第三章药物的杂质检查

第三章药物的杂质检查基本要求掌握药物中杂质的来源和分类，杂质限量的定义和计算；氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、溶液颜色、易炭化物、廓清度、炽灼残渣、枯燥失重、无机溶剂残留量等反省项目的原理和方法。了解药物特殊杂质的概念及其反省方法。重点：1．药物杂质来源，限量反省及计算2．氯化物、重金属、砷盐的反省方法难点：1.砷盐反省方法原理2．各类热剖析法的原理概述基本要求掌握药物中杂质的来源和分类，杂质限量的定义和计算了解药物的纯度和化学试剂的纯度的区别反省有效性、均一性、纯度要求、平安性有效性药物生物应用度均一性含量平均度、溶出度、重量差异纯度要求药物中杂质的控制平安性异常毒性、热源、无菌杂质(forin、impurities)是指药物中存在的无治疗作用或影响药物的动摇性和疗效，甚至对人安康有害的物质。1.有毒反作用的物质2.自身无毒反作用，但影响药物的动摇性和疗效的物质3.自身无毒反作用，也不影响药物的动摇性和疗效，但影响药物的迷信管理的物质一、药物的纯度要求药物的纯度，是指药物的纯真水平。药物的杂质反省是控制药物纯度的重要方面，也称为纯度反省。是反映药质量量的一项重要目的。药物纯度的评定：通常可从药物的结构、外观性状、理化常数、杂质反省和含量测定等方面。药物的纯度和化学试剂的纯度在要求上不同：1.普通化学试剂不思索杂质的生理作用，其杂质限量只是从能够惹起的化学变化上的影响来规则。故普通状况下不能与临床用药的纯度相互替代。药物只要合格品与不合格品；普通化学试剂分为4个等级〔基准试剂、优级纯〔GR〕、剖析纯〔AR〕、化学纯〔CP〕、色谱纯、光谱纯。〕

随着分别检测技术的提高，经过对药物纯度的调查，能进一步发现药物中存在的某些杂质对疗效的影响或其具有的毒反作用。且随着消费原料的改动及消费方法与工艺的改良，关于药物中杂质反省项目或限量要求也就有相应的改动或提高。总之，关于药物的纯度要求不是原封不动的，而是随着临床运用的实际和剖析测试技术的开展，不时改良，使之更趋完善。二、杂质的来源与种类〔一〕杂质的来源，主要有两个：消费进程和贮藏进程一是由消费进程中引入。〔精制未能完全除去，原料不纯或存在反响不完全，中间产物与副产物〕。〔1〕原料、反响中间体及副产物〔2〕试剂、溶剂、催化剂类〔3〕消费中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质二是在贮藏进程中发生。〔贮藏进程外界条件影响，或因微生物的作用，发作水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化，发生有关的杂质〕。易发作水解反响的结构：酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等易发作氧化反响的结构：醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等〔二〕杂质的分类药物中的杂质按来源分为普通杂质和特殊杂质1.普通杂质：是指在自然界中散布较普遍，在多种药物的消费和贮藏进程中容易引入的杂质，如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。普通杂质其反省方法收载在中国药典的附录中。2.特殊杂质：指某一个或某一类药物的消费或贮藏进程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质反省方法收载在中国药典注释各药品的质量规范中。药物中的杂质按性质分为信号杂质和有害杂质1，信号杂质：自身有害，但其含量多少可以反映出药物的纯度水平，如含量过多，说明药物的纯度差，提示药物的消费工艺不合理或消费控制存在效果。如：氯化物、硫酸盐。2，有害杂质：对人体有害，在质量规范中应严厉加以控制，以保证用药平安。如：重金属、砷盐、氟化物等。三、杂质的限量反省〔一〕杂质反省的要求：由于杂质不能够完全除尽，也没有必要除尽。所以在不影响疗效和不发作毒性的原那么下，既保证药物质量，又便于制造、贮藏和制剂消费，关于药物中能够存在的杂质，允许有一定限量，这一允许量被称为杂质的限量。通常不要求测定其准确含量。«药典»中规则的杂质反省均为限量〔或限制〕反省〔Limittest〕。(二)杂质限量:指药物中所含杂质的最大允许量。表示方法:通常用百分之几或百万分之几(ppm)来表示。对危害人体安康、影响药物动摇性的杂质，必需严厉控制其限量。反省时可用杂质的纯品或对照品在相反条件上去比拟。〔三〕限量计算:杂质限量=杂质的最大允许量/供试品量×100%杂质限量=规范溶液体积×规范溶液浓度/供试品量×100%

