链脲佐菌素糖尿病模型动物血糖和体位动态变化的研究

链脲佐菌素糖尿病模型动物血糖和体位动态变化的研究

stz）多酚类药物的筛选常用于抗高血压药物的筛选。此模型实验动物的血糖为一动态变化过程。在降血糖药物筛选中,选择这种动态变化过程中血糖水平维持在较高水平的时段作为观察窗,有助于对降血糖药物效果的判断。然而,有关STZ给药后需多长时间血糖能达到较高水平并维持多长时间则报道不一1材料表面1.1动物昆明种小鼠和Wistar种大鼠均由南方医科大学实验动物中心提供。1.2试剂STZ为Sigma产品,其他试剂均为国产分析纯产品。1.3血液中的糖计优越(Advantage)血糖仪及检测试纸由上海罗氏公司提供。2方法2.1stz溶液的制备在临用前配制,STZ用0.1mol/L、pH4.2的柠檬酸钠缓冲液溶解,配成4mg/ml的溶液。2.2stz糖尿病模型2.2.1糖尿病模型组模型雄性Wistar大鼠30只,体质量170~210g,随机取其中20只作为糖尿病模型组,另10只作为空白对照组。给药前大鼠禁食过夜,糖尿病模型组大鼠STZ溶液按1.5ml/100g体质量给药,即60mg/kg,另10只大鼠按同样方法腹腔注射等体积生理盐水(NS)作为对照。。2.2.2糖尿病模型组小鼠stz的给药方案昆明种雄性小鼠30只,体质量17~21.5g,随机取其中20只作为糖尿病模型组,另10只作为空白对照组。给药前小鼠禁食过夜,糖尿病模型组小鼠STZ溶液按0.1ml/10g体质量给药,即40mg/kg,连续5d;空白对照组按同样方法腹腔注射等体积NS。2.3实验动物的成模率剪尾取血,用血糖仪测定上述实验过程中动物的血糖水平。以空腹的条件下血糖≥11.1mmol/L为糖尿病造模成功。实验动物从开始注射STZ到实验结束,连续观察30d。实验期间动物的死亡数不计入成模率内,成模率=空腹血糖≥11.1mmol/L的未死亡动物数/实验动物总数。糖尿病动物每5d剪尾取血测定空腹血糖水平,并测定随后24h的饲料量(g)和饮水量(ml)以及体质量。分别以饲料量(g)/体质量(g),饮水量(ml)/体质量(g)计算进食量系数和饮水量系数。2.4糖尿病模型组血糖水平的相关分析糖尿病模型组和对照组的血糖变化采用两样本均数t检验,糖尿病模型组的血糖水平与体质量、进食量系数、饮水量系数变化的相关性采用双变量相关分析(Bivariate)进行统计学处理。3结果3.1stz分次注射糖尿病模型雄性大鼠20只一次性STZ60mg/kg,血糖升高至≥11.1mmol/L有18只,其中有5只在30d观察期内陆续死亡,据此计算其成模率为65.0%,动物死亡率为25.0%。STZ注射后15d,大鼠血糖增高至最高水平,第25天后血糖呈明显下降趋势,第30天比第15天降低了26.9%。糖尿病鼠的体质量增长明显低于正常鼠。饮水量系数的变化曲线与血糖变化的基本一致,第25天后饮水量系数也呈明显下降趋势,第30天比第15天降低了43.8%。大鼠进食系数在给予STZ后的25d持续升高,随后显著下降,第30天时比第25天降低了80.4%,并低于正常对照组的水平。糖尿病模型组的血糖水平与体质量、进食量系数、饮水量系数变化的相关性采用双变量相关分析的结果表明,饮水量系数与血糖水平具有显著的相关性(P<0.01),相关系数r=0.974,而进食量系数和体质量与血糖水平无明显的相关性。3.2stz分次使用对小鼠血糖和饮水量系数的影响雄性小鼠成模率为90.0%,整个实验观察期间(30d)无动物死亡发生。雄性昆明鼠自STZ注射造模开始,血糖、体质量、进食量系数和饮水量系数的变化。STZ注射后,小鼠血糖持续升高,约在第15天达到高峰,并维持至第25天,随后似有轻度的下降趋势。糖尿病鼠的体质量增长明显低于正常鼠,进食系数和饮水量系数则明显高于正常鼠。小鼠进食系数在给予STZ后的25d持续升高,饮水量系数的变化曲线特征与血糖变化的曲线基本一致。相关性采用双变量相关分析的结果表明,血糖水平与体质量、进食量系数、饮水量系数均具有显著的相关性,与体质量的相关系数r=0.939(P<0.05),与进食量系数的相关系数r=0.923(P<0.05),与饮水量系数的相关系数最高,r=0.970(P<0.01)。4饮水系数与血糖水平的变化本研究发现,无论STZ是采用单次注射或分5次注射,对血糖升高的速度并无太大的影响,均大约在STZ开始注射后的15d到达高峰,这与蒋升等的研究报道相近糖尿病动物均有明显