第二节病原微生物实验室生物安全要求

第二节病原微生物实验室生物安全要求第1页，课件共34页，创作于2023年2月重要意义建立病原微生物研究安全平台的需要生物防护（国际）的需要传染病预防与控制的需要动物防疫的需要出入境检验检疫的需要医院感染控制的需要GOARN检测网络离不开生物安全实验室第2页，课件共34页，创作于2023年2月病原微生物实验室标准和指南《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》WS233-2002《生物安全实验室建筑技术规范》GB50346-2004《人间传染的病原微生物名录〉卫生部《可感染人类的高致病性病原微生物（毒）种或样本运输管理规定》卫生部第45号令《实验室生物安全通用要求》GB19489-2008第3页，课件共34页，创作于2023年2月病原微生物危害评估确定生物安全防护水平依据危害评估制定微生物操作、仪器设备操作程序与管理规程评价微生物实验室安全状况的依据第4页，课件共34页，创作于2023年2月病原微生物危害程度分类病原微生物危害程度分类的主要依据微生物的致病性微生物的传播方式和宿主范围当地所具备的有效预防措施当地所具备的有效治疗措施第5页，课件共34页，创作于2023年2月病原微生物危害程度分类《病原微生物实验室生物安全管理条例》

4类第四类：危险程度最低第三类：第二类：第一类：危险程度最高

《实验室生物安全通用要求》和WHO《生物安全手册》4级Ⅰ级：危险程度最低

Ⅱ级：

Ⅲ级：

Ⅳ级：危险程度最高高致病性病原微生物第6页，课件共34页，创作于2023年2月国内外病原微生物危害程度分类比较《病原微生物实验室生物安全管理条例》《实验室生物安全通用要求》(GB19489-2004)WHO《生物安全手册》(第三版，2004)四类在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。

Ⅰ级（低个体危害，低群体危害）不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。Ⅰ级（无或极低的个体和群体危险）不太可能引起人或动物致病的微生物。

病原微生物的危害等级划分和标准

第7页，课件共34页，创作于2023年2月三类能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。

Ⅱ级(中等个体危害，有限群体危害)能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原微生物。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。

Ⅱ级（个体危险中等，群体危险低）病原微生物能够对人或动物致病，但对实验室工作人员、社区、牲畜或环境不易导致严重危害。实验室暴露也许会引起严重感染，但对感染有有效的预防和治疗措施，并且疾病传播的危险有限。管理条例 通用要求 WHO安全手册国内外病原微生物危害程度分类比较第8页，课件共34页，创作于2023年2月

国内外病原微生物危害程度分类比较二类能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。Ⅲ级（高个体危害，低群体危害）能引起人类或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的病原微生物。Ⅲ级（个体危险高，群体危险低）病原微生物通常能引起人或动物的严重疾病，但一般不会发生感染个体向其他个体的传播，并且对感染有有效的预防和治疗措施。管理条例 通用要求 WHO安全手册第9页，课件共34页，创作于2023年2月

国内外病原微生物危害程度分类比较一能够引起人类或动物严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。

Ⅳ级(高个体危害，高群体危害)能引起人类或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接或间接或因偶然接触在人与人，人与动物，动物与动物间传播的病原微生物。Ⅳ级（个体和群体的危险均高）病原微生物通常能引起人或动物的严重疾病，并且很容易发生个体之间的直接或间接传播，对感染一般没有有效的预防和治疗措施。管理条例 通用要求 WHO安全手册第10页，课件共34页，创作于2023年2月《人间传染的病原微生物名录》介绍病毒160类细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体155类真菌59类朊病毒6种

第11页，课件共34页，创作于2023年2月生物安全实验室主要设备紫外灯高压灭菌器生物安全柜第12页，课件共34页，创作于2023年2月生物安全柜概念超净工作台生物安全柜生物安全柜的分级Ⅰ级生物安全柜Ⅱ级生物安全柜Ⅲ级生物安全柜第13页，课件共34页，创作于2023年2月Ⅰ级生物安全柜可开启前窗在负压下操作表面风速在75-100fpm排出的气体经HEPA过滤保护操作人员和环境适用于要求生物安全等级1、2、3的工作适用于样品不需保护的实验工作第14页，课件共34页，创作于2023年2月Ⅱ级生物安全柜可开启前窗从前开口向内的气流用于保护人员经HEPA过滤后向下送的层流，以保护样品排出的气体采用HEPA过滤器过滤则用于保护环境表面风速在75-100fpm