或L=V×C/S×100%也有不用规范液对比，只在一定条件下观察有无正反响出现。关于一些坚持药物动摇性的保管剂或动摇剂，不以为是杂质，但需反省能否在允许范围内。在药典反省项下除杂质反省外，还包括有效性、平安性两个方面。有效性实验是指针对某些药物的药效需停止的特定的项目反省，如药物的制酸力、吸着力、疏松度、凝冻度、粒度、结晶度等。平安实验是指某些药物需停止异常毒性、热原、降压物质和无菌等项目的反省。例题1．反省某药物中的砷盐，取规范砷溶液2ml〔每1ml相当于1μg的As〕制备规范砷斑，砷盐限量为0.0001％，应取供试品的量为A.0.20g√B.2.0gC．0.020gD.1.0gE.0.10g：c＝1μg/ml＝1×10-6g/mlV＝2mlL＝0.0001%例题2．反省维生素C中的重金属时，假定取样量为1.0g，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸取规范铅溶液〔每1ml＝0.01mg的Pb〕多少ml？A.0.2mlB.0.4mlC．2ml√D.1mlE.20ml〔四〕杂质反省方法1.对照法限量反省法〔LimitTest〕特点：不需知道杂质的准确含量2.灵敏度法系指在供试品溶液中参与试剂，在一定反响条件下，不得有正反响出现。特点：不需对照品3.比拟法含量测定法：测定杂质的相对含量，如测定吸收度、pH值等。特点：准确测定杂质的量，不需对照品练习题1.临床所用药物的纯度与化学品及试剂纯度的主要区别是〔A〕√A.所含杂质的生理效应不同B.所含有效成分的量不同C.所含杂质的相对量不同D.化学性质及化学反响速度不同E.所含有效成分的生理效应不同2．在药物消费进程中引入杂质的途径为(A,B,C,D)A.原料不纯或局部未反响完全的原料形成B.分解进程中发生的中间体或副产物分别不净形成C.需参与的各种试剂发生吸附，共沉淀生成混晶等形成D.所用金属器皿及装置等引入杂质E.由于操作不妥，日光曝晒而使产品发作分解引入的杂质3．中国药典〔1995年版〕中规则的普通杂质反省中不包括的项目是〔C〕A.硫酸盐反省B.氯化物反省C.溶出度反省D.重金属反省E.砷盐反省小结1，药物纯度：药物的纯真水平。2，杂质的来源与种类来源：消费和贮存种类：普通杂质和特殊杂质3，杂质的限量反省杂质的限量：药物中允许含杂质的最少量计算：识记：杂质、普通杂质、特殊杂质、杂质来源、药用纯度与化学纯度的区别思索题什么是普通杂质和特殊杂质请解释信号杂质和有害杂质请说明杂质的限量和药物纯度的含义试说明信号杂质的存在对药物有何影响

