江西省抚州市南城第一中学2024届高三六校第一次联考生物试卷含解析

江西省抚州市南城第一中学2024届高三六校第一次联考生物试卷注意事项:1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在条形码区域内。2．答题时请按要求用笔。3．请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试卷上答题无效。4．作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。5．保持卡面清洁，不要折暴、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列不属于水体污染物的是（）A．家庭污水 B．微生物病原体C．水土流失的冲积物 D．河泥中的细菌2．某同学用适宜浓度的KNO3溶液和用新鲜的紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞制成的临时装片进行细胞质壁分离实验，15分钟后并未观察到质壁分离。以下相关叙述不正确的是（）A．该同学未观察到质壁分离现象极有可能是细胞质壁分离后又出现质壁分离复原B．若实验中出现质壁分离复原，则该过程中要消耗ATPC．质壁分离的复原实验既能证明细胞的死活，又能判断原生质层与细胞壁伸缩性的大小关系D．在质壁分离复原过程中，细胞吸水时开始吸收K+3．染色体桥是由两条染色体分别发生断裂后，具有着丝粒的残臂相接而形成的双着丝粒染色体所特有的结构。图是蚕豆根尖细胞分裂过程中形成的染色体桥，相关说法中正确的是（）A．染色体桥是有丝分裂过程中特有的现象B．染色体桥形成是细胞发生染色体结构变异的结果C．染色体桥形成的原因可能是低温抑制了纺锤体形成D．图示为根尖伸长区细胞，该细胞中着丝粒数目发生改变4．下列有关细胞代谢叙述，正确的是（）A．与白天相比，夜间小麦叶绿体中NADPH/NADP+的比值明显降低B．与安静状态相比，运动时人体肌细胞中ATP/ADP的比值明显升高C．与气孔开放时相比，气孔关闭时小麦叶绿体中C5/C3的比值明显降低D．与有氧状态相比，缺氧时人体肌细胞中NADH/NAD+的比值明显升高5．关于细胞代谢的叙述，错误的是A．无氧呼吸能产生ATP，但没有[H]的生成过程B．有氧呼吸过程中生成的[H]可在线粒体内氧化生成水C．某些微生物可利用氧化无机物产生的能量合成有机物D．光合作用光反应阶段产生的[H]可在叶绿体基质中作为还原剂6．科研人员研究棉花细胞核中一个DNA分子中a、b、c三个连续基因，其分布状况如图所示，图中Ⅰ、Ⅱ为基因间的序列。有关叙述正确的是（）A．a、b、c所携带的遗传信息不可能同时得到执行B．图中碱基对替换发生在a区段属于基因突变，发生在Ⅰ区段不属于基因突变C．该DNA分子含n个碱基，其转录的mRNA分子的碱基数是n/2个D．Ⅰ中插入一个抗虫基因以提高植物的抗虫性，这种变异属于染色体结构变异二、综合题：本大题共4小题7．（9分）在适宜温度和CO2浓度条件下，某实验小组测得某森林林冠层4种主要乔木的幼苗叶片的生理指标如图所示。其中光补偿点是指光合速率等于呼吸速率时的光照强度，光饱和点是指达到最大光合速率所需的最小光照强度。回答下列有关问题。（1）光反应阶段光合色素吸收的光能有两方面用途：一是将水分解成氧气和[H]；二是___________________________。（2）当光照强度为39μmol·m-2·s-1时，石栎叶肉细胞消耗ADP的场所有___________________________。（3）研究的4种植物中，最耐阴的是___________________________，判断的依据是：_________________________________________________________________________________。8．（10分）纤维素酶种类繁多，来源很广，不同来源的纤维素酶其活性差异较大，科学家从羊胃中筛选纤维素分解菌，并对发酵得到的纤维素酶活性进行了探究。请回答下列问题：（1）在实验前，需要使用___________________法对培养基进行灭菌，为确定灭菌是否彻底，通常会随机选用_________先行培养一段时间。（2）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但不与纤维素降解后的_________________发生这种反应，科研人员通常根据__________________来对固体培养基中的纤维素分解菌进行优选。（3）为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有_________________和____________________。（4）为探究发酵得到的纤维素酶活性，有人将其与已知高效纤维素酶进行了活性对比实验如下：锥形瓶号发酵得到的纤维素酶溶液高效纤维素酶溶液缓冲液纤维素粉实验步骤实验结果步骤一步骤二10mL0mL10mL10g35℃保温5分钟后终止酶促反应加入一定量的斐林试剂55℃保温22分钟21mL0mLA10g+++30mL1mLB10g++++++越多表示颜色越深①表中A处应该加入________mL缓冲液。