植物组织培养的一般作业流程

植物组织培养通常步骤

一个完整植物组织培养过程通常包含以下多个步骤：（1）准备阶段查阅相关文件，依据已成功培养相近植物资料，结合实际制订出切实可行培养方案。然后依据试验方案配制合适化学消毒剂和不一样培养阶段所需培养基，并经高压灭菌或过滤除菌后备用。（2）外植体选择和消毒选择适宜部位作为外植体，采回后经过合适预处理，然后进行消毒处理。将消毒后外植体在无菌条件下切割成一定大小小块，或剥离出茎尖，挑出花药，接种到初代培养基上。（3）初代培养接种后材料置于培养室或光照培养箱中培养，促进外植体中已分化细胞脱分化形成愈伤组织，或顶芽、腋芽直接萌发形成芽。然后将愈伤组织转移到分化培养基分化成不一样器官原基或形成胚状体，最终发育形成再生植株。（4）继代培养分化形成芽、原球茎数量有限，采取合适继代培养基经数次切割转接。当芽苗繁殖到一定数量后，再将一部分用于壮苗生根，另一部分保留或继续扩繁。进行脱毒苗培养需提前进行病毒检测。（5）生根培养刚形成芽苗往往比较弱小，多数无根，此时可降低细胞分裂素浓度或不加，提升生长素浓度，促进小苗生根，提升其健壮度。（6）炼苗移栽

选择生长健壮生根苗进行室外炼苗，待苗适应外部环境后，再移栽到疏松透气基质中，注意保温、保湿、遮荫，预防病虫危害。当组培苗完全成活并生长一定大小后，即可移向大田用于生产。