第二节普通杂质的反省方法基本要求掌握普通杂质反省项目的原理和方法重点：氯化物、重金属、砷盐、铁盐和枯燥失重一、普通杂质反省规那么«药品检验操作规范»规则：1.遵照平行操作原那么〔1〕仪器的配对性如纳氏比色管应配对，刻度线上下相差不超越2mm，砷盐反省时导气管长度及孔的大小要分歧〔2〕对照品与供试品的同步操作2.正确的取样及供试品的称量范围≤1g不超越±2%，＞1g不超越±1%3.正确的比色、比浊方法4.反省结果不契合规则或在限制边缘时应对供试管和对看守各复查二份二、氯化物反省法药物消费进程中，需用盐酸，或原料中间体呈盐酸盐等，易引入氯化物〔一〕原理对照法〔二〕反省方法药典附录除另有规则外，取各药品项下规则量的供试品，加水溶解使成25ml〔溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性〕，再加稀硝酸10m1；溶液如不廓清，应滤过；置50ml纳氏比色管中，加水使成约40m1，摇匀，即得供试溶液。另取各药品项下规则量的规范氯化钠溶液，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，摇匀，即得对照浴液。于供试溶液与对照溶液中，区分参与硝酸银试液1.0m1，用水稀释使成50m1，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比拟，即得。〔三〕测定条件1.规范NaCl溶液10μgCl-/ml，50ml溶液中含50～80μg的Cl-所显混浊梯度清楚，相当于规范NaCl溶液5～8ml。2.反响需在硝酸酸性条件下停止，且以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。〔1〕减速AgCl混浊的构成〔2〕发生较好的乳浊；〔3〕防止弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的构成。3.试剂：硝酸银4.供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色混浊而不是白色沉淀5.避光、暗处放置5分钟后比浊，因氯化银见光易分解。6.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。7.平行操作原那么〔四〕搅扰及扫除1.假定供试品有色，需经处置前方可反省。〔1〕内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物的反省。P31〔2〕外消色法：如高锰酸钾中氯化物的反省，可先加乙醇过量，使其恢复褪色后再依法反省。2.当有其它搅扰物质存在时，必需在反省前除去〔1〕碘中氯化物的反省，可参与一定量的酸和过氧化氢溶液，加热煮沸，使I2挥去。〔2〕碘化物中氯化物的反省〔3〕溴化物中氯化物的反省3.不溶于水的无机药物〔1〕加水振摇，过滤，取滤液停止反省。〔2〕加热，放冷，过滤，取滤液停止反省。〔3〕溶于无机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后停止反省。4.无机药物中无机氯杂质的反省，详细状况，详细剖析。三、硫酸盐反省法〔一〕原理对照法〔二〕测定条件1.规范K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.1～0.5mg的所显混浊梯度清楚，相当于规范K2SO4溶液1～5ml。2.反响需在盐酸酸性条件下停止，且以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜。(盐酸酸性条件防止BaCO3，BaPO4沉淀生成，pH约=1)3.试剂：氯化钡4.供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色混浊而不是白色沉淀。5.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。〔三〕搅扰及扫除假定供试品有色，也可用内消色法即倍量法处置。四、铁盐反省法〔硫氰酸盐法，巯基醋酸法BP〕〔一〕硫氰酸盐法ChP〔2000〕、USP〔24〕原理对照法2.反省方法药典附录除另有规则外，取各药品项下规则量的供试品，加水溶解使成25ml，移置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35m1后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水过量稀释成50ml，摇匀；如显色，立刻与规范铁溶液一定量制成的对照溶液〔取各药品项下规则量的规范铁溶液，置50ml纳氏比色管中，加水使成25ml，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35m1后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水过量稀释成50ml，摇匀〕比拟，即得。3.测定条件〔1〕用FeNH4(SO4)2·12H2O〔硫酸铁铵〕配制规范铁贮备液〔参与硫酸防止Fe3+的水解〕，规范铁溶液临用前稀释而成，规范铁溶液10μgFe3+/ml，50ml溶液中含10～50μg的Fe3+显色梯度清楚，普通取规范铁溶液1.0～5.0ml。〔2〕反响需在盐酸酸性条件下停止，且以50ml供试溶液中含稀盐酸4ml为宜。〔3〕试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反响向正反响方向停止〔4〕反省Fe2+和Fe3+〔5〕铁盐反省时，加氧化剂氧化Fe2+为Fe3+。加过硫酸铵可氧化Fe2+为Fe3+，同时可防止光线使硫氰酸铁恢复或分解褪色。加硝酸后加热也可氧化Fe2+为Fe3+〔6〕比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。4.搅扰及扫除〔1〕为了提高灵敏度或供试管与对看守颜色不分歧时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比色。〔2〕具环状结构的无机药物，需经700～800℃炽灼破坏处置后再依法反省。〔3〕搅扰离子的影响适当添加酸度，用正丁醇提取后。〔二〕巯基醋酸法BP〔1998〕P33对照法枸橼酸的作用：使枸橼酸与铁离子构成配位离子，以免在氨碱性溶液中发生氢氧化铁沉淀。巯基醋酸：恢复剂本法灵敏度较高，但试剂较贵五、重金属反省法在实验条件下能与S2-作用呈色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等以铅为代表〔易积存中毒〕中国药典〔2000年版〕共收载四法。第一法溶于水、稀酸和乙醇的药物。第二法含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸和乙醇的药物。第三法溶于碱，不溶于稀酸。第四法重金属限量低的药物。〔一〕第一法硫代乙酰胺法1.原理对照法条件：醋酸盐缓冲液pH3.5适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。2.测定条件〔1〕用硝酸铅配制规范铅贮备液〔加硝酸防止Pb2+水解〕，规范铅溶液临用前稀释而成，规范硝酸铅溶液10μgPb2+/ml，适宜比色范围为27ml溶液中含10～20μg的Pb2+。〔2〕本法用2mlpH3.5的醋酸盐缓冲液控制溶液pH值为3～3.5。〔3〕显色剂：从ChP〔1990〕末尾改用硫代乙酰胺做显色剂3.搅扰及扫除〔1〕供试品如有色，需经处置前方可反省。A.外消色法：在对看守中加稀焦糖溶液或其他无搅扰的有色溶液。B.内消色法C.改用第四法，微孔滤膜过滤法〔2〕假定供试品中有微量Fe3+存在，会氧化硫化氢生成单质硫，搅扰比色，参与抗坏血酸或盐酸羟胺〔0.5～1.0g〕恢复Fe3+为Fe2+，可消弭搅扰。〔3〕假定供试品为铁盐，Fe3+在盐酸中生成HFeCl62-，用乙醚提取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法反省。〔4〕假定药物自身能生成不溶性硫化物时，可参与掩蔽剂消弭搅扰。如ZnSO4中重金属的反省，要在碱性下加KCN掩蔽Zn2+后，依第三法反省。〔二〕第二法炽灼残渣法适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的无机药物。1.原理对照法500～600℃炽灼后的残渣，经处置后，依一法反省。2.操作方法含钠及氟的无机药物运用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿〔因可腐蚀瓷坩埚，带入少量重金属〕〔三〕第三法硫化钠法适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。1.原理对照法2.测定条件〔1〕NaOH碱性条件下〔2〕显色剂：硫化钠对玻璃有腐蚀性，应临用新制。〔四〕第四法微孔滤膜法〔适用于重金属限量低的药物〕适用于含2～5mg重金属杂质及有色供试液的反省。依一法反省，结果微孔滤膜过滤后比拟色斑。将重金属的硫化物富集于滤膜上。USP〔23〕反省重金属时，运用硫化氢试液显色。反省时，除用供试管、对看守，还规则用监控管，三管同法反省。我国«药品检验操作规范»中规则，反省新产品中重金属时，运用该法。六、砷盐反省法〔一〕古蔡法〔Gutzeit〕P37ChP〔2000〕、BP〔1998〕1.原理对照法遇HgBr2试纸生成黄色～棕色的砷斑，与2ml规范砷溶液在相反条件下生成的砷斑比拟。2.操作方法〔1〕规范砷斑用2ml规范砷溶液制备〔2〕供试品需经无机破坏，那么规范砷溶液应平行操作3.测定条件〔1〕规范砷溶液临用新配，1μgAs/ml。〔2〕酸为反响物，酸量应足够，所以加浓盐酸5ml。〔3〕酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是A.恢复As5+为As3+，加快反响速度；B.碘化钾被氧化生成的I2又可被氯化亚锡恢复为I-，I-与反响中生成的Zn2+能构成动摇的配位离子，有利于生成砷化氢的反响不时停止；C.氯化亚锡与锌作用，在锌外表构成锌锡齐，使氢气平均而延续地发作；D.可抑制微量Sb的搅扰，在实验条件下，100μgSb存在不搅扰。〔4〕醋酸铅棉花的作用是消弭锌粒及供试品中大批硫化物的搅扰，醋酸铅棉花60mg装管高度60～80mm。〔5〕锌粒应无砷〔6〕砷斑不动摇，应立刻观察4.搅扰及扫除〔1〕供试品假定为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐时，加HNO3，△，使氧化成硫酸盐，以除去搅扰，如硫代硫酸钠中砷盐的反省。〔2〕供试品假定为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将Fe3+恢复为Fe2+。如枸橼酸铁铵中砷盐的反省。〔3〕具环状结构的无机药物，要先行无机破坏后再停止反省。常用的无机破坏方法：碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的反省〔4〕本法适用于不含Sb或含Sb量小于100μg的供试品。Sb可被恢复成锑化氢，锑化氢与HgBr2试纸作用，发生锑斑，搅扰砷斑。小结1，普通杂质反省规那么2，氯化物反省法3，硫酸盐反省法4，铁盐反省法5，重金属反省法6，砷盐反省法〔1〕古蔡法思索题1，简述氯化物反省法的原理及方法。2，简述硫代乙酰胺法反省重金属的原理和方法。3，试述药物杂质反省的内容。4，药物重金属反省法中，重金属以什么为代表？有哪几种显色剂?反省的方法共有哪几种？

