《NPN的鉴别方法》课件

饲料原料中非蛋白氮(NPN)的鉴别山东六和集团技术部郭吉原1精选课件ppt一.目前NPN的种类A铵盐(NH4HCO3、

(NH4)2SO4、NH4Cl)、尿素B尿素的衍生物:缩二脲、磷酸脲、淀粉糊化尿素、脲醛聚合物(蛋白精)、糠醛尿素、糖基化尿素C叠氮化钙CaN6D三聚氰胺C3N6H6◆脲醛聚合物和三聚氰胺是目前最常用的NPN脲醛聚合物(蛋白精)(CP=10元),三聚氰胺(CP=20元)2精选课件ppt二.NPN的鉴别(1)---尿素试剂:1.生黄豆粉。将大豆磨成粉末（注意；切勿加热升温)2.酚红：１g/L。称取酚红（苯酚红）0.1g溶于100ml乙醇中。步骤：取约0.5-2g样品，于50ml比色管内，再加约0.1-0.2g生黄豆粉，3－5滴酚红，40ml水，塞好塞子，摇动30秒，静止，如溶液变成红色，则样品中掺入尿素

3精选课件ppt二.NPN的鉴别(1)---尿素定量分析:称样1-3g于碘量瓶内,加生豆粉约1克,准确加入100ml水,在30°C摇动1h,过滤,取滤液50ml于蛋白仪内,加NaOH(30%)10ml,用硼酸吸收,再用盐酸滴定,同时做样品和生豆粉空白.CP=(V-V0-V01)xCx0.014x6.25mx50/100x1004精选课件ppt二.NPN的鉴别(2)---铵盐◆试剂氢氧化钠溶液３０％,３０g氢氧化钠加７０ml水。PH试纸◆步骤：取样品3-5g于100ml烧杯内，表皿内侧沾一条湿的PH试纸，向烧杯内加约5-10ml氢氧化钠，将表皿迅速盖上，如试纸迅速变蓝，打开表皿有很浓的氨味则含铵盐。

5精选课件ppt二.NPN的鉴别(3)---脲醛聚合物(蛋白精◆试剂：变色酸2g/L硫酸溶液称取0.2g变色酸于干燥的烧杯内，加入100ml浓硫酸，电炉上加热到约70-80℃，待溶解后，降温，移入120ml棕色的滴瓶内。◆步骤：将可疑物从显微镜下夹出数粒于干燥的小烧杯内，滴加约1ml变色酸，电炉上加热到刚刚产生微烟，取下，加入约30ml水，若溶液变成稳定的紫色，则样品中有蛋白精。

6精选课件ppt二.NPN的鉴别(3)---脲醛聚合物(蛋白精1.鱼粉肉骨粉除去伪装方法：任何掺假的鱼粉均要做一番伪装，如直接将经伪装过鱼粉放在显微镜下看很难发现真实情况，因此镜检前应首先要除去伪装，最有效的方法就是脱脂，具体做法如下：7精选课件ppt鱼粉肉骨粉除去伪装方法(1)(1)将少许鱼粉（3­-5g）用定性滤纸包好，放入索氏脂肪抽提器内，以石油醚作提取剂，脱脂约30分钟，至石油醚中看不到黄色为止，将纸包取出，水浴上烘干（70-80℃）。(2)将少许鱼粉（3­-5g）放入烧杯内，加入50ml石油醚，搅拌2分钟，过滤，将滤渣放回烧杯，加50ml石油醚，搅拌2分钟，过滤。将滤渣烘干（70-80℃）。

8精选课件ppt鱼粉肉骨粉除去伪装方法(2)(3)将少许鱼粉（3­-5g）放入烧杯内，加丙酮50ml搅拌2分钟，静止5分钟，将上清液弃去，再加50ml石油醚搅拌2分钟，静止5分钟，弃去上清液，将下部分的鱼粉烘干（70-80℃）。(4)将少许鱼粉（约3g）放入烧杯内,加3gKOH(NaOH),再150ml水搅拌后在放电炉煮沸2分钟,静止5分钟,倒掉上清液,用水洗残渣3-4次,再用丙酮50ml洗残渣2-3次,残渣用于蛋白精和含大量粗纤维类物质(如锯末、稻草、麦芽根)的检测9精选课件ppt鱼粉肉骨粉除去伪装方法(3)(5)将少许鱼粉（约3-5g）放入分液漏斗中,加四氯化碳50-80ml,轻轻摇动后静止5分钟,把分液漏斗活拴打开将沉淀物放到一小烧杯内,之后将小烧杯内沉淀物过滤出来,此残渣用于蛋白精的检测.