适用于要求生物安全等级为(Ⅰ-Ⅲ）的工作第15页，课件共34页，创作于2023年2月Ⅱ级生物安全柜的分类B1TypeBB2ClassIITypeAA1A2第16页，课件共34页，创作于2023年2月Ⅱ级生物安全柜分类II级A1型生物安全柜

70%柜内循环，30%空气排出，工作窗口流速75fpmII级A2型生物安全柜

70%柜内循环，30%空气排至室外，工作窗口流速100fpmII级B1型生物安全柜

30%柜内循环，70%空气排出,工作窗口流速100fpmII级B2型生物安全柜

100%空气排出,工作窗口流速100fpm第17页，课件共34页，创作于2023年2月Ⅲ级生物安全柜箱体完全封闭，将微生物与人完全隔离；通过手套箱操作。保护工作人员、产品和环境。一般无定型产品，需特殊定货。可将若干III级生物安全柜连在一起使用全部生物流程的操作均在柜内完成，以确保安全。第18页，课件共34页，创作于2023年2月各级生物安全柜之间的差别生物安全柜级别正面气流速度（m/s）气流循环量(%)是否需要排风管道

室内循环排出室外量Ⅰ级0.381000否Ⅱ级A2型0.517030否Ⅱ级B2型0.510100需要Ⅲ级NA0100需要第19页，课件共34页，创作于2023年2月不同保护类型及生物安全柜的选择保护类型生物安全柜的选择个体防护，针对危害程度二、三、四类的病生物个体防护，针对一类病原微生物，手套箱型实验室个体防护，针对一类病原微生物，防护服型实验室实验对象保护少量挥发性放射性核素/有毒化学品的防护挥发性放射性核素/有毒化学品的防护Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级

Ⅲ级Ⅰ级、Ⅱ级Ⅱ级、Ⅲ级Ⅱ级A2型、Ⅱ级B1型Ⅰ级、Ⅱ级B2、Ⅲ级第20页，课件共34页，创作于2023年2月生物安全柜安装使用维护定期监测并及时更护过滤器第21页，课件共34页，创作于2023年2月生物安全实验室分级生物安全一级(BSL-1)生物安全二级(BSL-2)生物安全三级(BSL-3)生物安全四级(BSL-4)第22页，课件共34页，创作于2023年2月生物安全二级(BSL-2)

适合于对人和环境有中度潜在危险的病源，与BSL—1的区别在于：

(1)有门禁装置，进行实验时，限制进入实验室；

(2)实验人员均接受过病原处理方面的特殊培训;(3)配备高压灭菌锅，二级生物安全柜；

(4)门外必须贴生物危险标识.

第23页，课件共34页，创作于2023年2月生物安全三级(BSL-3)

在该级别中开展有关内源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入该病源。会引发严重的、可能致死的疾病。（1）实验室经过特殊设计和施工；（2）实验人员应在处理致病性的和可能使人致死的病源方面受过专业训练，并由对该病源工作有经验的、有资格的科学工作者监督；（3）所有与传染源操作有关的步骤，都在生物安全柜中进行；（4）配备双扉高压灭菌锅并要求带有高效过滤装置；第24页，课件共34页，创作于2023年2月二级生物安全实验室P2实验室，又称BSL-2，是生物实验室安全等级的一个分类。在现在各类实验室当中，P2实验室是使用最为广泛的生物安全等级实验室。第25页，课件共34页，创作于2023年2月BSL-2实验室示意图第26页，课件共34页，创作于2023年2月无需特殊选址，普通建筑物即可，但应有防止节肢动物和啮齿动物进入的设计。每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。在实验室门口处应设挂衣装置，个人便装与实验室工作服分开放置。实验室的墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑，不得铺设地毯。BSL－1实验室设施和施设备（一）第27页，课件共34页，创作于2023年2月实验台面应防水，耐腐蚀、耐热。实验室中的厨柜和实验台应牢固。厨柜、实验台彼此之间应保持一定距离，以便于清洁。实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗。实验室内应保证工作照明，避免不必要的反光和强光。应有适当的消毒设备。BSL－1实验室设施和施设备（二）第28页，课件共34页，创作于2023年2月

在实验室所在的建筑内应配备高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求。应在实验室内配备生物安全柜。应设洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗。有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用电源。实验室出口应有在黑暗中可明确辨认的标识。

BSL－2实验室设施和施设备（二）第29页，课件共34页，创作于2023年2月与微生物危险度等级相对应的

生物安全水平、操作和设备第30页，课件共34页，创作于2023年2月不同生物安全水平对设施的要求第31页，课件共34页，创作于2023年2月病原微生物实验室个人防护要求BSL-1工作服手套BSL-2防护服手套帽子口罩护目镜BSL-3