〔二〕Ag-DDC法反省、含量测定ChP(2000)、USP〔24〕二乙基二硫代氨基甲酸银法对照法AsH3+6Ag(DDC)→As(DDC)3+6Ag(白色)+3HDDC砷化氢与Ag-DDC溶液作用，恢复Ag—DDC为白色胶态银，直接比色或于510nm波优点测定吸收度，停止比拟。用无机碱吸收反响发生的HDDC有利于反响的停止。USP〔24〕用吡啶，灵敏但试剂恶臭ChP〔2000〕用三乙胺。灵敏度低本法适用于含Sb量小于500μg的供试品。〔三〕白田道夫法〔betterdroff〕ChP〔2000〕含Sb药物中砷盐的反省如葡萄糖酸锑钠原理对照法本法反响灵敏度为20ug〔AS2O3〕参与大批二氯化汞，能提高反响灵敏度2ug/10ml〔四〕次磷酸法BP〔2000〕p39原理对照法次磷酸〔HCl〕恢复砷盐为棕色的游离砷。灵敏度低，适用于硫化物、亚硫酸盐及含锑药物的砷盐反省，不发生搅扰。七、炽灼残渣反省法(residueonignition)反省不含金属的无机药物或挥发性无机药物中混入的非挥发性无机杂质(金属氧化物或无机盐类)。1.原理样品炭化后+H2SO4湿润→700～800℃炽灼至恒重→炽灼残渣〔硫酸灰分〕限量普通为0.1%～0.2%无机杂质的硫酸盐〔sulphatedash〕H2SO4湿润〔高温加热至硫酸蒸汽除尽〕炽灼残渣〔USP〕,硫酸灰分〔BP〕2.操作方法本卷须知〔1〕供试品的取样量应依据炽灼残渣限量和称量误差决议。〔2〕含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。〔3〕假定残渣需留作重金属反省，那么500～600℃炽灼至恒重。〔重金属〔铅〕在高温下易挥发〕反省结果偏低〔4〕加硫酸处置是使杂质转化为动摇的硫酸盐，并协助无机物炭化。八、溶液颜色反省法控制药物中有色杂质限量的方法。消费、贮藏中发生ChP(2000)采用三种方法反省。第一法目视比色法即与规范比色液比拟的方法，全波长范围定性观察观察方法规范比色液的配制黄绿、黄、橙黄、橙红、棕红第二法分光光度法单一波长定量，吸收度不得超越规则值。第三法色差计法全波长范围定量本法是经过色差计直接测定溶液的透视三抚慰值，对其颜色停止定量表述和剖析的方法。测色仪器普通为光电积分型色差计迷信客观三抚慰值即是在给定的三色系统中与待测色到达色婚配所需的三个原抚慰量。自然界的每种颜色都可以用红、绿、蓝三原色按适当比例混合而成。当目视法难判别色差时，应思索本法。九、易炭化物反省法反省药物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量无机杂质。方法：H2SO4炭化后与对照液比拟。对照液：有三类〔1〕〝溶液颜色反省〞项下的规范比色液；〔2〕由比色用氯化钴液，比色用重铬酸钾液，比色用硫酸铜液按规则方法配成的对照液；〔3〕高锰酸钾液比色：同置白色背景前，平视观察比拟。不得更深十、廓清度反省法反省药物中的微量不溶性杂质，用作注射剂的原料药普通应作此项反省。1．反省方法对照法2.浊度规范液的配制中国药典规则用浊度规范液作为廓清度反省的规范。反响原理：乌洛托品在偏酸性条件下水解发生甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，构成白色混浊。1.00％硫酸肼溶液与10％乌洛托品溶液等量混合配制浊度规范贮备液〔15→1000〕浊度规范原液550nm处吸收度0.12-0.15浊度规范液〔5个级号〕0.5,1,2,3,43.判别药典中规则的〝廓清〞，系指供试品溶液的廓清度相反于所用溶剂，或未超越0.5号浊度规范液。4.溶剂：水、酸、碱、无机溶剂(乙醇、甲醇、丙酮)无机酸的碱金属盐类药物强调用〝新沸过的冷水〞十一、枯燥失重测定法枯燥失重是指药物在规则条件下经枯燥后所减失的重量，主要是水分，也包括其它挥发性物质。测定方法：〔一〕常压恒温枯燥法适用于受热较动摇的药物。枯燥温度普通为105℃。枯燥失重：第二次及以后各次称重均应在规则条件下继续枯燥1h后停止。炽灼残渣：第二次及以后各次称重均应在规则条件下继续炽灼0.5h后停止。留意：供试品应平铺，厚度＜5mm，疏松物10mm结晶药物应该研细瓶盖半开，或许放置旁边取时，先盖瓶盖〔二〕枯燥剂枯燥法适用于受热易分解或挥发的供试品。枯燥剂：硅胶、浓硫酸、P2O5。1，硅胶：吸水率居中，变色硅胶，加有氯化钴〔CoCl2〕，无水氯化钴蓝色，吸水后含二分子结晶水呈淡白色。105℃枯燥后可恢复运用。价廉、方便、无腐蚀性、可重复，最常用的枯燥剂。2，浓硫酸：吸水率低，有腐蚀性。3，P2O5：吸水性好，不能重复运用。〔三〕减压枯燥法适用于熔点低，受热不动摇或水分难赶除的药物。除另有规则外，压力应在2.67kPa〔20mmHg〕以下。〔四〕热剖析法热剖析法是在顺序控制温度下，准确记载待测物质理化性质与温度的关系，研讨其受热进程所发作的晶型转变、熔融、升华、吸附等物理变化和脱水、热分解、氧化恢复等化学变化，对物质停止物理常数〔如熔点和沸点〕确实定、鉴别和纯度反省的方法。亦可用于药物的动摇性研讨及制剂辅料的优选。热重法〔TGA〕热重法是在顺序控制温度下，测量物质质量与温度关系的一种技术。记载质质变化对温度的关系曲线即热重曲线。热重曲线的纵坐标为质量(m)，横坐标为温度(T)或时间(t)。