DB54T 0329-2024 拉萨裂腹鱼规范

ICS65.15054CCSB5254西 藏 自 治 区 地 方 标 准DB54/T0329—2024拉萨裂腹鱼2024-04-09发布 2024-05-09实施西藏自治区市场监督管理局  发布DB54/T0329DB54/T0329—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范围 1规范性引用文件 1术语和定义 1主要形态结构特征 1外部形态特征 1内部结构特征 3生长与繁殖 3生长 3繁殖 4遗传学特性 5细胞遗传学特性 5生化遗传学特性 5检测方法 6抽样 6性状鉴定 6年龄测定 6染色体检测 6血清乳酸脱氢酶（LDH） 6检验规则与结果判定 7附录A（资料性） 生长方程、体长与体重关系式 8体长和体重生长方程 8体长与体重关系式 8附录B（规范性） 同工酶各种试剂的配置 9凝胶的制备 9加样指示剂 9电极缓冲液 9染色液的配制 10前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由西藏自治区农业农村厅提出。本文件由西藏自治区农业农村标准化技术委员会归口。川律贝生物技术有限公司。DB54/T0329DB54/T0329—2024PAGEPAGE1拉萨裂腹鱼范围本文件给出了拉萨裂腹鱼（Schizothoraxwaltoni）的主要形态构造特征、生长与繁殖、遗传学特性、检测方法和检验规则。本文件适用于拉萨裂腹鱼的种质检测。规范性引用文件（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18654.11GB/T18654.22GB/T18654.33GB/T18654.44GB/T18654.66部分：繁殖性能的测定GB/T18654.1212GB/T18654.1313术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1学名拉萨裂腹鱼（Schizothoraxwaltoni）。3.2地方名尖嘴鱼。3.3分类位置硬骨鱼纲（Osteichthyes）（Cypriniformes）（Cyprinidae）（Schizothoracinae），裂腹鱼属（Schizothorax）。主要形态结构特征外部形态特征外形个体具有细小的中间叶，唇后沟连续。须2对，后须稍长，末端达眼后缘下方。体被不规则细鳞，身体之前的下方。下咽骨狭窄，呈弧形。拉萨裂腹鱼的外形见图1。图1 拉萨裂腹鱼外形图可数性状背鳍鳍式D.iii，7~8。臀鳍鳍式iii，5。鳞式31−339223−26−v101第一鳃弓鳃耙数外侧鳃耙数17～22，内侧鳃耙数22～32。比例性状体长155mm~450mm个体的比例性状变动范围见表1。表1 拉萨裂腹鱼比例性状比例性状数值比例性状数值体长/体高5.5（4.3~6.9）头长/吻长2.5（2.3~2.9）体长/头长4.1（3.2~4.5）头长/眼径7.6（5.4~9.2）体长/尾柄长5.5（5.2~4.6）头长/眼间距3.4（2.9~3.8）体长/尾柄高8.2（7.6~9.4）尾柄长/尾柄高1.7（1.5~2.0）4.2 内部结构特征鳔鳔2室，后室较细长，为前室的2.3倍～3.2倍。下咽齿下咽齿3行，2·3·5/5·3·2。下咽齿细圆，顶端尖，略钩曲，咀嚼面凹入。脊椎骨脊椎骨总数47枚。腹膜腹膜为黑色。生长与繁殖生长40377682。表2 拉萨裂腹鱼主要年龄组的体长和体重实测值龄组龄雌鱼雄鱼体长(平均±S.D)mm体重(平均±S.D.)g体长(平均±S.D.)mm体重(平均±S.D)g415146.0186.0±15.686.0±28.55200.1±24.4105.5±40.8205.7±13.9112.2±25.16228.5±36.2153.5±59.9243.2±24.7183.4±51.37261.0±30.2229.5±81.8275.9±33.9257.4±82.98300.3±35.5339.7±130.1295.9±27.9322.8±102.09337.7±48.6514.5±299.9319.1±28.4409.5±120.110361.2±33.1618.9±198.9339.3±30.2491.4±144.311411.8±43.4876.6±295.4358.2±34.3663.9±149.512412.6±40.6904.7±282.2373.0±27.4688.3±218.513432.1±38.41043.7±299.5377.2±37.7807.7±241.314457.0±31.41455.6±525.5398.8±33.8902.1±219.515482.9±47.31451.0±352.1411.0±28.1836.2±208.116501.6±49.01532.5±423.8393.1±59.0829.6±390.817479.8±41.81458.0±416.4418.7±38.0922.2±310.918517.0±30.11681.1±356.3427.2±28.9943.1±262.519503.5±54.11699.0±481.2442.7±29.71200.7±44.420514.3±32.21606.6±437.1436.0±51.61098.1±311.121536.0±28.21967.5±450.7441.0±46.7807.4±340.122505.1±62.51708.2±588.5447.0±37.61069.1±257.923512.7±47.21570.6±340.64681213.424519.8±54.21692.9±491.4448.8±23.71083.3±165.725520.3±44.61765.7±443.1265221603.5419.7±34.8928.0±309.8275601792.74391117.7284871308.229514.3±45.91681.0±564.330504.5±29.01597.8±285.4430929.5314901301.032420.0±21.2889.3±82.3336423788.14701096.234566.0±42.42120.7±805.74761437.935383736.3365041706.4456.5±20.51283.4±11.0376363038.34581235.7385952824.5395842722.9405532390.3生长方程和体长与体重关系式参见附录A。