高中生物-动物细胞融合与单克隆抗体教学课件设计

专题二细胞工程动物细胞融合和单克隆抗体1自主阅读，p52第二自然段，思考下列问题：

探究一动物细胞融合①两个或者两个细胞②一个细胞（杂交的单核细胞）（概念要点）：什么是动物细胞融合？探究一动物细胞融合1灭活的病毒诱导细胞融合的原理是什么?2不灭活病毒的可以诱导细胞融合吗？诱导方式2.动物细胞融合技术的应用：

⑴突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能；⑵为制造单克隆抗体开辟了新途径

探究一动物细胞融合探究一动物细胞融合

项目植物体细胞杂交技术动物融合技术原理细胞膜的流动性植物细胞全能性细胞膜的流动性融合前提酶解法去除细胞壁分散单个细胞诱导方式物理法化学法物理法化学法生物法结果杂种植株获得杂种细胞或者细胞的产物意义克服远缘不亲和障碍克服远缘不亲和障碍抗体不纯

抗原动物体内刺激效应B抗体（血清）思考：传统抗体如何生产？有什么缺陷？缺点：产量低、纯度低、抗体的特异性差抗原不纯探究二单克隆抗体的制备

每一个B淋巴细胞只分泌一种化学性质单一，特异性强的抗体。如果利用单个B淋巴细胞进行细胞培养，形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体——单克隆抗体。问题（阅读课本P53）怎样获得化学性质单一、特异性强的抗体呢？探究二单克隆抗体的制备在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞能无限增殖形成细胞群吗？什么样的细胞能够在体外无限增殖呢？

——骨髓瘤细胞！探究二单克隆抗体的制备⑵如何诱导融合？

聚乙二醇PEG⑴如何得到B淋巴细胞？

☆制备单克隆抗体的过程⑶细胞两两融合后，有哪些类型？B-B瘤-瘤

B-瘤(杂交瘤细胞)未融合的细胞（A，B）⑷整个过程筛选几次?

单克隆抗体制备过程中，总共有两次筛选，第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，两次筛选的原理和方法是不相同的。

①首先用选择培养基筛选出杂交瘤细胞①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。

③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，可是能不断分裂增殖。你想到筛选杂交瘤细胞的方案了么？

小资料：在培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖细胞！加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞因为可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。通常进行克隆化培养和抗体检测的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔细胞培养板上培养，使每孔细胞不超过一个，再由这些单细胞克隆生长，然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。②再筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞阳性孔

在单克隆抗体制备过程中，两次筛选的原理和方法是不相同的。⑻如何得到大量的单克隆抗体？

体内培养体外培养单克隆抗体特点：——灵敏度高、特异性强、可大量制备大胆尝试科学家从某些能无限增殖的细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发许多动物细胞的分裂,这为单克隆抗体的制备提供了新的途径,根据前面学习的知识，尝试用其他方案制备单克隆抗体.供体DNA质粒PRG重组质粒浆细胞重组细胞体外培养限制酶DNA连接酶导入检测筛选设计方案单克隆抗体筛选杂交细胞杂交瘤细胞体外或体内细胞培养筛选骨髓瘤细胞诱导细胞融合特异性杂交瘤细胞杂交瘤细胞系提取经过免疫的B淋巴细胞动物细胞融合技术动物细胞培养技术单克隆抗体的制备过程：特点：既能产生专一抗体又能大量繁殖特点：特异性强灵敏度高可大量制备注射抗原免疫4、单抗隆抗体的应用①作为诊断试剂②定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病

用于体外诊断人类和动植物疾病及病原鉴定，纯度高、特异性强，具有准确、高效、简易、快速的优点。③用于治疗疾病和运载药物

利用同位素标记单抗，在特定组织成像

制成生物导弹，将药物定向带到癌细胞所在的位置，在原位杀死癌细胞，疗效高、副作用小。单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并可以大量制备。⑵用于治疗疾病和运载药物①特异性强、灵敏度高

生物导弹——单克隆抗体＋抗癌药物

②疗效高、毒副作用小结合同位素的单抗-----生物导弹结合同位素的单抗-----生物导弹单抗放射性同位素习题巩固1、单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的（

）

A.B淋巴细胞B.T淋巴细胞C.骨髓瘤细胞D.杂交瘤细胞

2.用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（）

A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞

B用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞

C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合

D筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体DB直击高考（2014年新课标卷）某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示。（1）4

y

y小鼠的血清抗体效