请注意：乙醚、丙酮、石油醚均为易燃品，请在通风的条件下操作，严禁烟火。10精选课件ppt三.其它定性检查的方法A.掺入植物类物质（如小麦麸、稻谷壳、粉丝蛋白粉）

试剂：碘-碘化钾溶液称1g的碘及5g碘化钾于烧杯内，加100ml水搅拌2分钟，待溶解后将其移入120ml棕色的滴瓶内。◆步骤：取约5g样品放在烧杯内，加约70ml水，在电炉上煮沸，取下静止2分钟，滴加碘－碘化钾试剂１-2ml，如溶液变成蓝色则掺入植物性的物质

11精选课件ppt三.其它定性检查的方法B.掺入植物性物质（含大量粗纤维类物质：如锯末、稻草、麦芽根）试剂：1.间苯三酚20g/L称间苯三酚2g加100ml95%乙醇，溶解后放入棕色滴瓶2.浓盐酸36%分析纯步骤：称1-2g鱼粉于培养皿内，滴加间苯三酚使样品湿润，放置5-10分钟后，滴加浓盐酸约0.5ml，放置2-3分钟，如样品显现深红色，则样品中含木质素，在显微镜下进一步确认为何物。

12精选课件ppt三.其它定性检查的方法C.掺入皮革粉试剂:1.稀硫酸2mol/L将取10ml浓硫酸慢慢加入到90ml水中。2.二苯基卡巴腙2g/L称0.2g二苯基卡巴腙，加入100ml95%乙醇，溶解后，移入棕色滴瓶内。步骤：取1-3g鱼粉于坩埚内，在电炉上炭化，再放在马弗炉内于550-600℃下灰化2小时，取出，降温后，加入稀硫酸10ml搅拌，加二苯基卡巴腙5-10滴，如溶液显紫红色则样品中含皮革粉。13精选课件ppt四.目前真蛋白测定中的问题1.真蛋白的测定方法•水洗法•三氯乙酸法•碱性硫酸铜法•重金属盐沉淀法14精选课件ppt四.目前真蛋白测定中的问题2.这类方法的特点

•能查出水溶性的NPN如:铵盐、尿素、磷酸脲•对水不溶性的NPN查不出。如:脲醛聚合物(蛋白精)、糠醛尿素、淀粉糊化尿素、缩二脲、糖基尿素、三聚氰胺•花生粕等本身就有3-7个CP是水溶的..\检测数据汇总\花生粕水溶性蛋白试验.xls

15精选课件ppt四.目前真蛋白测定中的问题

ƀ不论掺什么NPN都盲目的测真蛋白将会错检、误检、漏检16精选课件ppt四.目前真蛋白测定中的问题3.赖氨酸复合饲料的真蛋白?玉米用亚硫酸浸12-48h粗粉碎胚芽玉米皮分离离心分离膜过滤淀粉玉米胚芽玉米皮

玉米蛋白粉葡萄糖α淀粉酶赖氨酸Lys渣Lys高蛋白Lys98%,65%Lys复合饲料Lys蛋白玉米皮稻谷壳含NH3废水Lys菌种及杂菌赖氨酸菌种NH317精选课件ppt1#2#3#4#1#2#3#4#5#Lys4.954.665.823.70NH33.013.003.183.30Met0.360.320.320.27CPNH315.515.416.417.0Thr0.470.480.410.45CP39.837.436.436.1Cys0.350.270.280.31CF8.4810.4510.449.07Glu1.701.881.441.80EE2.43Ile0.490.440.330.40总能Cal/g382639423916Leu1.201.120.841.15AFB1ppb18.26Ala0.991.000.790.94DONppm4.10.93.0His0.180.350.280.36F-2ppm16271552ΣAA16.415.414.614.5赖氨酸复合饲料的质量情况汇总18精选课件ppt•赖氨酸复合饲料的质量特点•游离氨NH3高>3%CPNH3=15-17%,ΣAA=14-16%,CP=36-39%

CPNH3

CP•组成:玉米皮+赖氨酸生产过程的含氨废水•霉菌毒素的残留高

F-2=1500-5000ppbDON=1-3ppmAFB1=15-50ppb>40%四.目前真蛋白测定中的问题19精选课件ppt赖氨酸蛋白(外观:褐色或黑色小球)2种赖氨酸菌体蛋白的对比20精选课件ppt3.如何测真蛋白?•判断是否掺假(NPN)----镜检、定性分析。•根据NPN的种类决定采用什么方法AA总和—最有效的方法

三氯乙酸法、碱性硫酸铜法、重金属盐沉淀法、水洗法

四.目前真蛋白测定中的问题21精选课件ppt3.如何测真蛋白?掺微量的NPN(调蛋白1—5个百分点),氨基酸分析也难查出,只有用其它方法检测

如:镜检、过筛测定CP、定性分析测真蛋白要根据具体情况定方法,决不能教条主义四.目前真蛋白测定中的问题22精选课件ppt3.如何测真蛋白AA法----最有效四.目前真蛋白的测定中的问题23精选课件ppt五.鱼粉(1)鱼粉和鱼排粉有下面2个问题•真假的问题•好坏的问题(2)解决问题的方法•真假镜检、AA、NIR、

定性和常规检测分析上述这些方法已能解决真假的问题24精选课件ppt五.鱼粉好坏---是现在碰到最多的问题•鱼粉的好坏与鱼粉的种类有关白鱼粉>蒸汽鱼粉>直火鱼粉>蒸干鱼粉(下杂鱼粉,鱼干粉)•直火鱼粉常含少部分(10-20%)过热成分•质量差的直火鱼粉有时含40-50%的烧焦鱼粉,也可能是掺入的自燃鱼粉.25精选课件ppt直火干燥鱼粉。样品经脱脂处理。可见很多颗粒被火燎焦糊了直火干燥鱼粉。样品经脱脂处理。可见被火燎焦糊的颗粒

26精选课件ppt五.鱼粉鱼粉的好坏与鱼粉的新鲜度有关新鲜度指标:感观、气味、

VBN、组胺、酸价