繁殖成熟年龄雌鱼为13龄；雄鱼10龄。产卵类型性腺一年成熟一次，一次性产卵。繁殖期3月～4月，3月为繁殖高峰期。怀卵量依据60尾样本估算的各年龄组怀卵量见表3。表3 拉萨裂腹鱼不同年龄组怀卵量年龄龄体重范围g怀卵量（均值±标准差）粒相对怀卵量（均值±标准差）粒/克101643.5138001121213.8-1473.812733.9±3059.410.7±0.9131083.7-2177.917696.4±9211.412.0±5.4141248.1-1896.919296.9±14943.912.7±7.0151171.4-2250.718094.9±10910.812.7±4.7161057.7-2668.318345.4±8228.912.6±2.8171121.2-2461.320733.7±11144.213.5±5.4181727.6-2183.423898.6±12618.014.1±6.4192198.53114516.3201460-2398.621735.0±5317.312.9±0.3211308.2-2739.918722.5±7745.711.2±1.9221420.2-2730.625377.2±15248.613.2±5.1231415.6-2267.726376.7±9022.916.1±2.9242182.72220011.3251428.8-2303.421503.9±13414.512.6±3.8271792.72173813.9291657.9-2480.719030.1±10789.511.8±2.7301799.8-1395.719880.3±1846.614.7±4.2382824.53391314.0392722.93476616.0遗传学特性细胞遗传学特性染色体数2n=92。核型公式：26m+28sm+22st+16t；臂数（NF）：146。染色体核型见图2。图2 拉萨裂腹鱼染色体核型图生化遗传学特性拉萨裂腹鱼血清乳酸脱氢酶（LDH）酶带扫描图见图3。图3 拉萨裂腹鱼血清乳酸脱氢酶（LDH）酶带扫描图检测方法抽样按GB/T18654.2的规定执行。性状鉴定按按GB/T18654.3的规定执行。年龄测定采用耳石鉴定年龄。方法按GB/T18654.4的规定执行。染色体检测按GB/T18654.12的规定执行。血清乳酸脱氢酶（LDH）试剂及配置方法同工酶各种试剂的配制见附录A。样品的采集与制备血清血清制备，从尾静脉抽取2ml血，于4℃、1000r/min离心6min，取上清备用。制胶先将混匀的6.5%分离胶液倒入模板约3/436℃左右30min胶聚合好以后，倒掉上面的水，将混匀的3.0%浓缩胶倒入模板，插好梳子，置于36℃左右30min胶聚合好以后，置于冰箱中备用。点样点样量为20μL。吸取20μL样与2μL～3μL加样指示剂混匀，一起加到样孔中。电泳分离6.5%3.0%。电极缓冲液：pH8.3Tris—甘氨酸。280V（18~24mA）0.5h220v5h～6h（2h以上。染色:37℃恒温箱中保温的同工酶染色液中染色。检验规则与结果判定按GB/T18654.1的规定执行。DB54/T0329DB54/T0329—2024PAGEPAGE10附录 A（资料性）生长方程、体长与体重关系式体长和体重生长方程雌性和雄性群体的体长和体重生长方程分别见式(A.)、(A.2)、(A.3)和(A.4)：雌鱼：Lt=644.3{1–exp[–0.084(t–0.247)]} （A.1）Wt=3291.9{1–exp[–0.084(t–0.247)]}2.984 （A.2）雄鱼：Lt=586.2{1–exp[–0.084(t+2.250)]} （A.3）Wt=2477.9{1–exp[–0.084(t+2.250)]}2.999 （A.4）式中：Lt－t龄时鱼体体长，mm；Wt－t龄时鱼体体重，g；t－鱼的年龄。体长与体重关系式雌性和雄性群体的体长与体重关系式见（A.5）和（A.6）：雌性：W=1.365×10−5SL2.984 （A.5）雄性：W=1.238×10−5SL2.999 （A.6）式中：W－鱼体体重，g；L－鱼体体长，mm附录 B（规范性）同工酶各种试剂的配置凝胶的制备凝胶制备溶液配置各种凝胶制备溶液的配方及配制方法见表B.1。表B.1各种凝胶制备溶液配方溶 液配 制 方 法凝胶缓冲液Tris56.75g200mLpH8.9250mL。4℃贮存。凝胶储液取丙烯酰胺33.3g，N，N′—亚甲基双丙烯酰胺0.9g，四甲基乙二胺（TEMED）338μL溶于蒸馏水中定容到150mL。4℃贮存。AP取过硫酸铵1.5mg溶解到100mL蒸馏水水中。4℃贮存。分离胶和浓缩胶的制备用6.5%分离胶和3.0%浓缩胶制成聚丙烯酰胺垂直板凝胶，该凝胶液配方见表B.2。表B.2凝胶制备配方6.5 %分离胶3.0 ％浓缩胶凝胶缓冲液,mL1.5凝胶缓冲液，mL0.5凝胶储液，mL7.3凝胶储液，mL1.2AP,mL1.5AP,mL0.5TEMED，μL－TEMED,μL4.0纯水，mL14.7纯水，mL6.8总体积，mL25总体积，mL9.0加样指示剂0.15％溴酚蓝—50％甘油：称取0.15g溴酚蓝溶于50mL蒸馏水，再加50mL甘油混匀。电极缓冲液取甘氨酸28.80g溶于800mL水，用约4.0