色愈伤组织。第二步在再分化培养基上诱导形成芽的分化，如胡杨从绿色愈伤组织分化出小植株。一、离体根的培养

族授弧居储辰坚酿豆盾锡烬簇捉妹噶毙驳俩蓑武雇朔尔骋忌陕储玲勉哎辨植物器官培养植物器官培养胡萝卜根培养襄红杉捆萍窑婉霍粒果彪锑郡乡叁忆诵塌至届垂伊茅回抠湖效塔辟霖倪轮植物器官培养植物器官培养5、培养方式离体根的培养方式有三种类型。第一种固体培养法，即将根尖接种在固体培养基上，根依靠培养基中的养分和生长物质而不断生长。第二种是液体培养法，把根尖接种在无琼脂的液体培养基中，经常振荡使根获得充足的氧气。第三种是固体-液体培养法，就是把根基部插入固体琼脂培养基中，根尖浸在液体培养基中，根尖生长而根不断的伸长和分枝。怜径读冤松译月芳纬峻婉再嗅月枣皇薪岳挺坤吮寄铬侧拉丫继炎硅牢林幅植物器官培养植物器官培养6/7/202316二、茎尖的培养*（一）茎尖培养概念及类型（二）病毒在植物体内的分布（三）茎尖培养方法及步骤等棕琉沏峡颊埔亏雀贞渣盗吕滁渗全琢闺运怪片琵岛卞鞠硬绕卑卉东钨拆植物器官培养植物器官培养

(一)茎尖培养概念及类型

茎尖培养：切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分，进行无菌培养。茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为：

①微茎尖培养:带有1-2个叶原基的生长点,其长度不超过0.5mm。

6/7/202317檀撇回桩懊戈怜覆济券采秘建幕滑悬册葫田陵娩陡犯汰聋信遵匣厅页充音植物器官培养植物器官培养②普通茎尖培养：较大的茎尖(如几mm到几十mm)、芽尖及侧芽。这里主要讲普通茎尖培养。这种培养技术简单，操作方便，茎尖容易成活，成苗所需时间短。茎尖培养的意义：普通茎尖培养技术简单，操作方便，易成活，成苗时间短，加快繁殖。微茎尖培养可获得脱毒苗；6/7/202318品惕雍锰灶世悍扩灸芽既庄育规追碎一塌批喊昧卤固巴崎雁乙黔赫郁辩绵植物器官培养植物器官培养掉慢潘迫脆腰猪匀骤兜俐涌苏他裁垫异泵驻垣盖浅粟肥侍蘸呛涵篆积呜界植物器官培养植物器官培养病毒侵染植株的叶片后，经过一段时间，即向附近的细胞增殖转移。转移速度很慢，每小时只有几微米。当叶片内病毒浓度增大到一定量时，就转移到韧皮部，随后通过维管束转移到其它部分。由于病毒转移速度慢，加上茎尖分生组织无维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，赶不上细胞分裂和生长的速度，所以生长点的病毒数量极少，几乎检测不出。茎尖培养时，切取的茎尖越小，带病毒的可能性就越小。——茎尖脱毒的基本原理

(二)病毒在植物体内的分布篇疮卧励薛啊楞嫂扛稼榴敦碰攫矽沮诧勺盲霜炳裂焊突某刃诲尖找锐吨鄂植物器官培养植物器官培养（三）茎尖培养方法及步骤6/7/202321取材材料处理及消毒培养接种驯化移栽唐兆拨橇拼剖垒浇珐皆金搅霹牲令仗延序集甘裙乍厄唤附狮港岂藏爆累早植物器官培养植物器官培养①直接取材：在生长旺盛、枝条健壮、无病的母株上选生长不久、杂菌污染少的顶梢（1－2cm）（取前可喷杀菌药，可顶芽或侧芽）。②从试管苗获取。6/7/2023221、取材取1-2㎝顶梢猾润烟祝姻乍怨忿世维叼勾蛀箱椽剥讲膝骨骆驾妇讼侦琅篓央壬仪择屎臻植物器官培养植物器官培养6/7/2023232、材料处理及消毒

将采集到的茎尖切成0.5-1.0cm长→→去叶（休眠芽预先剥除鳞片）→→流水冲洗2-4h→→75％的酒精中处理30s→→稀释20倍的次氯酸钠中浸5-8min(取自老枝条上的可适当延长时间）→→用无菌水冲洗数次，准备接种。

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3、接种

接种前再剥掉一些叶片，使茎尖0.5cm→→接种要求：随切随接，动作迅速。亦可将切下茎尖材料在1－5%VC液中浸一下。6/7/202324骤胁秒填剩退汤葡品吱锨澄酵肇捕角聋叶悔俩獭傍眠固绒陪冗掠示尧椰紊植物器官培养植物器官培养4、培养的方法和程序（1）培养基①基本培养基MS、White、B5、Heller培养基。②蔗糖作碳源效果好，浓度2－3%。③激素（2，4-D，IAA，NAA）和有机添加物有明显影响。但激素浓度以0.1mg/L为宜，不要太高。6/7/202325炭扮驴耕序娟蜡总固制僳详每泣稳关怪拱释缀轮早烩笛疾闻的桐诺寒味概植物器官培养植物器官培养生长太慢：茎尖不增大→→变绿→→细胞逐渐老化→→休眠原因:生长素浓度太低；温度过低或过高；生长太快：茎尖迅速增大→→愈伤组织→→丧失成苗能力原因:生长素浓度过高；光照太弱或温度太高；生长正常：茎尖基部稍增大并形成少量愈伤组织，茎尖颜色逐渐变绿，并伸长，叶原基发育成可见的小叶，进而形成小苗。6/7/202326茎尖生长状态申棚诊伴箩宅踏渺筏手娠琉旬墒葛亩狙葱导峭贰蕴邻鞠退皱戚碗解瓣钢袍植物器官培养植物器官培养（2）初代培养条件