特点：准确测量物质的质质变化及变化速度、样品用量少、速度快本法适用于药物结晶水的测定和珍贵药物或在空气中极易氧化药物的枯燥失重剖析。2.差热剖析法〔DTA〕差热剖析法是在顺序控制温度下，测量待测物质和参比物之间的温度差〔△T〕与温度(或时间)之间的关系的一种技术。差热剖析曲线记载的纵坐标为样品与参比物的温度差(DT)，DT与热容量差(CR—Cs)成正比，横坐标为温度。本法可鉴别药物或其多晶形，可反省药物的纯度3.差示扫描量热法〔DSC〕差示扫描量热法是在顺序控制温度下，测量输给待测物质和参比物的能量差与温度(或时间)关系的一种技术。本法可鉴别药物或其多晶形、纯度反省以及熔点和水分等的测定。十二、无机溶剂残留量测定法〔95版药典正式收载〕1.无机溶剂残留量测定法是用以反省药物在消费进程中引入的有害无机溶剂，包括苯、氯仿、二氧六环、二氯甲烷、吡啶、甲苯及环氧乙烷。2.反省方法中国药典采用气相色谱法反省残留无机溶剂色谱条件：固定相：直径为0.25～0.18mm的二乙烯苯－乙基乙烯苯型高分子多孔小球载气：氮气检测器：氢火焰离子化检测器检测柱温：80～170℃色谱系统适用性实验：中国药典规则，在残留溶剂测定前应作色谱系统适用性实验。〔1〕用待测物的色谱峰计算的实际塔板数应大于1000；〔2〕用内标法测定时，内标物与待测物色谱峰的分别度应大于1.5；〔3〕用内标法测定时，每个规范溶液〔限量待测溶剂与内标液〕进样5次，待测物与内标物峰面积之比的相对规范偏向应不大于5％；假定用外标法测定，待测物峰面积的相对规范偏向应不大于10％3.测定法残留溶剂的测定有直接进样法〔第一法〕和顶空进样法〔第二法〕两种。第一法溶液直接进样法第二法顶空进样法适用于挥发性大的组分，可以防止污染柱子〔非挥发性组分〕从方法的精细度思索，二氧六环、吡啶宜用第一法；苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷可用第一法或第二法，环氧乙烷直接用第二法。色谱条件与系统适用性实验包括以下四项内容。 色谱柱的实际塔板数分别度,，要求R＞1.5%③重复性,进样5次，要求RSD＜2%④拖尾因子，其中d1为峰极大至峰前沿之间的距离，T应在0.95～1.05练习题1.药物中氯化物杂质反省，是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物混浊，所用的稀酸是〔B〕A.硫酸B.硝酸C.盐酸D.醋酸E.磷酸2.中国药典〔2000年版〕规则，反省氯化物杂质时，普通取用规范氯化钠溶液〔10µgCl－/ml〕5～8ml的缘由是〔D〕A.使反省反响完全B.药物中含氯化物的量均在此范围C.减速反响D.所发生的浊度梯度清楚E.防止搅扰3.采用硝酸银试液反省氯化物时，参与硝酸使溶液酸化的目的是〔ABCDE〕A．减速生成氯化银混浊反响B．消弭某些弱酸盐的搅扰C．消弭碳酸盐搅扰D．消弭磷酸盐搅扰E．防止氧化银沉淀生成4.当采用比浊法反省氯化物杂质时，假定药物自身有颜色而搅扰反省的话，应该选用的处置方法为〔AB〕A．内消色法B．外消色法C．比色法D．差示比浊法E．差示可见分光法5.假定要停止高锰酸钾中氯化物的反省，最正确方法是〔D〕A.参与一定量氯仿提取后测定B.氧瓶熄灭C.倍量法D.参与一定量乙醇E.以上都不对6.以下哪些条件为药物中氯化物反省的必要条件〔ABC〕A.所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置5分钟D.用硝酸银规范溶液做对照E.在白色背景下观察6．药物中硫酸盐反省时，所用的规范对照液是〔D〕A.规范氯化钡B.规范醋酸铅溶液C.规范硝酸银溶液D.规范硫酸钾溶液E.以上都不对7.中国药典〔2000年版〕规则铁盐的反省方法为〔A〕A.硫氰酸盐法B.巯基醋酸法C.普鲁士蓝法D.邻二氮菲法E.水杨酸显色法8.中国药典〔2000年版〕规则，硫氰酸铵法反省铁盐时，参与过硫酸按的目的是〔AB〕A.使药物中铁盐都转变为Fe3+B.防止光线使硫氰酸铁恢复或分解褪色C.使发生的白色产物颜色更深D．防止搅扰E．便于观察、比拟9.某药物〔黄色〕欲停止铁盐反省，应采用下面哪种方法〔E〕A.倍量法B.微孔滤膜过滤法C.调色法D.600～700℃炽灼残渣后测定E.以上都不对10.中国药典收载的铁盐反省，主要是反省〔D〕A.FeB.Fe2+C.Fe3+D.Fe2+和Fe3+E.以上都不对11．重金属反省中，参与硫代乙酰胺时溶液控制最正确的pH值是〔B〕A.1.5B.3.5C．7.5D.9.5E.11.512．微孔滤膜法是用来反省〔C〕A.氯化物B.砷盐C.重金属D.硫化物E.氰化物13.中国药典(2000年版)重金属反省法中，所运用的显色剂是〔BC〕A.硫化氢试液B.硫代乙酰胺试液C.硫化钠试液D.氰化钾试液E.硫氰酸铵试液14.葡萄糖中停止重金属反省时，适宜的条件是〔C〕A.用硫代乙酰胺为规范对照液B.用10ml稀硝酸/50ml酸化C.在pH3.5醋酸盐缓冲溶液中D.用硫化钠为试液E.结果需在黑色背景下观察15.现有一药物为苯巴比妥，欲停止重金属反省，应采用«中国药典»上收载的重金属反省的哪种方法〔C〕A.一法B.二法C.三法D.四法E.以上都不对16.下面哪些方法为«中国药典»收载的重金属反省方法〔ACD〕A.500～600℃炽灼残渣后,按一法操作B.pH3～3.5条件下，参与硫化氢试液C.碱性下，参与硫化钠试液D.