②若某同学在实验中将酶的用量都改为了2mL，为使显色结果不变，则需__________________。9．（10分）大量研究表明，CO2浓度升高造成温室效应的同时，也影响了绿色植物的生长发育。（1）光合作用合成的有机物运输到根细胞，在____________中形成CO2和水，释放的能量转移到______________中，直接用于根的生长发育。（2）科研人员研究了CO2浓度升高对拟南芥根系生长发育的影响。根尖每生长1cm拍照一次，结果如图。据图可知，实验组根毛长度和密度均明显________________对照组。（3）①为进一步探究CO2浓度升高对根细胞的影响，获取相关处理下的非根毛区横切面，制作成临时装片，利用显微镜观察并计数，结果如下表：组别观测指标处理1组2组3组4组正常浓度CO2高浓度CO2正常浓度CO2+10NmNAA（生长素类似物）正常浓度CO2+5UmNPA（生长素运输阻断剂）表皮细胞体积大小小大表皮细胞总数少多多比1组少生毛细胞数目少多多比1组少②由表可知高浓度CO2增加了_____________________________；据1、2、3组结果推测高浓度CO2通过___________________影响根毛生长发育。③据1、2、4组说明，高浓度CO2对根毛生长发育影响与____________________有关。（4）为进一步验证上述推测，根尖每生长1cm测定生长素合成特异性启动基因表达情况，实验结果如图。综合上述实验，推测CO2浓度升高影响根毛生长发育的机制是____________________。（5）研究表明，生长素通过细胞内信号分子进一步传递信息，增加根毛细胞尖端内部钙离子浓度，促进生毛细胞的根毛伸长生长。已知植物细胞有生长素受体、钙离子通道蛋白—钙调素复合体、钙离子通道蛋白、细胞内信号分子亚硝基化靶向蛋白等，请选用已知信息，提出生长素促进根毛伸长生长的一种可能机制。_____________________________。10．（10分）“中国柑橘之乡”常德石门县由于独特的土壤气候环境，具有得天独厚的优质果品生产的资源优势，被国际果业界认定为“蜜橘绝佳产地”。但由于缺乏农产品的深加工企业，近几年柑橘滞销现象严重。（1）当地政府想引入一个大型的果酒加工厂。分离纯化上述菌种所用的培养基属于_________（填液体或固体）培养基。对于频繁使用的菌种，可以将菌种接种到试管的____________培养基上临时保藏。（2）橘皮可用作提取胡萝卜素和橘皮精油的原料。提取胡萝卜素常采用________法，需安装冷凝回流装置，其目的是______________________；提取橘皮精油时，为避免___________时有效成分水解和使用_________（填水中蒸馏或水上蒸馏或水气蒸馏）法产生原料焦糊的问题，常采用___________法。（3）为了保持某橘子品种的品质，可用组织培养技术繁殖试管苗。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值_________（填高或低）时，有利于芽的分化。11．（15分）回答下列（一）、（二）小题：（一）回答以菊花茎段为材料进行组织培养的有关问题：（1）在配制MS培养基时，通常先将各种药品配制成浓度为配方5~10倍的__________，这样配制的主要优点是__________（A．便于低温保存B．延长使用时间C．降低称量误差D．减少杂菌污染）。从培养基的作用看，在MS培养基中定量添加BA和NAA后的培养基属于___________培养基。（2）从自然界中获取的菊花茎段，须先用70%乙醇等进行消毒，最后用__________进行清洗。将茎段插入培养基的过程须在______中的酒精灯火焰旁进行，以保证无菌环境。（3）从带芽的茎段上长出丛状苗____________（填“需要”或“不需要”）经历脱分化，长出的丛状苗需__________后，再转入培养基中继续培养。（4）实验中选用BA和NAA而不用植物中存在的天然激素的原因是_____________________。（二）腺病毒能引起人呼吸系统不适等症状，但致死率低。研究发现该病毒可作为基因工程的载体。陈薇等科学家研发了以人5型腺病毒（Ad5）为载体的重组新冠疫苗，这是国内第一个进入临床试验阶段的新冠疫苗。腺病毒载体疫苗生产过程示意图如下：回答下列问题：（1）在制备人肾上皮细胞系（293细胞）时，发现培养一段时间，细胞铺满培养瓶后不再分裂，这种现象称为__________。出现此现象后，需用__________处理，得到细胞悬液，再进行__________培养，以获得更多的293细胞。（2）新冠病毒为RNA病毒，其遗传物质不能直接拼接到质粒上，因此在制备以上疫苗时需先通过___________过程获得相应的DNA。构建重组腺病毒穿梭质粒，可使用双酶切法，使之产生__________的粘性末端，以提高目的基因与质粒重组的成功率。据图可知需将___________导入293细胞，从而获得转基因腺病毒。（3）检测转基因腺病毒携带的目的基因是否在人体细胞内表达，可检测细胞内是否含有相应的__________或抗原分子，若检测抗原分子可用__________技术获得特异性探针。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、D【解题分析】