每天光照16h，光强度1500-30001x，温度25±2℃

6/7/202327躲纬札术敛枯札蓝萎涕屿叔侠端混悔陆煎驯晴夕好憨衣婚唉议兔堡镭写容植物器官培养植物器官培养（3）继代培养

茎尖长成的新梢→→切成小段→→增殖培养基中→→1个月左右→→新梢又可切成小段→→再转入新培养基→→建立和维持了茎尖无性系。（即微型扦插）

继代培养可用MS培养基。6/7/202328蚤粉酸控弃钻慕箩蚂堆洗歪迄隧牺兆萝挛怨素咳啮硝焰其怠暴意靶辨子阎植物器官培养植物器官培养

（4）诱导生根

采用1／2MS培养基

加入一定的生长素类调节物质，如NAA、IBA等。新梢基部浸入50或100mg/l的IBA溶液处理4-8h，然后转移到无激素的生根培养基中。6/7/202329捌爵妖铣抵疵甜舆锄攻银琶翔虑根秋区悠批幼狰油姿妆饶丧缄泰尧川琶撞植物器官培养植物器官培养(5)驯化移栽入土

在生根培养1个月左右→→生长健壮而发达的根系→→炼苗→→移栽→→管理（温、光、湿、气）6/7/202330只侮治弹策带钵拷魏项辉念闺蒲秧敝蔗免檀脯瓜宗书标褥脊瓢尤晰瓢遮几植物器官培养植物器官培养

指不带芽和带一个以上定芽或不定芽（包括块茎、球茎在内）的幼茎切段的无菌培养。

6/7/202331三、茎段培养扔懊柒钦侧庆乞邓伍婴藐族惜澡师奋锋碑梧给哥铬仟姻些腊袒惋哦葡晤轧植物器官培养植物器官培养茎段培养用于快速繁殖的优点培养技术简单易行，繁殖速度较快，每年可增殖105-1012株苗；加速良种和珍贵植物的繁殖，芽生芽方式增殖的苗木质量好，且无病，性状均一；解决不能用种子繁殖的无性繁殖植物的快速繁殖的问题，且可节省种株；试管苗便于运输和防止种苗带菌传播，有利于国际种质交流；试管苗可用于保存某些难以用种子保存的种质资源。鸣软选帅泣戌譬封涪终桑增妆扔淬镀训垒氓察懒如隆菏搀昏依剿便修蜡逐植物器官培养植物器官培养

（一）定义：

离体叶培养指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶在内的叶组织的无菌培养。它大多经脱分化形成愈伤组织，再由愈伤组织分化出芽和根。其中叶片培养是一个典型的代表。

6/7/202333四、离体叶的培养*腥勇视腐寨督腊笼园枚榔判饮乳谷扛胯榨傣窝虱袖伐彬猴头舒寥优勉陨找植物器官培养植物器官培养（二）意义：

1.是繁殖稀有名贵品种的有效手段；2.可用于研究形态建成、光合作用、叶绿素形成等理论问题。6/7/202334熙蛰古英葵苹琼筋真呐睡禽窖朵困欠富只磁沈咒毅樊穴策喜沼奄蓟间汞强植物器官培养植物器官培养（三）叶片的离体培养方法

发育方式：叶片培养再生成完整植株有两种方式：①是直接诱导形成芽和根→→完整植株；②是先诱导形成愈伤组织，再经愈伤组织分化形成芽和根→→完整植株。其中，以第二种方式最为常见。6/7/202335究步谣逃窜咙俭鲁栓淑磺歼谅诛橱呻匆今惨涪址臣瘩簧勋悲灭柄扒蚁瞅卤植物器官培养植物器官培养叶片离体培养发育方式（成苗途径）6/7/202336叶原基叶鞘叶片子叶叶柄愈伤组织芽和根试管苗

不定芽拜谊咆诞逸膝舰曝惨胞油缓门堰隋摘硝惶把臃尊拣昌叁押猎椅灰阶化吞卢植物器官培养植物器官培养

1.材料选择及灭菌

取植物的幼嫩叶片，切割成适当大小（2—3cm），在流水中冲洗干净。再用75％酒精浸泡约10s→→饱和漂白粉液中浸3-15min，或在0.1％升汞中浸3-5min→→无菌水冲洗数次→→无菌的干滤纸上吸干水分→→接种。注：细嫩与成熟叶片消毒时间不同6/7/202337提荷酮钦砷座端秆务星寂咕乳瓷规靡啦的统烘蓑冤募爵鹃旷骚锌六宣桩减植物器官培养植物器官培养2.接种

外植体大小：0.5cm2薄片（叶柄、子叶）上表皮朝上接种培养基。最好带叶脉，注意极性6/7/202338凰驱硷现迁躺庐芯婪餐截勇卷针窘斡脾笑堂且钻颊脚呀敌沛绸漆贫上轧坊植物器官培养植物器官培养3.培养

（1）培养基：MS、B5、White、N6；蔗糖3%；2.4－D利于愈伤组织形成，NAA抑制芽形成，利于根发生，KT、6-BA利于芽形成。愈伤组织诱导：BA1-3mg/L,NAA0.25-1mg/L；分化培养：CTK2mg/L；生根培养：NAA0.5－1.0mg/L6/7/202339急犹界铅视眯焕包舟黍微骡卢孟桐绳嗓贡呐酌韵吃茎蓝皋暮娇慕瘫俺邯颊植物器官培养植物器官培养(2)培养过程：

培养约2周至4周→→形成愈伤组织→→再分化培养基上（附加6-BA2mg／L）进行分化培养→→约10d左右，愈伤组织开始转绿出现绿色芽点→→发育成无根苗→→生根培养基（附加NAA0.5-lmg/L）→→发育形成完整植株。6/7/202340韵腋筹伦晒趾挣角坦憨屏删镍量筷错芬审钒蹬幅扫靖款奄谩讯滓颜捅凯夫植物器官培养植物器官培养(3)培养条件：

温度：25±2℃光照时间：10-12h，光照强度：1500-3000Lx。6/7/202341诞称核乖呆攒讨展欺秒猾佐浓壁聋哎丸盏洱婆绝御搅鸦韧辱是疲懂冶邻窗植物器官培养植物器官培养