二、单项选择题1.在衡量杂种优势（H）时，超中优势计算方法为（P1、P2分别表示两亲本性状平均值，F1为杂种一代性状平均值）：A.H＝[F1-(P1+P2)/2]/(P1-P2)/2B.H＝(F1-P1)/P1C.H＝[F1-(P1+P2)/2]/(P1+P2)/2D.H＝(F1-P2)/P22.依据植物梢端组织发生层学说，假如LII层细胞发生突变，则下列器官或组织会发生变异是：A．表皮B.种子C.不定根D.中柱3.对于孢子体型自交不亲和而言，下列基因型杂交组合能产生后代是：A．S1S2×S1S2B．S1S2×S1S3C．S1S2×S2S3D．S1S2×S3S44.原始群体性状差异较大异花授粉园林植物，实生选种时通常采取：A．一次单株选择B．一次混合选择C．混合－单株选择D．单株－混合选择5.现有两种菊属植物，其染色体组类型分别为AABB和CC，则将它们进行体细胞杂交取得谐和细胞杂种染色体组类型应该为：A.AABBB.ABCC.AABBCCD.CC6.下列射线中，哪一个属于能够引发物质电离电磁波？A．X射线B．β射线C．紫外线D．激光7.园林植物多倍体和二倍体相比，通常会表现为：A．气孔增多B．花大色艳C．适应性减弱D．坚固率增加8.常见化学诱变剂EMS（甲基磺酸乙酯）是一个：A．碱基类似物B．烷化剂C．抗生素D．生长调整物质9.在下列有性杂交方法中，被称为双交是：A．(A×B)×(C×D)B．[(A×B)×B]×BC．A×BD．[(A×B)×C]×D10.对于繁殖系数较高草花而言，有时为了加速其选种进程，下列哪个程序或圃地能够省略？A．株系圃B．品种比较预备试验圃C．品种比较试验圃D．区域试验三、填空题（每空0.5分，共15分）1.园林植物品种应含有三个基础特征是：___、___和___。2.芽变选种通常按二级选种程序，包含初选、___和___三个阶段。3.和其它作物相比，园林植物基因工程育种含有更为宽广应用前景，现在常见园林植物转基因方法关键有___、___、___等。4.菊花、月季、香石竹等切花材料品种繁多，花色丰富，但大家经过长久杂交育种未能培育出蓝色花品种，其关键原因是因为这些花卉细胞内缺乏一个被称为___花色素，控制这一色素合成关键基因为___。5.芽变开始发生时多以嵌合体形式出现，依据组织发生层内和层间细胞遗传物质差异可将芽变嵌合体分为___和___两种类型；对嵌合体形式芽变，可采取___、___、___、___等方法使其转化，最终取得同质纯化突变体。6.植物种类或品种对在进化过程中常常发生环境改变，通常含有较高适应性，这种现象称为___；而对进化过程中极少发生环境改变适应能力较差，在这种条件下所产生反应称为___。7.在园林植物引种过程中，必需进行引种试验，其内容具体包含___试验、___试验和___试验，然后确定推广应用。8.依据遗传特征不一样，植物雄性不育性可分为___、___和___3种类型；在利用雄性不育系进行F1种子生产时，雄性不育系亲本通常经过和___系杂交方法进行繁殖。9.园林植物新品种登录是一项很有意义工作，迄今中国已取得两种园林植物新品种国际登陆权威（IRA），它们分别是___和___。10．园林植物花粉生活力测定常见方法关键有___、___、___等。四、简答题1.简述园林植物种质资源保留关键方法和各自特点。2.引种时南树北移在栽培上应采取哪些方法？3.简述菊花育种关键目标和实现这些目标技术路径。4.简述人工发明园林植物多倍体和单倍体方法。5.简述园林植物一代杂种（F1品种）选育通常程序。6.简述远缘杂交不亲和性表现及其克服措施。（7分）五、叙述题（第1小题10分，第2小题15分，共25分）1.结合实例谈谈植物基因工程在园林植物遗传改良中应用前景。（10分）2.试述杂交育种中怎样进行亲本选择和选配，以一个无性繁殖园林植物为例，制订其有性杂交育种技术路线和实施方案。（15分）一、名词解释（每小题3分，共15分）1.种质资源：指携带能从亲代传输给子代遗传物质载体，能够是植物群体、个体、部分器官、组织、细胞、部分染色体乃至DNA片断。2.单株选择法：根据选择标准从原始群体中选出部分优良单株，分别编号，分别留种，下一代单独种植一个小区形成株系（一个单株后代），然后依据各株系表现，判定各入选单株基因型好坏方法。3.简单引种：引种地和原分布区自然条件差异较小或引种植物本身适应范围较广，只需采取简单栽培方法就能使引种植物适应新环境并能正常生长发育。4.通常配协力：又称一般配协力，指一个亲本品种或品系和其它品种（系）杂交所得一系列杂交组合后代某一性状平均表现。5.自交不亲和：指能产生含有正常功效且同期成熟雌雄配子雌雄同体植物，在自花授粉或相同基因型异花授粉时不能完成受精现象。二、单项选择题（每个1分，共10分）1.C2.B3.D4.C5.C6.A7.B8.B9.A10.B三、填空题（每空0.5分，共15分）1.特异性一致性稳定性2.复选决选3．农杆菌介导法基因枪法花粉管通道法4.花翠素（翠雀素）F3′5′H5．扇形嵌合体周缘嵌合体修剪嫁接扦插组织培养6．饰变形变7.种源品种比较区域8.细胞质雄性不育细胞核雄性不育核质互作雄性不育恢复系9．梅花桂花10.直接测定法培养基法化学染色法四、简答题（共35分）1．园林植物种质资源保留方法关键有就地保留、异地种植保留、种子保留、离体试管保留（包含缓慢生长离体保留和超低温保留）等。各自特点以下：①就地保留：保留原有生态环境和生物多样性，保留费用较低；但易受自然灾难。②异地种植保留：基因型集中，比较安全，管理研究方便；但费用较高，基因易发生混杂。③种子保留：种子轻易采集、数量大而体积小，便于贮存、包装、运输、分发；但无性繁殖植物及顽拗型种子不易保留。④离体试管保留：大大节省土地和劳力，繁殖系数高，可免去病毒感染，超低温保留可长久保留种质；技术依耐性较大。2．南树北移在栽培上应采取方法包含：1）合适延期播种，合适降低生长量，增加组织充实度，提升引入植物越冬能力。2）合适密植，提升植物越冬性。（3）合适节制肥水，提前封顶期，使其枝条充实。（4）幼苗期进行短日照处理，缩短生长久，使其枝条组织充实，提升越冬性。（5）冬季进行防寒保护。（1分3．菊花育种目标关键有：花期（多个花期）；花色（蓝色、黑色、复色、大花艳丽等）；花型（大花、小花、重瓣等）；株形（满足不一样用途）；抗性（抗病虫、抗逆境等）。（3分）实现育种目标技术路径为：引种；实生选种；人工杂交育种；芽变选种；诱变育种（辐射诱变、化学诱变、航空诱变）；生物技术育种。（3分）4．人工发明多倍体方法：1）物理方法：极端温度处理、机械损伤、电离及非电离辐射等（1分）；2）化学方法：秋水仙素等化学药剂处理（1分）；3）生物方法：有性杂交、胚乳培养等（1分）。人工发明多倍体方法：1）诱导孤雌生殖：远缘花粉刺激、延迟授粉、辐射、化学药剂处理等（1分）；2）花药或花粉培养（1分）。5．园林植物一代杂种（F1品种）选育通常程序为：1）确定育种目标，搜集育种材料（2）选育优良自交系：在每材料中选择一定数量优良单株自交，在自交后代中继续选择优良单株自交，直至选出稳定优良自交系（3）进行自交系间配协力测定（4）确定配组方法，配制一代杂种（5）品种比较试验、区域试验和生产试验（1分）6．远缘杂交不亲和性表现关键有：异种花粉在柱头上不能正常萌发；花粉萌发后，花粉管不能进入柱头；花粉管生长缓慢或太短，不能抵达胚囊；花粉管抵达胚囊，但不能完成受精。克服远缘杂交不亲和方法：合适选择亲本，并注意正反交（1分）；采取特殊授粉方法，如混合授粉、数次反复授粉、低剂量辐射处理花粉授粉、提前或延迟授粉（1分）；染色体加倍法、媒介法、生理靠近法（1分）；柱头移植或花柱短截法（1分）；化学药剂应用；改善授粉条件，如试管受精、利用保护地栽培等（1分）。五、叙述题1．植物基因工程又称植物遗传工程，是指以类型工程设计方法，根据大家意愿，将不一样生物体DNA在体外经酶切和连接，组成重组DNA分子，然后借助一定方法转入受体植物细胞，使外源目标基因在受体中进行复制和表示，从而定向改变植物性状技术方法。（2分）和有性杂交等传统育种技术相比，植物基因工程含有定向改造植物遗传性状（目标性明确、正确度高），打破物种间生殖隔离障碍(实现基因资源真正共享)，缩短育种周期等优点。（3分）植物基因工程在园林植物性状改良上应用广泛，包含修饰花色、改良花型、增加花香、改变花期、延缓衰老、改善株型、发明不育、提升抗性等多个方面。（4分）伴随植物转基因技术不停完善和更多目标基因广泛克隆，园林植物基因工程改良含有宽广发展前景。（1分）2．杂交育种时亲本选择和选配应注意遵照一定标准，其中亲本选择标准为：1）从大量种质资源中精选亲本；2）尽可能选择优良性状多种质材料；3）明确目标性状，突出关键，分清主次；