按一法操作，结果用微孔滤膜过滤后观察色斑E.以上都对17.在药物的杂质反省中，其限量普通不超越百万分之十的是〔D〕A.氯化物B.硫酸盐C.醋酸盐D.砷盐E.淀粉18.在用古蔡法反省砷盐时，导气管中塞入醋酸铅棉花的目的是〔C〕A.除去I2B.除去AsH3C.除去H2SD.除去HBrE.除去SbH319．砷盐反省法中，在检砷装置导气管中塞入醋酸铅棉花的作用是〔C〕A.吸收砷化氢B.吸收溴化氢C.吸收硫化氢D.吸收氯化氢E.吸收锑化氢20.古蔡氏法中，SnC12的作用有〔ACD〕A.使As5+→As3+B.除去H2SC.除去I2D.组成锌锡齐E.除去其它杂质21.Ag—DDC法反省砷盐的原理为：砷化氢与Ag—DDC吡啶作用，生成的物质是〔E〕A.砷斑B.锑斑C.胶态砷D.三氧化二砷E.胶态银22.中国药典〔1995年版〕收载的古蔡法反省砷盐的基本原理是〔BE〕A.与锌、酸作用生成H2S气体B.与锌、酸作用生成AsH3气体C.发生的气体遇氯化汞试纸发生砷斑D.比拟供试品砷斑与规范品砷斑的面积大小E.比拟供试品砷斑与规范品砷斑的颜色强度23．〔1-5〕适用于A.古蔡氏〔Gutzeit〕法B.二乙基二硫代氨基甲酸银法C.A和B均可D.A和B均不可1．在衔接砷化氢发作瓶的导管中装入醋酸铅棉花〔C〕2．运用的规范砷溶液为2m1〔C〕3．测定结果要与规范砷斑相比拟〔A〕4．要测定吸收度〔B〕5．要用酸碱滴定法〔D〕24．[1～5]用古蔡氏法反省以下药物中的砷盐时，扫除搅扰的方法：A.先用硝酸或溴水氧化B.先加酸性氯化亚锑恢复C.改用白田道夫法D.先加氰化钾掩蔽E.先加草酸生成沉淀1.硫化物〔A〕2.亚硫酸盐〔A〕3.硫代硫酸盐〔A〕4.高铁盐〔B〕5.锑盐〔C〕25.Ag—DDC法反省砷盐时，所发生的白色溶液为〔C〕A.HDDC吡啶溶液B.Ag吡啶溶液C.Ag的胶态溶液D.Ag(DDC)溶液E.AsAg3溶液26.ChP〔2000〕反省葡萄糖酸锑钠中的砷盐时，应选用〔B〕A.古蔡氏法B.白田道夫法C.碘量法D.Ag—DDC法27.葡萄糖中砷盐的反省，需求的试剂应有〔BCDE〕A．Pb2+规范液B．SnCl2试液C．KI试液D．ZnE．醋酸铅棉花28.Ag-DDC法反省砷盐时，参与碘化钾和酸性氯化亚锡的作用为〔ABCDE〕A．将As5+恢复为As3+B．有利于AsH3生成反响C．抑制SbH3的生成D．构成Zn-Sn齐以平均而延续地发作氢气E．催化减速生成AsH329.古蔡氏法检砷，药典规则制备规范砷斑时，应取规范砷溶液〔C〕A.1mlB.5mlC.2mlD.依限量大小决议E.以上都不对30.古蔡氏法反省所用的溶液是(B)A.强碱性溶液B.强酸性溶液C.含稀盐酸10ml/50ml溶液D.含稀硝酸10ml/50ml溶液E.含强氧化剂(硝酸或过硫酸)铵)溶液31．[1—5]所含待测杂质的适宜检测量为A.0.002mgB.0.01～0.02mgC.0.01～0.05mgD.0.05～0.08mgE.0.1～0.5mg1.硫酸盐反省法中，50ml溶液中(E)2.铁盐反省法中，50ml溶液中(C)3.重金属反省法中，35ml溶液中(B)4.古蔡氏法中，反响液中(A)5.氯化物反省法中，50ml溶液中(D)32．[1—5]A.硝酸银试液B.氯化钡试液C.硫代乙酰胺试液D.硫化钠试液E.硫氰酸盐试液1．药物中铁盐反省〔E〕2．磺胺嘧啶中重金属反省〔D〕3．药物中硫酸盐反省〔B〕4．葡萄糖中重金属反省〔C〕5．药物中氯化物反省〔A〕33．[1—5]可用于反省的杂质为A.氯化物B.砷盐C.铁盐D.硫酸盐E.重金属1．在酸性溶液中与氯化钡生成混浊液的方法〔D〕2．在酸性溶液中与硫氰酸盐生成白色的方法〔C〕3．在实验条件下与硫代乙酰胺构成平均混悬溶液的方法〔E〕4．Ag-DDC法〔B〕5．古蔡法〔B〕34．[1～5]杂质反省中所用的酸是A.稀硝酸B.稀盐酸C.硝酸D.盐酸E.醋酸盐缓冲液1.氯化物反省法〔A〕2.硫酸盐反省法〔B〕3.铁盐反省法〔B〕4.重金属反省法〔E〕5.砷盐反省法〔D〕35.炽灼残渣反省法普通加热恒重的温度为〔C〕A.500～600℃B.600～700℃C.700～800℃D.800～1000℃E.1000～1200℃36.炽灼残渣反省后，将残渣留作重金属反省时，炽灼温度应为〔A〕A.500～600℃B.600～700℃C.700～800℃D.800～1000℃E.1000～1200℃37.炽灼残渣的限量普通为〔E〕A.1％B.0.5％～1％C.0.4％～0.5％D.0.2％～0.3％E.0.1％～0.2％38.炽灼残渣反省时，炭化后经硫酸处置后灰化至完全的称为〔C〕A.灰分B.残渣C.硫酸灰分D.炽灼灰分E.剩余灰分39．[1～5]A．枯燥失重测定法B．炽灼残渣反省C．两者皆是D．两者皆不是1.无机物杂质检测法〔D〕2.不溶物的测定法〔D〕3.杂质反省法〔C〕4.无机药物中不挥发无机物的检测法(B)5.药物中挥发性物质的检测法〔A〕40.枯燥失重测定的方法有〔BCDE〕A．炽灼〔500～600℃〕法B．常压恒温干澡法C．减压枯燥法D．枯燥剂枯燥法E．减压枯燥剂枯燥法41.枯燥失重测定中应留意哪几个方面〔ABCD〕A.供试品平铺在称量瓶中的厚度普通不超越5mmB.枯燥温度普通为105℃C.可用枯燥剂枯燥D.主要指水分和挥发性物质E.测定时间不超越3小时