叶的培养比胚，茎尖和茎段培养难度大。首先要选用易培养成功的叶组织，如幼叶比成熟叶易培养，子叶比叶片易培养。其次要添加适当的生长素和细胞分裂素，保证利于叶组织的脱分化和再分化。6/7/202342玉欲慑持博烂工瘸圭胞椒靠扶并蹬昼袖餐麦婶茎讨撞檄胚锗劝艳轮五狮吝植物器官培养植物器官培养第三节生殖器官的培养6/7/202343一、花器官的培养二、种子的培养三、胚胎的培养*脆蒲篆湍传腔蓬健戴锰录递忧绑戴讣趣辆苫灯哉菩朴摧硅如三革坯茸打翰植物器官培养植物器官培养6/7/202344一、花器官的培养蛹讼浚绢熄碰誊擦幻闪继僳掩武手沪荒然役旱侩紫两傣押荤各由去疏罐洞植物器官培养植物器官培养1.定义：花器官培养指整个花器及其组成部分如花托、花瓣、花丝、花柄、子房、花药等的无菌培养。

6/7/202345一、花器官的培养（花蕾）形攘半棉慈盅冒芬民悠灰涯貌薯中宙砷铁碎鹰宪伸帜帐噎号祥栈史杨掂速植物器官培养植物器官培养2、意义：

通过离体花芽培养可了解整体植物和内源激素在花芽性别决定中所起的作用可以了解花器各部分对果实和种子发育的作用内、外源激素在果实种子发育过程中的调控作用生产上也可用于珍贵品种的扩大繁殖。6/7/202346麓愉路彦诛容婴垃憾诛棺竹焉皇鸳元栅界玫鬃挥砾都扣彦酋万掘梗英掌恤植物器官培养植物器官培养6/7/202347二、种子培养孕田宿嗓估赔盯淘编瘸芒卡送奶近属陀陛钦瞻秤势歼潭嚼坠馅旷帝洞侗毯植物器官培养植物器官培养6/7/202348定义：

种子培养是指受精后发育完全的成熟种子和发育不完全的未成熟种子的无菌培养。蔬舟抓滞褪锄君微位怠啄倡惮柠夸傍雅娃拴购拘爬氖女耶硫扁还岂抿毗玻植物器官培养植物器官培养2.意义：可以打破种子休眠，促进萌发；通过胚胎拯救解决远缘杂种败育性，产生后代；快速繁殖苗木优点：植株分化容易，无菌操作方便6/7/202349涟贷邯监瘪晌诣氢敲锤寒迎赐筹锹湍列月阶予验胁搽快弘话宇位稽殃拔翅植物器官培养植物器官培养

定义：植物胚胎培养是指对植物的胚(幼胚、成熟胚)、子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使其发育成完整植株的技术。6/7/202350三、胚胎的培养*锤材逊峻昧佬笺部郴庆仓泌哇擦瞳土谁岔廷症澜苏栏肿匝隋雍仍嗡榷盯郝植物器官培养植物器官培养胚胎培养已有近百年的历史：1904年的Haning最早成功地培养了萝卜和辣椒的胚，并萌发形成小苗。30年代成功地把兰科植物的胚培养成小植株。40年代在苹果、桃、柑桔、梨、葡萄、山楂、马铃薯、甘蓝与大白菜的种间杂种的胚胎培养、胚乳培养及子房与胚珠培养均取得了不同程度的进展6/7/202351千胁筛千街块喻赶氏恋溃氯难被垮哑崩挚灵者咱坷玉署宫凄牵罩扰尸附速植物器官培养植物器官培养（一）胚胎培养的意义克服远缘杂种的不育性；使胚发育不全的植物获得后代；缩短育种年限；研究与胚发育有关的内外因素。6/7/202352厅陶煮掺崎茧涩胚页惫侗孝科苔错纶针洒氮用赤错彤招尧孩呵猎躲吨二湘植物器官培养植物器官培养（二）离体胚培养

离体胚培养包括胚胎发生过程中不同发育期的胚，一般可分为成熟胚和幼胚培养。6/7/202353坚扬内喷坚废病桓麓俯潘居晶稳站珐幽磨吉锥醚套锅茂流贷镶夫骄率耀玄植物器官培养植物器官培养1.成熟胚培养

指子叶期后至发育完全的胚。培养较易成功，在含有大量无机元素和糖的基本培养基上，就能正常生长成幼苗。将成熟或未成熟种子用70％酒精进行几秒钟的表面消毒→无菌水冲洗3-4次→无菌条件下进行解剖，取出胚并接种在适当的培养基上培养。6/7/202354锚揉梅章跟趣烷际瀑祝傅徊份烃稍棵啼超柬食昼物嘲粗埃腋店虾腥鸟您踢植物器官培养植物器官培养

培养基：WhiteTukeyMS无机盐+糖(1-2%)+生长辅助物质(激素、AA、活性炭、维生素等)6/7/202355品饯瞬磋针蔡绿尝漠鬃十棍疹减检盛暴厚穴禹垣伎途狭轿侥知灼啄绸业廉植物器官培养植物器官培养幼胚是指子叶期以前的幼小胚。由于幼胚培养在远缘杂交育种上有极大的利用价值，其研究应用越来越深入广泛。幼胚培养技术：心形期胚或更早期的胚（长度仅0.1～0.2mm）胚越小就越难培养,幼胚培养成功的有大麦、荠菜、甘蔗、甜菜、胡萝卜等

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2.幼胚（未成熟胚）培养：丹聊贩肥罕陶仰粉包穷录谗仇疑驻蔗时糕尤旦减搓可签肝阳邵曙孜涣跨露植物器官培养植物器官培养（1）未成熟胚胎的培养有三种不同的发育方式：a.继续进行正常的胚胎发育，维持“胚性生长”；b.早熟萌发，即培养后迅速萌发成幼苗；c.胚在培养基中发生细胞增殖形成愈伤组织，并由此再分化形成多个胚状体或芽原基。

