2019年临床医学检验技师考试《微生物检验》辅导讲义 肠杆菌科及检验

肠杆菌科及检验

•考点

＞概述

概念；命名与分类原则；共同特点；自然与人体内的分布；微生物学检查方法；临床意义。

＞埃希菌属、沙门菌属、志贺菌属、变形杆菌属、耶尔森菌属及其他肠杆菌科细菌。

生物学性状；微生物学检验；临床意义。

【内容讲解】

一、概述（共性）

肠杆菌科是由多个菌属组成，6杆菌，生物学性状相似。

大多数肠道杆菌属于正常菌群。当机体免疫力降低或侵入肠道外组织时成为条件致病菌而引起疾病。

部分为致病性细菌。

（一）分类

肠杆菌科细菌的种类繁多。主要根据细菌的形态、生化反应、抗原性质以及核酸相关性进行分类。根

据《伯杰系统细菌学手册》（1984年）将肠杆菌科的细菌分为20个属即埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、

枸椽酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、哈夫尼亚菌属、爱德华菌属、普罗威登斯菌属、变形

杆菌属、摩根菌属、耶尔森菌属等。

（二）生物学特性

1.形态与染色

，杆菌,大小为（1.0~6.0）UmX（0.3~1.0）um。

多数有周鞭毛（除志贺菌属、克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC）,无芽胞，少数菌属细菌可形成荚

膜。

2.培养

需氧或兼性厌氧；营养要求不高；

普皿和麦康凯培养基：中等大小、表面光滑的菌落；

液体培养基：混浊生长。

3.生化反应

发酵葡萄糖产酸、或产酸产气；

乳糖发酵试验：非致病菌+.致病菌-（除外变形杆菌）。触酶阳性；氧化酶阴性；硝酸盐还原为亚

硝酸盐。

4.抗原构造

＞菌体（0）抗原］

＞｝肠杆菌科血清学分群和分型的依据

＞鞭毛（H）抗原J

＞表面抗原（如Vi抗原、K抗原）：包绕在。抗原外的不耐热的多糖抗原，可阻断0抗原与相应抗体

之间的反应，加热处理能破坏其阻断作用。

5.变异

＞菌落S〜R变异

＞鞭毛H〜。变异

＞耐药性变异

＞生化反应性质的改变

6.抵抗力

不强。加热60℃,30分钟即被杀死。不耐干燥，对一般化学消毒剂敏感。对低温有耐受力，能耐胆盐。

7.肠杆菌科的初步分类

苯丙氨酸脱氨酶

变形杆菌属葡萄糖酸盐试验

普罗威登斯菌属(+)（-）

摩根菌属

克雷伯菌属埃希菌属

肠杆菌属志贺菌属

沙雷菌属沙门菌属

哈夫尼亚菌属枸檬酸杆菌属

爱德华菌属

耶尔森菌属

（三）致病性

1.致病性肠道杆菌：以肠内感染为主，腹泻为共显症状，引起急慢性肠道感染、食物中毒、旅游者腹

泻及肠热症等。

2.条件致病菌：为医院感染主要病原菌，出现移位感染。大肠埃希菌、变形杆菌及克雷伯菌等条件致

病菌可引起泌尿生殖道、伤口等部位的感染。

（四）微生物检验

1.分离培养

粪便或肛拭标本一增菌一肠道曲选择培养基

血,尿或脓汁等一肉汤增菌一血琼脂培养基J

-----►纯菌（菌落）-----»结合革兰染色及氧化酶反应结果作

进一步鉴定

2.鉴定

（1）初步鉴定：

①确定肠杆菌科的细菌，应采用葡萄糖氧化-发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌加以鉴别；

②肠杆菌科细菌的分群，多采用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，将肠杆菌科的细菌分为三个类群;

③选择生化反应进行属种鉴别。KIA和MIU将细菌初步定属。

（2）最后鉴定:

根据生化反应的结果初步定属、种，再用诊断血清做凝集反应才能作出最后判断。

二、埃希菌属

5个种：大肠埃希菌、蟒螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。

临床最常见的是大肠埃希菌。

（-）生物学性状

1.形态与染色

G,短杆菌，（1.0~3.0）umX（0.4-0.7）um。多数有周鞭毛，有菌毛，有荚膜或微荚膜。

2.培养特性

＞兼性厌氧菌；营养要求不高。

＞普通营养肉汤：浑浊生长。

＞普通营养琼脂：圆形，凸起，边缘整齐，灰白色的S型菌落,直径2〜3mm。

＞血琼脂平板：少数菌株产生6-溶血环。

＞伊红亚甲蓝琼脂：菌落呈蓝紫色并有金属光泽（发酵乳糖）。

＞麦康凯和SS琼脂：粉红色菌落。

3.生化反应

＞发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇产酸产气，分解蔗糖因菌株而异，尿素酶试验阴性。

＞口引噪、甲基红、V-P、枸椽酸盐试验（IMViC试验）为++-

＞克氏双糖铁琼脂（KIA）：斜面和底层均产酸产气，H2S（-）o

＞动力-口引噪-尿素（MIU）培养基为++1

4.抗原结构

＞菌体抗原（0）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三种构成。

＞现已知有171种0抗原，100种K抗原和56种II抗原。

＞一个菌株的抗原类型由特殊的0、K和II抗原的代码表示，其血清型别的方式是按0：K：II排列，例

如0111：K58：H2,

（二）致病性

致病物质：主要是侵袭力、内毒素、肠毒素等。

所致疾病：

1.肠道外感染以泌尿系统感染常见，还有菌血症，胆囊炎，腹腔脓肿。

2.肠道感染（致病性大肠埃希菌）

肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）：引起霍乱样肠毒素腹泻（逅）o

肠致病型大肠埃希菌（EPEC）：主要引起婴儿腹泻。

肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）：可侵入结肠黏膜上皮，引起痢疾样腹泻（黏液脓血便）。