小结1、掌握药物中普通杂质反省的原理和方法：〔1〕氯化物反省法：原理及搅扰色的消弭〔2〕重金属反省法：〔a〕重金属：指实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质；〔b〕四种方法之原理及本卷须知〔3〕砷盐反省法〔a〕古蔡氏法：包括原理及试剂作用〔b〕Ag-DDC法：原理4、熟习特殊杂质的反省方法识记：杂质限量、枯燥失重、炽灼残渣、易炭化物、指示性杂质、重金属。思索题1，药物重金属反省法中，重金属以什么代表？有那几种显色剂？反省的方法共有哪几种？〔95年版的药典一共收载几法〕2，简述中国药典对药物中氯化物反省法的原理，方法及限量设计公式？3，简述硫代乙酰胺法反省重金属的原理和方法

特殊杂质反省方法基本要求了解药物特殊杂质反省方法特殊杂质：不同的药物，由于其分解工艺、原料和结构功用等不同，在消费和贮藏进程中能够引入的特有杂质，即特殊杂质。反省方法应用药物和杂质在物理性质上的差异应用药物和杂质在化学性质上的差异一、应用药物和杂质在物理性质上的差异物理法

光谱法色谱法物理法臭味及挥发性的差异颜色的差异溶解行为的差异旋光性质的差异〔比旋度可以反映药物的纯度〕光谱法1，紫外分光光度法2，原子吸收分光光度法〔主要用于金属元素的测定〕3，红外分光光度法〔主要用于药物中有效或低效晶型的反省〕荧光剖析法色谱法〔普遍〕具有分别检测两项功用1.纸色谱法〔常用于极性较大物质的分别剖析〕2.薄层色谱法〔简便、快速、灵敏度高、不许特殊设备〕TLC是药典中最常用的特殊杂质限量反省方法。

常用的方法有1)在一定供试品及反省条件下，不允许有杂质斑点存在〔自身对照法〕2)以待测杂质对照品检测〔杂质对照品法〕3)将供试品稀释到适当浓度作为杂质对照品溶液〔上下浓度对比法〕4)选用质量契合规则的与供试品相反的药物作为杂质对照品〔对照药物法〕3.高效液相色谱法(分别效能高、在线检测，可以准确测定含量〕1)峰面积归一化法2)主成分自身对照法〔不加校正因子，加校正因子〕3)内标法测定4)内标法加校正因子法5)外标法4.气相色谱法〔分别效能高、在线检测，可以准确测定含量〕无机溶剂残留量测定法