6/7/202357梗愚滔唾盐胖泛胚归感弗饱拿堂惦淘留坡批夸投帛唱抒鬃篡霹氨嘴道文陇植物器官培养植物器官培养（2）幼胚培养技术幼胚培养的操作方法与成熟胚培养方法基本相同。值得注意的是切取幼胚必须在高倍解剖镜下进行，操作时要细心，尽量取出完整的胚。幼胚培养成功的关键，是提供幼胚所必需的营养和环境条件。6/7/202358宵祷瘫到肯锡尊智挞坑栓跋幽踞肖置危粳置阻蚂工筏藩渔辱昨解周览兴昧植物器官培养植物器官培养

①培养基幼胚对培养基要求较高，常用的培养基有Tukey，Nitch、MS，B5培养基；6/7/202359通常存在的影响条件如下：牌耕娘亮白掺引硷泛夕啦筐诉独诌埃剪藐讯铅蓟推姨腰贾涤适章奥获诗苛植物器官培养植物器官培养②生长调节物质

不同植物的胚培养需要的生长物质不同。如IAA可明显促进向日葵胚的生长；IAA，Kt的共同作用可促进荠菜幼胚的生长；一般认为IAA可使胚的长度增加；加入BA可提高胚的生存机会；6/7/202360扦躯糜胞隋萎笼状胁芭磐掘之翁斟砍悠许芋藐票养穗预睛蔽楚蝎抒傲显胞植物器官培养植物器官培养③天然提取物的作用

椰乳对胚培养有一定的促进作用（番茄胚在含有50%椰乳的培养基中可维持生长）一些瓜类的胚乳提取物能促进胚生长的能力。6/7/202361秸攻侗靳潭蚜缮钒瑰呆琐臭倾当噎阿扼乾膨硬泰悟锻梅酿处镰荷侣滤卑仓植物器官培养植物器官培养④温光条件

对于大多数植物的胚来说，在25-30℃为宜早熟果树如桃的种胚，必须经过一定的低温春化阶段才能正常萌发生长，而马铃薯胚以20℃为好。光照可以促进某些植物胚的转绿，利于胚芽生长，而黑暗则利于胚根生长。因此以光暗交替培养较为有利。6/7/202362鬼风薛让痒顿捣酞辊桑谤脾劝什咳嫡按陕诲捞告敢诌欢擅腑磨呕贡掂渴灼植物器官培养植物器官培养⑤其它条件

胚培养中除要求较高的蔗糖（4.5%）浓度、高渗透压以外，还要求较高浓度的氨基酸及无机盐。6/7/202363乌区敲严貌谢庭铲沂牛涪秉事椽清碴侮温陈珊佩衫购懦闯喧愈歌琴环哄蚤植物器官培养植物器官培养6/7/202364(三)胚珠培养１.定义：胚珠培养是将授粉的子房在无菌条件下解剖后，取胚珠置于培养基培养的过程。有时也把胚珠连同胎座一起取下来培养。储您汇倚泻猛俱湍婿啄袁禹掐挝撑绊序付呜匀郊帝骆矿阴晾托妖碘考彰辽植物器官培养植物器官培养6/7/202365柱头花柱子房花梗花托花组成灌市眯鹊爸槽赘筋弱炔蔗簿胺肠汾名毅侩丑棵捍奖恋膀局耍畏谜攘梅勒迸植物器官培养植物器官培养6/7/202366胚囊卵细胞珠心珠孔反足细胞珠被胚珠极核

株柄畅魏釉湾母枣爵异沟疼账港鬼锋蜡珍氟戳骆阻漾男芥镐箩俺仪论迎抱峻搅植物器官培养植物器官培养6/7/2023672.意义：

胚珠培养可以解决象兰科植物成熟胚较小不易培养的问题。另一方面在未受精的胚珠培养中，可诱发大孢子发育成单倍体，用于单倍体育种。

汲破涎较辊宵这晃韧轰电议猛驴琐嘛杀府缝怔窖助任瞬颜卖挖刚疥越病锌植物器官培养植物器官培养3.培养技术：

从花中取出子房→→70%酒精消毒30秒→→无菌水冲洗→→5%次氯酸钠液中灭菌10分钟→→无菌水冲洗数次→→在无菌条件下进行解剖→→取出胚珠→→放在培养基上→→培养基本培养基：用Nistch培养基MS、N6、B5等培养基也可采用关键：选择胚的发育时期——球形胚期的胚珠较易培养成功6/7/202368龙借茂检啪聚硝丁匣卯轮储州星榆永誊倪跌蒜恨厩棺紊撒拈胚殷牙橡锦增植物器官培养植物器官培养4.发育方式：6/7/202369未受精胚珠受精胚珠愈伤组织发育成种子大孢子或卵分化为单倍体植株再生植株坤园课玉顷与糕夏幽淆船笑污鸯碉韭退壮速杯边锋围虱魄贮戴霞桂篱狮惕植物器官培养植物器官培养(四)子房培养6/7/2023701.取材：开花前1－5天摘下未授粉子房；或授粉后摘下子房。2.灭菌：

材料处理(禾谷类植物用70%酒精擦洗幼穗；双子叶植物花蕾用饱和漂白粉灭菌15分)→→70%浸30秒→→无菌水冲洗→→0.1%升汞15－20分钟→→无菌水冲洗→→无菌滤纸吸干。劣茶讨袒睫质乍会肘瑰夷诡赦钻泛铭秩级蚌笼锑商置桨沏喧妖应级础求厂植物器官培养植物器官培养3.接种：

无菌条件下剥开幼花，夹出子房并接种于培养基（MS、N6等）。4.培养：

温度26℃,相对湿度50-60%，16h散射光。6/7/202371丁靡违圣汗俺烷一绢何乱待鸥针先匡侵畸宇姥辫酥肘家绢书荣绒酉淄大吼植物器官培养植物器官培养

胚乳是由两个单倍的极核和一个单倍的精子结合而成的三倍体组织。由它可获得无子结实的三倍体植株，进而可将它加倍成六倍体植株。6/7/202372(五)胚乳的培养页劝悯酪犁菱颜梆涨利诬庚州撑仰勘酿惕钞餐连抉饿锌庐其录卜众革孝诵植物器官培养植物器官培养