被人类排放到水体中的污染物包括以下八大类：家庭污水、微生物病原体、化学肥料、杀虫剂（还有除草剂和洗涤剂）、其他矿质物质和化学品、水土流失的冲积物、放射性物质、来自电厂的废热等，其中每一种都会带来不同的污染，使越来越多的江、河、湖、海变质，使饮用水的质量越来越差。单化肥一项就常常造成水体富养化，使很多湖泊变成了没有任何生物的死湖。【题目详解】由分析可知：家庭污水、微生物病原体、水土流失的冲积物属于水体污染物，而河泥中的细菌不属于水体污染物。故A、B、C正确，D错误。.故选D。2、D【解题分析】

成熟的植物细胞有一大液泡．当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入到外界溶液中，由于原生质层比细胞壁的伸缩性大，当细胞不断失水时，液泡逐渐缩小，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，既发生了质壁分离；当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，外界溶液中的水分就透过原生质层进入到细胞液中，液泡逐渐变大，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，即发生了质壁分离复原。【题目详解】A、由于植物细胞能主动吸收K+和NO3-，因此极有可能是细胞质壁分离后又出现质壁分离复原，A正确；B、植物细胞吸收K+和NO3-是通过主动运输的方式进行，需要消耗ATP，B正确；C、发生质壁分离需要具备活细胞以及细胞壁的伸缩性小于原生质层等条件，因此质壁分离的复原实验既能证明细胞的死活，又能判断原生质层与细胞壁伸缩性的大小关系，C正确；D、在质壁分离的过程中，细胞就已经在吸收K+，D错误。故选D。3、B【解题分析】

有丝分裂不同时期的特点：

（1）间期：进行DNA的复制和有关蛋白质的合成；

（2）前期：核膜、核仁逐渐解体消失，出现纺锤体和染色体；

（3）中期：染色体形态固定、数目清晰；

（4）后期：着丝点分裂，姐妹染色单体分开成为染色体，并均匀地移向两极；

（5）末期：核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消失。【题目详解】A、染色体桥是由两条染色体分别发生断裂后，具有着丝粒的残臂相接而形成的双着丝粒染色体所特有的结构，这种染色体结构变异也可以发生在减数分裂过程中，A错误；

B、染色体桥是由两条染色体分别发生断裂后，具有着丝粒的残臂相接而形成的双着丝粒染色体所特有的结构，所以形成染色体桥属于染色体结构变异的结果，B正确；

C、染色体桥是由两条染色体分别发生断裂后，具有着丝粒的残臂相接而形成的双着丝粒染色体所特有的结构，说明染色体桥形成是不会使染色体数目发生改变，而低温抑制纺锤体的形成会增加染色体的数量，C错误；

D、蚕豆根尖分生区细胞有丝分裂过程中形成染色体桥的细胞中着丝粒数目没有发生改变，D错误。

故选B。【题目点拨】本题考查有丝分裂的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。4、A【解题分析】