挥发性的特殊杂质二、应用药物和杂质在化学性质上的差异〔化学反响法〕〔一〕酸碱性的差异

〔二〕氧化恢复性的差异〔三〕杂质与一定试剂反响发生沉淀〔四〕杂质与一定试剂反响发生颜色〔五〕

杂质与一定试剂反响发生气体〔六〕药物经无机破坏后反省杂质小结(一)物理法臭味及挥发性的差异颜色的差异溶解行为的差异旋光性质的差异〔比旋度可以反映药物的纯度〕(二)光谱法1，紫外分光光度法2，原子吸收分光光度法〔主要用于金属元素的测定〕3，红外分光光度法〔主要用于药物中有效或低效晶型的反省〕荧光剖析法(三)色谱法〔普遍〕1.纸色谱法〔常用于极性较大物质的分别剖析〕2.薄层色谱法〔简便、快速、灵敏度高、不许特殊设备〕TLC是药典中最常用的特殊杂质限量反省方法。

常用的方法有1)自身对照法2)杂质对照品法3)上下浓度对比法4)对照药物法3.高效液相色谱法1)峰面积归一化法2)主成分自身对照法〔不加校正因子，加校正因子〕3)内标法测定4)内标法加校正因子法5)外标法4.气相色谱法〔分别效能高、在线检测，可以准确测定含量〕无机溶剂残留量测定法

挥发性的特殊杂质(四)化学法1,酸碱性的差异

2,氧化恢复性的差异3,杂质与一定试剂反响发生沉淀4,杂质与一定试剂反响发生颜色5,杂质与一定试剂反响发生气体6,药物经无机破坏后反省杂质思索题1,简述特殊杂质反省的方法。2,简述色谱法在杂质反省中的运用。本章小结1、熟习药物纯度的概念，熟习药物中杂质的来源：〔1〕药物纯度：药物纯真的水平。〔2〕来源：主要有两个方面，即消费进程中引入和贮存进程中发生。2、掌握杂质限量的概念和反省方法，杂质限量的计算：〔1〕杂质限量：药物中允许含杂质的最少量。〔2〕反省方法有〔a〕对照法〔b〕灵敏度法(c)比拟法〔3〕计算：3、掌握药物中普通杂质反省的原理和方法：〔1〕氯化物反省法：原理及搅扰色的消弭〔2〕重金属反省法：〔a〕重金属：指实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质；〔b〕四种方法之原理及本卷须知〔3〕砷盐反省法〔a〕古蔡氏法：包括原理及试剂作用〔b〕Ag-DDC法：原理4、熟习特殊杂质的反省方法〔1〕普通杂质：自然界散布普遍，在多种药物的消费和贮藏进程中容易引入的杂质〔2〕特殊杂质：一般药物在消费和贮藏进程中引入的杂质〔3〕信号杂质：含量可反映药物纯度水平的杂质〔4〕常用反省方法：物理法、光谱法、色谱法、化学法考核知识点与考核目的〔一〕药物杂质的概念和性质〔普通〕识记：杂质、普通杂质、特殊杂质、杂质来源、药用纯度与化学纯度的区别〔二〕杂质的反省方法〔重点〕识记：杂质限量、枯燥失重、炽灼残渣、易炭化物、重金属。了解：杂质限量计算；氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、炽灼残渣、枯燥失重、水分、酸碱度、特殊杂质TLC法、HPLC法、GC法反省的基本原理、方法、本卷须知。[本章练习题与答案]一、简答题1．简述硫代乙酰胺法反省重金属的基本原理，说明主要实验条件对反省结果的影响，假定供试品不溶解于水，可采用哪些方法消弭其搅扰？答：硫代乙酰胺法，硫代乙酰胺在弱酸性条件下水解发生硫化氢，与重金属离子生成黄色到棕黄黑色的硫化物平均混悬液。适用于供试品液廓清、无色，对反省无搅扰或经处置后对反省无搅扰的药物。假定供试品不溶于水，可采用供试品炽灼破坏后反省，如在酸性中不溶可采用在碱性条件下与硫化钠反响，微量金属离子时可用微孔滤膜法。2．反省溴化物中氯化物杂质时，应怎样扫除碘化物、溴化物的搅扰？答：反省溴化物中氯化物时，碘离子、溴离子也与硝酸银构成沉淀，搅扰反省。可在供试品中参与一定量的酸和过氧化氢溶液，加热煮沸，使碘离子、溴离子被氧化为碘和溴而挥发，溶液廓清无色后，再依法反省。3．氯化物反省法为什么要求必需在硝酸酸性溶液中停止？答：反省在硝酸酸性溶液中停止。参与硝酸可防止弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的构成而搅扰反省，同时还可减速氧化银沉淀的生成并发生较好的乳浊。4．简述药品中微量硫酸盐反省法的原理？答：硫酸盐反省是应用该杂质与氯化钡在盐酸酸性溶液中生成硫酸钡的白色混浊液，与一定量规范硫酸钾溶液与氯化钡在相反条件下生成的混浊比拟，以判别药物中硫酸盐能否超越限量。5．用硫氰酸盐反省药品中的铁盐杂质时，为什么要求参与过量的〔30%，3ml〕硫氰酸胺溶液？答：铁盐与硫氰酸根离子的反响为可逆反响，因此，参与过量的硫氰酸铵，不只可以添加生成配离子的动摇性，提高反响灵敏度，还能消弭氯化物等与铁盐生成配位化合物所惹起的搅扰。6．用古蔡法反省药物中微量砷盐时，为什么要求参与碘化钾试液和酸性氯化亚锡试液？答：原理是：金属Zn与酸作用发生重生态的氢，与药物中砷化合生成的砷化氢，遇溴化汞试纸发生黄色的砷斑，与定量规范砷溶液生成的砷斑比拟，判别含砷的限量。氯化