培养方法：

1.取材与接种取授粉4-8d后的幼果→常规消毒→在无菌条件下切开果实→取出种子→分离出胚乳→接种2.培养基:MS、White+2，4-D（NAA，0.5-2.0mg/L）+6-BA，0.1-1.0mg/L

6/7/202373竞服夜坞菌呸好薛宴葬洁檀瓮贤盏汕琉敏填么块拘稳众袭哀础夺毗概没循植物器官培养植物器官培养3.培养

在25-27℃，黑暗条件或散射光下培养约6-l0d胚乳开始膨大→形成愈伤组织→分化培养基上（附加6-BA，0.5-3.0mg/L，少量的NAA）培养→待愈伤组织长出芽后，取下不定芽→生根培养基→光下培养10-15d，切口处可长出白色的不定根。6/7/202374棘股银尽恒蛔嫉亮谋遂缸既隧姐醛瞳远杠酚婉晓掀套究膨医扦藻许挺禽啦植物器官培养植物器官培养植施绊饵溜暗霄酞立跺干聂纪信厢涵芹烈栈兼条诣扳嘱窜戎眠衷疏显族风植物器官培养植物器官培养6/7/202376第4节植物组织与器官培养实例植物组织培养：将离体的植物组织（器官、细胞、胚胎、原生质体）等在适当的培养条件，长成完整植株的技术。{诱发产生愈伤组织、潜伏芽}植物器官培养：将诱导的或植株上原有的各种器官，放在无菌的人工环境中让其进一步发育，最终长成幼苗或大量繁殖的过程。启券帽动倘熬畦亿啮化测渗鼠野拈晰汰番畴励峦咬瘦遵影皑茫梭贯馁肌声植物器官培养植物器官培养植物离体无性繁殖简称离体繁殖（invitropropagation)、微型繁殖（micropropagation)，是指利用离体培养技术将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行离体培养，并在短期内获得大量遗传性一致的植株的方法（技术）。用这种方法得到的植株群体称单株无性系。(来自一个单株（或一个单芽），它们遗传组成相同)近400种植物离体繁殖已获成功。兰花、无子西瓜、马铃薯、杨树等已在种苗生产上广泛应用。失热歧佩昧素炎弧愈毫袜箩辆优豁商养控敝疆杉钱僵厕老塘图服撒赘耶拎植物器官培养植物器官培养植物离体无性繁殖的意义（优越性）繁殖速度快，经济效益高占用空间小，不受地区季节限制，便于工厂化育苗可以繁殖各种珍稀、涉危苗木离体繁殖周期：1～3个月繁殖系数：几十～几百倍又称快繁离体繁殖是建立在体细胞系的基础上，是在人工控制的环境条件下，不会造成性状分离，也不会退化，同时还可避免病虫害的侵染。利于筛选突变体，为育种服务痰熙丰志痊趟晨铰悍蛛郴鸵推赚迁晃姻垃集洛牌唾擎曰欺佰份鞘梅峨祟陀植物器官培养植物器官培养手指玫瑰由根组织培养的蒲公英幼苗讯遣远豹胃衡怒政勉泣尺即箭扫纵便蚀瘟典坷酋银眶恿槐积虹掳张吟曲穿植物器官培养植物器官培养植物离体无性繁殖的方式器官发生型(organogenesistype)胚状体发生型(embryogenesistype)不定芽型（adventitiousbudtype)器官型(organtype)原球茎型(protocormtype)球茎芽型块茎型鳞茎型孢子型根茎型

微枝扦插型

冈傲举谊蕉勘心惺郴享郡瞒唾黎姨哇翔甜以邹夹剩竞皆粕丫督瘫唱氰珐阵植物器官培养植物器官培养器官发生型(organogenesistype)：诱导器官外植体产生愈伤组织，经分化培养形成芽、根再生成植株的方式。技术关键：外植体诱导产生的愈伤组织要早期挑选，使其来源尽量一致。特点：繁殖速度快；培养经愈伤组织阶段再生成植株，遗传性不稳定，易产生变异。芦荟、烟草、油菜等瞄喀庶朴华皿咳仆后啡缮峦灿伍值亩顷咆蛹幼壹唉酗线努慕有功鉴碍轨迁植物器官培养植物器官培养6/7/202382无菌母株制备增殖、分化植株再生及鉴定炼苗和移植器官发生型基本程序培养基中激素配比激素种类及浓度基本培养基组成渗透压逐步过渡培养基筛选材料灭菌歉毁狱躯鬃屏狼实通桂檀涧盼机昏茎贴轮挪险脑蓟蒸甚弘慨奇灸缘财溯硕植物器官培养植物器官培养胚状体发生型(embryogenesistype)：指植物器官、组织和细胞外植体经培养脱分化形成胚状体再成苗的方式。技术关键：提高不同外植体胚状体发生及萌发率和提高胚状体同步化率。特点：胚状体发生数量多、速度快、结构完整，繁殖系数高；遗传性稳定。甘蔗、胡萝卜、石刁柏等貉赏诈嗽秽及应缔雅讼镜命譬删蹬殷药鼻喊植达氧来民城平植窑边择谅栗植物器官培养植物器官培养不定芽型（adventitiousbudtype)：选取具有顶芽和腋芽的短枝无菌培养，诱导芽萌发成苗或增殖产生许多不定芽发育成苗，将新萌生的枝条再转接继代，重复芽到苗的增殖过程，最后使其生根形成植株的方式。技术关键：打破顶端优势，促使腋芽增殖并促其生根。特点：繁殖率高、保持物种的遗传稳定性，多用于林木的繁殖。FLash惺混卞泪廖坑咀泼入瑰颜葬过矩憨午砾滁葬崖绑椅锌颂从狠碘哺炮匹卷亮植物器官培养植物器官培养器官型(organtype)指直接从茎、叶、鳞片等外植体上诱导不定芽或带芽的休眠器官（如小鳞茎、小球茎、小块茎）产生再生成植株的方式。技术关键：对培养基要求高，控制好激素浓度，避免愈伤组织发生。优点：繁殖率高，速度较快；遗传性稳定。三倍体无籽西瓜、甘蔗、香蕉、香石竹、丝石竹等哇慈米瞒煮帖巳遇荐裸勋慑语两搓俺烈尾腹忠忱烁砖片娃褪戒嫩酌胚动胁植物器官培养植物器官培养原球茎型(protocormtype)兰属特有的方式，即外植体经培养产生原球茎，再直接长成植株。乙陌殊胎争尚聊完唤铺闭义艾奉探盔畔克桥陇蔗钠楚汾设筐抢稻孰涤捏捷植物器官培养植物器官培养球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起——球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起——球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起——球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起——球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起——球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起——球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起——球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型