1、光合作用过程：光合作用包括光反应和暗反应两个阶段。光反应发生场所在叶绿体的类囊体薄膜上，色素吸收光照，吸收光能、传递光能，并将一部分光能用于水的光解生成[H]和氧气，另一部分光能用于合成ATP。暗反应发生场所是叶绿体基质中，首先发生二氧化碳的固定，即二氧化碳和五碳化合物结合形成两分子的三碳化合物，三碳化合物利用光反应产生的[H]和ATP被还原。2、光合作用的过程的影响因素。（1）光反应与暗反应的联系就是光反应为暗反应提供还原氢和ATP，暗反应为光反应提供ADP和Pi；（2）光合作用过程中，光照是光反应的主要影响因素，CO2供应则是暗反应的主要影响因素。【题目详解】A、与白天相比，夜间小麦光反应减弱，水光解减少，导致小麦叶绿体中NADPH和NADP+的比值下降，A正确；B、ATP与ADP的含量处于相对稳定状态，剧烈运动时，肌细胞中ATP与ADP的相互转化速度加快，ATP的含量不会明显增加，B错误；C、叶片气孔关闭，外界二氧化碳无法进入叶绿体，如果光照继续，还原仍在进行，C3含量降低，C5增加，C5/C3的比值增大，C错误；D、无氧呼吸时人体肌细胞中NADH用于还原丙酮酸成乳酸，不会造成NADH的大量积累，D错误。故选A。5、A【解题分析】有氧呼吸和无氧呼吸有一个共同点：第一阶段都能将葡萄糖分解成丙酮酸和[H]，故A项错。有氧呼吸第一和第二阶段都能产生[H]，2个阶段产生的[H]都参与第三阶段与氧的结合，而第二和第三阶段均在线粒体中进行，故B对。对于C项，各位应记住一些特例，比如在讲化能合成作用时，就讲到了硝化细菌能利用氨气氧化释放的化学能将无机物合成有机物。D项也对，因为光合作用的光反应阶段为其暗反应阶段提供[H]和ATP，暗反应发生在叶绿体基质。【考点定位】本题主要考查光合作用和呼吸作用的过程及化能合成作用等基础知识，意在考查学生对重要基础知识的掌握是否熟练，属基础题。6、B【解题分析】

基因突变指DNA分子中发生碱基对的替换、增添和缺失而引起基因结构的改变；染色体结构变异是指在细胞内的一个或几个染色体发生片段的缺失、增添、倒位或易位。【题目详解】A、基因是一个相对独立的结构单位和功能单位，细胞分化的实质是基因选择性表达，a、b、c三个基因所携带的遗传信息可以同时得到执行，A错误；B、a区段为基因，Ⅰ区段为基因间序列，故碱基对替换发生在a区段属于基因突变，发生在Ⅰ区段不属于基因突变，B正确；C、由于真核生物基因的内含子和非编码区不能转录出成熟的mRNA，所以若该DNA分子含n个碱基，转录出的mRNA分子碱基数少于n/2个，C错误；D、Ⅰ中插入一个抗虫基因以提高植物的抗虫性，这种变异属于基因重组，D错误；故选B。二、综合题：本大题共4小题7、将ADP和Pi合成ATP细胞质基质、线粒体、叶绿体青冈青冈的光补偿点较低，更适应弱光环境【解题分析】

据题干和题图分析可知：影响植物光合作用的因素主要是光照强度，光补偿点时呼吸作用速率等于光合作用速率，光饱和点以后影响各种植物的光合作用速率的因素不再是自变量光照强度，而是温度或二氧化碳浓度等。实验设计应遵循变量原则和对照原则。【题目详解】（1）光合作用的光反应阶段是水的光解，场所是叶绿体的类囊体薄膜；光反应阶段光合色素吸收的光能有两方面用途：一是将水分解成氧气和[H]；二是将ADP和Pi合成ATP。（2）光照强度为39μmol•m-2•s-1是石栎幼苗叶片的光补偿点，植物同时进行光合作用和呼吸作用，故叶肉细胞消耗ADP（合成ATP）的场所有细胞质基质、线粒体和叶绿体。（3）对比4种植物的光补偿点和光饱和点可知，青冈的光补偿点和光饱和点均最低，最适合在较弱的光照环境中生长，在4种植物中最适合在较弱的光照环境中生长。【题目点拨】本题考查影响光合作用的主要环境因素，关键是要求学生能够灵活运用所学知识，提高识图识表能量和分析解决问题的能力。8、高压蒸汽灭菌灭菌后的空白平板纤维二糖和葡萄糖透明圈大小固体发酵液体发酵9缩短保温时间【解题分析】

