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文档简介
病毒疫苗制造2021/5/91疫苗?疫苗是指为了预防、控制传染病的发生、流行,用于人体预防接种的疫苗类预防性生物制品。2021/5/92吸附柱添加500ul的BL疫苗的制造一、细菌性灭活疫苗的制造二、细菌性活疫苗的制造三、病毒疫苗的制造2021/5/93病毒疫苗的制造
病毒性禽胚培养疫苗制造病毒性细胞培养疫苗制造病毒性动物组织疫苗制造2021/5/94病毒性禽胚培养疫苗制造鸡胚选择
痘病毒、正粘病毒、副粘病毒和疱疹病毒等一类生物制品,目前仍然利用禽胚特别是鸡胚制备,如鸡新城疫苗、禽流感疫苗、犬瘟热鸡胚弱毒疫苗等。禽胚疫苗生产的原材料来源方便、质量比较容易控制,制造程序简单,不需要过高的设备条件,生产的疫苗质量可靠。2021/5/95(一)鸡胚选择
受精卵应来自SPF鸡群,至少源于未用抗生素药物的非免疫鸡群,以免受母源抗体的干扰和残留抗生素的影响。从受精卵入孵开始至培养全过程都应保持无菌,要求一定的温度和湿度,且需不断翻动,然后选择。选择一定日龄、发育正常的胚用于接毒培养。2021/5/96(二)种毒与毒种继代
目前适应于鸡胚的种毒多系弱毒,包括自然弱毒与人工培育的弱毒两类。各种制苗用的种毒多数由国家菌毒种保藏部门或指定单位保存,保存的种毒多为冻干毒。冻干毒种需按规定要求在鸡胚继代复壮,通常继代3代以上,经检定符合标准后方可作力生产疫苗的毒种,毒种检定内容包括无菌检验、毒价测定和其他项目的检定等。2021/5/97(三)接毒与收获1.接毒
鸡胚接毒涉及接毒途径和接毒量两方面。根据不同的病毒与不同疫苗生产程序,选择最佳接种途径和接种量。接种途径:绒毛尿囊膜接种11~12日龄胚尿囊腔接种9~11日龄胚羊膜腔接种10~12日龄胚卵黄囊接种5~8日龄胚如鸡新城疫I系和II系毒采取尿囊腔接毒,前者接种10-3稀释毒种0.1ml,后者接种10-4稀释毒种0.1ml。鸭瘟鸡胚化弱毒疫苗采用绒毛尿囊膜接种50-100倍稀释毒0.2ml。2021/5/982.培养收获
鸡胚接毒后培养增殖的时间和温度、湿度以及收获的标准与内容物依不同的病毒和不同的疫苗而异。如鸡新城疫I系疫苗,接毒后于38.5~39
C、相对湿度60%~70%条件培养增殖,收集接毒后24~48h内死亡胚,置0~10C冷却4~24h,收获胚液,进行无菌检验,供制备湿苗用。
2021/5/99(四)配苗
按规定收获的胚液、胎儿和绒毛尿囊膜乳剂经无菌检验合格后即可进行配苗。
1.湿苗通常于鸡胚液内,按每毫升加入青霉素和链霉素500~1000U,放置0~10
C冷暗处处理后分装。
2.冻干苗经无菌检验后合格的胚液或胚液、胎儿、绒毛尿囊膜乳剂,按比例加入保护剂,充分混合后滤过,于滤液内按每毫升加入青、链霉素500~1000U,混合后分装冻干。
3.灭活苗
收获鸡胚液经无菌检验及毒价测定合格后,按规定比例加入平衡液,按不同病毒的灭活温度、时间进行灭活,加入相应的佐剂,制备成灭活疫苗,放置4-10
C保存。2021/5/910流程图2021/5/9112021/5/9122021/5/9132021/5/9142021/5/9152021/5/916流程图——病毒性禽胚疫苗制造工艺流程受精卵禽胚毒株种毒灭活病毒液鉴定培育检验检验配制原料佐剂配苗、乳化灭活疫苗含病毒尿囊液或禽胚组织含病毒悬液配苗活疫苗保护剂分装、冻干分装灭活原料种子扩增收获配制纯化病毒悬液接种2021/5/9172021/5/918影响疫苗质量的因素毒种:毒种的优劣不仅影响疫苗的产量,而且也影响疫苗的质量,毒种不纯会产生相互干扰,减毒活疫苗毒种若毒力回升易造成事故,因此毒种的选择应挑选那些致病性低,免疫效价高而持久,抗原谱广的,易增殖,便于生产,可在传代细胞上传代的毒种。培养病毒的细胞:细胞若有潜在的致癌性病毒或慢病毒,以及有支原体污染均不能用作疫苗生产。对此因素应严格检查。此外若细胞本身发生转化后,不宜于制备活疫苗,只能制备一些灭活疫苗或亚单位疫苗。培养液:培养细胞的营养液中多少含有一定量的血清蛋白,在疫苗使用中常会出现某种程度的过敏反应,为此
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