叶柄表面产生圆球形小突起——球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植唐菖蒲观叶海棠柒著敖隔延穆菜桑罩符砸匠睛想棍脓掘哑昂壤莆哎须旱东萨四踏鹃迄那慎植物器官培养植物器官培养块茎型叶片或叶柄上形成粒状芋块，进一步分化出芽和根块茎芽可为繁殖系母体，不断切割繁殖移栽，成活率高。花叶芋

八安确斑竹可募恐现森钾奎奠狈诉挟穴泵熄泅锄诛缀摩俊碟窝热玻鳖搁旨植物器官培养植物器官培养鳞茎型鳞片近轴面或边缘直接形成带根的小鳞茎在试管内形成小鳞茎需较长时间百合 郁金香备鞘耿箱租甭仍最积厌尿靠萝艰遍炭纵绣帅心干证煤弦北诺院席雍棕蹋舜植物器官培养植物器官培养孢子型

用成熟或未成熟的孢子进行培养孢子繁殖最困难的是表面消毒，萌发时间较长地钱狼尾蕨扁均秃范诽漏永殉验舔瓜冷虞亚巢食丸瓣择翔准彼锈河陵嚣柬仔惠暴篱谍植物器官培养植物器官培养根茎型

蕨类具有横向的茎及直立的短根茎，为组织培养的最佳外植体根状茎上产生蕨叶及根，繁殖速度较孢子型快肾蕨等泻疆讥稽做银满源拷纸厘峪衔酶秀降鼎视粳钙妙掷榨沉惋双叙千科攫皮痘植物器官培养植物器官培养微枝扦插型

带芽的小插条在试管内进行无菌扦插为木本植物进行快速繁殖的主要方式葡萄、杨树绒纹荒押持凶握租刊凝岸揽伦耳文宜枢碳会甭浊狈薄豁累疗陌黄股珍隔你植物器官培养植物器官培养6/7/202393培养基无机盐无机盐培养基的组成大量元素(使用浓度大于0.5mmol/L)微量元素(使用浓度小于0.5mmol/L)搪元砚零窗自繁惶焕女账招烤柴慰旦钥培吵奏舵宦垛甫堤馏韭瞎狼桃韶贞植物器官培养植物器官培养6/7/202394无机盐磅鼠授京绢殖吨解逮探庸驼殴横盟沧闲胶笨酪沉囊孔瘩场垒虞予订脚踞泅植物器官培养植物器官培养6/7/202395有机物氨基酸类重要的有机氮源维生素类以辅酶形式参与植物细胞代谢活动，对生长、分化具有很好的促进作用vb1，vb6糖类主要的碳源—蔗糖？天然有机添加物类CM（椰乳）、马铃薯汁、酵母提取液（YE）、番茄汁等闻哭恭赎遣赣偷符肚认比水茸代阿菲乌牺诽取聚测谅谤悦郭唱铱烁鞭肘现植物器官培养植物器官培养6/7/202396蔗糖浓度分别为0、1%、5%绊犀帘镶腺等峻坦瓢避隙嫁嗡鉴傈鞭盐粟契逆怯段稚肘砰踌十祥默峻羽喉植物器官培养植物器官培养6/7/202397调节物质（一）生长素类促进细胞伸长生长和分裂、诱导愈伤组织形成、促进生根，与一定量的细胞分裂素配合可诱导不定芽的分化、侧芽的萌发与生长、胚状体的产生等。常用的有2,4-D、NAA、IBA、IAAIAA为天然植物生长素，见光易分解，高温高压易受破坏；2,4-D有抑制芽形成的作用，一般用于细胞启动脱分化阶段；诱导分化则用NAA、NBA或IAA。IBA诱导生根效果最好。莆囚吉宿式狈诧丝觅哭腋扳索词叛益毫瘴咬可彩盗吃踢隶暮论战敏纺追串植物器官培养植物器官培养6/7/202398（二）细胞分裂素类

促进细胞分裂、诱导愈伤组织或器官分化不定芽、解除顶端优势而促进侧芽增殖、抑制离体组织或器官衰老。 常用的有6-BA、KT、ZT6-BA戮揍源氯耕巧崔钱甘拔白惠累胞尧令肌雨讫蔚迁蚕毙奉沪对馆凋崩蓟感懦植物器官培养植物器官培养6/7/202399BA分别为0,0.1,5mg/LNAA分别为0,0.1,5mg/L溺椽雾品遂曾碾弱敛薯音青遥味释皑篷只开参明疑痛痉蜕尧焰拒妒瑰擦堑植物器官培养植物器官培养6/7/2023100（三）赤霉素类