1.纤维素的单体是葡萄糖，纤维素酶能够将纤维素范围葡萄糖。纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，能够产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌。2.刚果红染色法有两种：（1）先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应优点：显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用缺点：操作繁琐，加入的刚果红会使菌落之间发生混杂（2）在倒平板时就加入刚果红优点：不存在菌落的混杂问题；缺点：在纤维素粉和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物产生假阳性反应；有些微生物有降解色素的功能。3.为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。【题目详解】（1）对微生物培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，为确定灭菌是否彻底，通常会随机选用灭菌后的空白平板先行培养一段时间，若无菌落出现则说明培养基的灭菌是彻底的。（2）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但不与纤维素降解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，根据这一原理用刚果红染色法对纤维素分解菌进行鉴定，可以根据培养基中出现的透明圈大小来对固体培养基中的纤维素分解菌进行优选。（3）由分析可知，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵。（4）为探究发酵得到的纤维素酶活性，有人将其与已知高效纤维素酶进行了活性对比实验设计过程如表中所示，根据实验设计中的等量原则、对照原则和单一变量原则来分析：①根据上述原则可知表中A处应该加入9mL缓冲液。②若某同学在实验中将酶的用量都改为了2mL，酶量增加，反应速率加快，为使显色结果不变即为了达到原来的产物量，只好缩短反应时间来达到产物量不变的目的，即缩短保温时间。【题目点拨】熟知分离纤维素分解菌的操作流程以及刚果红染色法的原理是解答本题的关键，学会利用实验设计中的基本原则解答问题是另一关键！9、线粒体ATP（三磷酸腺苷）高于表皮细胞总数和生毛细胞数目生长素生长素运输CO2促进生长素合成基因的表达，生长素合成量增加，进而促进根毛细胞的分裂、分化（CO2促进生长素合成基因的表达，生长素合成量增加，进而促进根生长发育或提高表皮细胞总数和生毛细胞数目）生长素与生长素受体结合，将信息传递给亚硝基化靶向蛋白，使钙离子通道蛋白与钙调素分离，钙离子内流，增加根毛细胞尖端内部钙离子浓度，促进生毛细胞的根毛伸长生长【解题分析】

有氧呼吸的场所有细胞质基质和线粒体，产物是二氧化碳和水。根据表格和柱形图可知，高CO2浓度处理后，表皮细胞的总数和生毛细胞数均增加，基因的表达水平也增加。【题目详解】（1）光合作用合成的有机物首先在细胞质基质中被分解为丙酮酸和[H]，然后线粒体中被彻底氧化分解产生CO2和水，释放的能量一部分转移到ATP中，直接用于根的生长发育。（2）由图可知，实验组用高CO2浓度处理后，根毛长度和密度均明显高于对照组。（3）②由表可知高浓度CO2处理后，增加了表皮细胞的总数和生毛细胞数；据1、2、3组结果可知，正常浓度CO2组用生长素类似物处理后，表皮细胞的总数和生毛细胞数增加，故推测高浓度CO2通过生长素影响根毛生长发育。③据1、2、4组说明，正常浓度CO2组用生长素类似物处理的同时用生长素运输阻断剂处理后，表皮细胞总数和生毛细胞的数目均减少，故推测高浓度CO2对根毛生长发育影响与生长素运输有关。（4）由柱形图可知，高浓度CO2处理组基因的表达量均高于正常浓度CO2组，故推测CO2促进生长素合成基因的表达，生长素合成量增加，进而促进根毛细胞的分裂、分化。（5）生长素与生长素受体结合，将信息传递给亚硝基化靶向蛋白，使钙离子通道蛋白与钙调素分离，钙离子内流，增加根毛细胞尖端内部钙离子浓度，促进生毛细胞的根毛伸长生长。【题目点拨】有氧呼吸的场所有细胞质基质和线粒体，而二氧化碳是在线粒体基质中产生的，水是在线粒体内膜中产生的。10、固体固体斜面萃取防止加热时有机溶剂挥发水蒸气蒸馏水中蒸馏压榨低【解题分析】

果酒的制作利用了酵母菌无氧呼吸产生酒精的原理。筛选分离目的微生物常用的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法。菌种的保藏方法有试管临时保藏法和甘油管藏法。植物有效成分的提取常用的方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法。植物组织培养过程中，生长素和细胞分裂素是启动脱分化和再分化的关键性植物激素。【题目详解】（1）果酒发酵常用的菌种是酵母菌。筛选、分离和纯化酵母菌常用固体培养基进行接种培养，菌种可以接种到固体斜面培养基中进行临时保藏。（2）胡萝卜素的提取方法常用萃取法，为防止加热时有机溶剂挥发萃取时需安装冷凝回流装置。提取橘皮精油时，橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，使用水中蒸馏法又会产生原料焦糊的问题，所以一般采用压榨法。（3）在组织培养过程中，生长素和细胞分裂素是启动脱分化和再分化的关键性植物激素，培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化。【题目点拨】本题主要考查有关植物有效成分提取相关知识，要求考生识记相关实验的原理及操作步骤即可正确答题。11、母液C发芽（生芽）无菌水超净台不需要分株BA和NAA是人工合成激素，植物没有相关分解酶，作用时间长，效果明显接触抑制胰蛋白酶传代逆转录不同重组腺病毒穿梭质粒和辅助质粒mRNA单克隆抗体制备【解题分析】

1、植物组织培养的过程：离体的植物组织、器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体，最后长出完整植株（新植体）。2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。3、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）