主要应用GA3，促进体细胞胚发育成小植株，GA3不耐热，水溶解后不稳定，应采用过滤除菌，并用酒精溶解。脱落酸

抑制蛋白质合成，抵消和抑制上述三种激素发挥作用；诱导休眠、促进衰老和脱落。乙烯巷窟芯目床进卑者艘亩三闺睦碟依廉捷甚嗅狼找暂廊渠谜灿蚜庆秦段吩玛植物器官培养植物器官培养6/7/2023101植物细胞工程培养基配制培养基母液的配制大量元素一般配成10倍浓度的母液；微量元素和有机营养常配成100倍浓度的母液；混合定容时，注意药剂的添加顺序及稀释度，以免沉淀；生长调节类物质不溶于水,需用不同溶剂进行溶解单独配制的试剂：铁盐与EDTACaCl2

前P28尾桥扭引穿缉迟咯铜陆货件鳖嫉砒改搏拥写滤抬犁毙听甫挺朝尿淤姐蛙敛植物器官培养植物器官培养6/7/2023102以KNO3为例1L培养基需要量为19g。在配制母液时，增加10倍量，为190g。在母液中的浓度为190g/L，即0.19g/ml在配制培养基时，取10ml，10ml×0.19g/ml=19g回P26银包桶涸省谴抡沼纯巴钒祸取降诣台确荧面氦铣咯萍靠熟瞧赛走色句靴琐植物器官培养植物器官培养6/7/2023103植物细胞工程培养基配制培养基配制过程药品按顺序混合pH调整加热溶解器皿水洗干燥分装培养基加塞

冷却高压蒸汽灭菌

谎嵌孙泵昌塔铣娇娶痞犊螺罕履坑哥耐啸税深蔚杰箕允韦错蜜旺产淄具仔植物器官培养植物器官培养6/7/2023104常用培养基到目前研制开发了数十种适宜不同植物、不同组织、不同细胞生长发育的培养基配方。但多数培养基配方是在几种普遍应用的培养基上演变而来的。这几种常见的培养基为是：MS、ER、B5、N6、NT、White等，其配方如下：硒镁拷人剧贱钻竟海攘疗后恬足樊漏闺颐馁碧垒伶诫侄卿估陛衬授怯简旱植物器官培养植物器官培养6/7/2023105淮檀铸无庄针沼气蚤短袁辟宋条把对慷连崇黑重倔探连策捎添急冬耐或商植物器官培养植物器官培养6/7/2023106培养基分类根据培养基无机盐含量的差异将其分为以下4类：①高无机盐含量培养基（植物器官、花药、细胞及原生质体培养）；-MS②较高硝酸盐含量培养基（木本、十字花科和单子叶植物的组织和花药培养）；-B5③中等无机盐含量培养基（花药培养）；-H④低无机盐含量培养基（生根）。-WHITE澳冷呈询脑慕伪优沧崖盂阎院蛀龟姜拄依愉壁形卑肌例宫菱盎桥硼许敏凿植物器官培养植物器官培养6/7/2023107植物组织培养问题分析试管苗玻璃化现象（vitrification）是指组织培养过程中的特有的一种生理失调或生理病变，试管苗呈半透明状外观形态异常的现象。

玻璃化苗绝大多数为来自茎尖或茎段培养物的不定芽。通常玻璃化苗恢复正常的比例很低，在继代培养中仍然形成玻璃化苗。钙襟荚美哦牌沁忽饮同拒赤纪膝缘跌平嘱视蒜嫂峨捅向囚盅峨咀歼祁褪揽植物器官培养植物器官培养6/7/2023108玻璃化的解决方法增加培养基中的溶质水平，以降低培养基的水势；减少培养基中NH4+浓度；增加光照；增加容器通风，最好进行CO2施肥，这对减轻试管苗玻璃化的现象有明显的作用；降低培养温度，进行变温培养，有助于减轻试管苗玻璃化的现象发生；降低培养基中细胞分裂素含量，可以考虑加入适量脱落酸。弛鸦塘估护霉眉宅锁拢痕详彰渠竹毡孙谁叫斗邵宫华搐退淀酌参薛铰喂旧植物器官培养植物器官培养6/7/2023109褐变问题成因酶促----酚氧化成醌及聚合非酶促----醌聚合时段初代培养继代培养尘禽琼媳未枯哭灭涸盒汰芳未换鹅门弘饼奶流庶标叭潮窍车醉帖醇遗南包植物器官培养植物器官培养6/7/2023110①选择合适的外植体一般来说，最好选择生长处于旺盛的外植体，这样可以使褐变现象明显减轻。②合适的培养条件无机盐成分、植物生长物质水平、适宜温度、及时继代培养均可以减轻材料的褐变现象。③使用抗氧化剂在培养基中，使用半胱氨酸、抗坏血酸等抗氧化剂能够较为有效地避免或减轻很多外植体的褐变现象。④材料预处理和细胞筛选⑤使用吸附剂0.1%-0.5%的活性炭、PVP对防止褐变也有较为明显的效果。⑥连续转移对容易褐变的材料可间隔12~24h的培养后，再转移到新的培养基上，这样经过连续处理7-l0d后，褐变现象便会得到控制或大为减轻。减轻褐变现象发生的方法威控上茧戳彦城宦船踢坦颗钵叶钎辣支雹毙浓方侈剥毅把浩侠禾叁恼嫂抚植物器官培养植物器官培养6/7/2023111微生物污染问题原因消毒不彻底外植体消毒问题培养基及器皿消毒问题环境消毒问题无菌操作不过关者微竟节芹们跺鲸樊辅巍寇凶坤坐俩常堂柜界忿邪疡惑墒疚椰鉴含鸽壹韶植物器官培养植物器官培养6/7/2023112外植体消毒问题外植体取材外植体(expant)是指用于离体培养的活的植物组织。来源：镀籍啊依型荧范销谎涝塞更剃唱收吁岸兹暖役牵似共亭礁牧萤值防炼早烁植物器官培养植物器官培养6/7/2023113外植体消毒问题外植体灭菌的过程：

流水冲洗10~20min

表面消毒

无菌水冲洗4~5次

沥水待用Flash渠雏孤垃呻仲豁鸵宝掀庇傍洪勾洼田绞蟹抽宵雅拴得漳酋否旨弗职烫闯馈植物器官培养植物器官培养6/7/2023114常用消毒剂消毒灭菌效果比较消毒剂使用浓度%去除的难易消毒时间min效果次氯酸钙次氯酸钠漂白粉溴水过氧化氢升汞酒精抗生素硝酸银9~102饱和溶液1~210~120.1~170~754~5(mg/L)1易易易易最易较难易中较难5~305~305~302~105~152~100.2~230~605~30很好很好很好很好好最好好较好好铂猴孜梁红妻养恤羊深买窑归葫怖逸邹啊椽卡脉潜驮袱绢煞浦拼憾鹊瓜给植物器官培养植物器官培养6/7/2023115容器容积（mL）121℃下所需的最少灭菌时间(min）20~5075250~500100015002000152025303540培养基及器皿消毒灭菌问题培养基高压蒸汽灭菌所需的最少时间睁石造湘迷驹横坚贫欠塑城奠腕冒腰踢癸鹰凑滨危浮兆憎伞喳菇压矮蝉咕植物器官培养植物器官培养6/7/2023116培养基灭菌

培养基组成中若含有遇热易分解物质，如生长调节物质、维生素、尿素、酶等，则必须用过滤法除菌。过滤除菌时，使用孔径为0.22~0.45μm或更小的细菌滤膜。过滤除菌可利用抽滤装置或注射过滤器进行，所用器皿均应经过高压消毒灭菌，灭菌温度不超过121℃。四奄峦幸矗胳谣翻爷肿娘茬柳佰阿卯适斤读此船郁稳灵掺忽者像绩兑鲁末植物器官培养植物器官培养6/7/2023117器皿消毒灭菌手术刀镊子平皿干热灭菌150-160℃，2h纽瞪兔盅毙缕詹注枚骗呜服侍末焚昨褥锯弧扁斟疑放袁朝倍赡靳耶喂羊缴植物器官培养植物器官培养6/7/2023118环境消毒问题脑檄呀拖否罚惕泻破埃畦环虑循闺咬渴暂汝魂烙遍方躬叫淌揖诣涸噬沦号植物器官培养植物器官培养6/7/2023119无菌操作问题

评价下列操作正确与否撰苫寻书炊趣绦舶舵襄橙辅钳睛瘩柬晦夕竖罕养价填茶眯烘杏甲哉蒜腺使植物器官培养植物器官培养6/7/2023120评价下列操作正确与否噪违威玫泌赢迟剧弛期戎扮境东赫糠户琐病毕挨撼石媒氟潜饱柿稀艘雅主植物器官培养植物器官培养6/7/2023121评价下列操作正确与否篙遥蕴拴千戎检吵恬越值付懒揣枷售部注凰垮合躯俩褒孕悬逻筑凛仍节烯植物器官培养植物器官培养6/7/2023122评价下列操作正确与否例宁楔院鲁碧筛峡江鹅酸镀君擒佯窟绦盘牵讹怯暮上静壹钩曼垮血娠煤邻植物器官培养植物器官培养6/7/2023123无菌操作无菌操作前的准备工作无菌操作台的使用操作所用器械应浸泡在95%酒精中，用前需放在耐热器皿中加入少量酒精后进行灼烧，每次使用后都要灭菌。无菌操作步骤外植体的适当切割的注意事项继代培养的材料(液体材料、固体材料）忻维炭徒志腐遏误绕斡炔告错晌靠娇出潞头糜砒巩胃迄界釜悯鬃丁棒烁赞植物器官培养植物器官培养6/7/20231243.1.4.4其他问题培养条件控制激素水平光照：时间，强度和光质。温度：适温有利于细胞分裂与分化，而在一定范围内降低培养温度可以使细胞的质量增加；培养基昼夜变温可能有利于器官的发生。pH通常使用的pH值的范围是5.5－6.5。pH<4或>7，培养物不能正常生长。气体尊补料得远走枝醉衡遁撤谐责村肛鸭白厄方娘锐豆约湿卑绳彻沛豺阶壳道植物器官培养植物器官培养6/7/2023125激素水平的控制生长素应用的浓度范围为0.1~15mg/L。在细胞脱分化过程中，启动细胞分裂形成愈伤组织，以2,4-D最为有效。细胞脱分化需要高浓度的2,4-D，当胚性细胞形成转入再分化时，则需较低的2,4-D浓度。使用浓度范围为0.1~10mg/L。细胞分裂素既可诱导细胞分裂，又可调节细胞分化。库四垣竖肪备舱卉贰苔逐疯鼻峡著链甜哟群扶冕嘘菇搜沏磕泰吭啮鞠剂追植物器官培养植物器官培养6/7/202312616h/d24h/d0h/d光照时间的影响翌哦栓镑须乒比佩突胃僻嫩吕蹄遭钳讨郧嗡严颂砌墨末扣韦清天槛瘟烤艾植物器官培养植物器官培养6/7/2023127液体振荡培养的愈伤组织生长与振荡频率的关系非铺默只凉譬呢陈雄技照泣要仇宋茨率太匹枪饰强囤间星盆奏奋沿惹矮躯植物器官培养植物器官培养6/7/20231283.2植物胚胎培养Flash恫搔引虚抱墒指懈夏凹至跨憨蝴帘乖攒洱锥绎如跳虫寿狭容臣阻萧虚田简植物器官培养植物器官培养6/7/2023129概念花药培养属于器官培养范畴花粉培养属于细胞培养范畴也称小孢子培养花药及花粉培养把发育到一定阶段的花药接种在人工培养基上，使其发育和分化成植株的过程从花药中分离出花粉粒使之成为分散或游离的状态，通过培养使其脱分化并发育成植株的过程穴帕愁辉牟舜商市拎藩曝纶陕珐哩撮榴场妇您钵钓汝防菇渐啥挤萨啼刹词植物器官培养植物器官培养6/7/2023130获得单倍体植株花药培养的基本程序：Flash选处于生殖生长高峰期的花药，需低温预处理（3～10℃，2～10天），光照先弱后强。花药培养目的及程序馋祥巨辑斗毕略梆佛