肠出血型大肠埃希菌（EHEC）：又称产志贺样毒素（生）大肠埃希菌（SLTEC或UTEC）,其中0157：

H7可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征（业§）。

临床特征为严重的腹痛、痉挛，反复出血性腹泻，伴发热、呕吐等。严重者可发展为急性肾衰竭。

肠黏附型大肠埃希菌（EAggEC）：新近报道能引起腹泻。

3.CDC将大肠埃希菌0157：H7列为常规检测项目

＞在北美许多地区，0157；H7占肠道分离病原菌的第二或第三位，是从血便中分离到的最常见的病原

菌。

＞6、7、8三个月0157：H7感染的发生率最高。

＞0157是4岁以下儿童急性肾衰的主要病原菌。

（三）微生物检验

1.标本采集

＞肠道感染可采集粪便；

＞肠道外感染可根据临床感染情况采集中段尿液、血液、脓汁、胆汁、脑脊液、痰、分泌液等。

2.检验方法及鉴定

脓液增菌培养物粪便

血平板弱选择培养基

初报：

1~

形态、染色、性状

纯培养（菌落）

初步鉴定：

KIA：A/A或K/A、产气或不

鉴定为大肠埃希菌＜—产气、H2s一

JMIU：T-或一、+、~~,

IMViC：+、十、一、一

最后鉴定

最后鉴定：

＞补充系列生化试验

＞致病性大肠埃希菌

□无动力的不发酵乳糖株，应与志贺菌相鉴别

.鉴别试验：醋酸钠、葡萄糖镂、粘质酸盐产酸试验。

.大肠埃希菌均为阳性，而志贺菌均为阴性。

□血清学试验

三、志贺菌属

人类细菌性痢疾最常见的病原菌，通称痢疾杆菌。

＞根据生化反应与血清学试验该属细菌分为痢疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。

＞我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢最为常见。

（-）生物学特性

1.形态与染色

G,短小杆菌，（2〜3）umX（0.5-0.7）Um,无荚膜，无芽胞，无鞭毛，有菌毛。

2.培养特性

需氧或兼性厌氧；

液体培养基：呈混浊生长；

普通琼脂平板和SS培养基：中等大小、半透明的光滑型菌落（宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落）。

3.生化反应

氧化酶试验阴性，动力阴性，不产生赖氨酸脱竣酶；

KIA：K/A,H2S（-）；

IMViC：-＞+、-、-»

志贺菌属的细菌分解葡萄糖产酸不产气，不分解乳糖（宋内志贺菌可迟缓分解乳糖），叫I躲试验阴性,

H6阴性，MR试验阳性，VP试验阴性，不产生赖就酸脱竣酶，不能利用柠檬酸盐，氧化酶试验阴性，动力

阴性。

4.抗原结构

＞只有0抗原而无鞭毛抗原，个别菌型及新分离菌株有K抗原。

>0抗原分群特异性抗原和型特异性抗原两类。

>根据抗原构造可将志贺菌分为四个血清群，40余种血清型（包括亚型）。K抗原存在时能阻断。抗

原与相应抗血清的凝集作用。加热100℃、60分钟可消除K抗原对0抗原的阻断作用，在一定条件下可产

生S-R变异及耐药性变异。

（-）临床意义

致病物质：

侵袭力：菌毛粘附于肠粘膜上皮细胞，诱导细胞内吞。

内毒素：破坏肠粘膜；肠壁通透性；肠壁植物神经一一腹痛，腹泻，里急后重，粘液脓血便。

外毒素（志贺毒素，ST）：肠毒素活性；细胞毒活性；神经毒性。

所致疾病：细菌性痢疾，简称菌痢。

1.急性菌痢。

2.中毒性菌痢。

3.慢性菌痢。

传染源为病人和带菌者，经粪口传播。

（三）微生物检验

1.标本米集

尽可能在发病早期及治疗前采集新鲜粪便，选择脓血便或黏液便，必要时可用肛拭子采集。

2.检验方法及鉴定

粪便肛拭标本

I

SS平板中国蓝。r麦康凯平板

||

初步鉴定：

多价血清凝集试验

KIA：K/A^产气-/+、用S--志贺菌属

MIU：-、+/-、-

氧化酶（一）

最后鉴定

最后鉴定:

增加生化反应

志贺菌属的诊断血清作群型鉴定

1

鉴别

鉴别:

动力乳糖靛基质赖氨酸黏液酸、醋酸盐、枸椽酸盐

志贺菌----+

大肠埃希菌++++-

动力氧化酶试验

志贺菌--

类志贺邻单胞菌++

动力硫化氢A-F0诊断血清

志贺菌---

伤寒沙门菌+++

（四）防治原则

＞人工主动免疫用于预防目前尚不理想。

＞预防的主要措施是防止进食被污染的食品、饮料及水，及早发现及早积极治疗携带者。

＞治疗细菌性痢疾一般首选氟喳诺酮类抗生素。

（五）临床意义

致病因素为侵袭力、内毒素及外毒素（志贺菌A群/【型和H型产生志贺毒素，具有细胞毒、肠毒素、

神经毒）。可引起人类细菌性痢疾，其中可分急性、慢性两种，小儿易引起急性中毒性痢疾。慢性菌痢可

人-人传播，污染水和食物可引起暴发流行。

四、沙门菌属

（一）生物学性状

1.形态与染色

G,直杆菌，（0.7~1.5）umX（2.0-5.0）um,无芽胞，无荚膜，周鞭毛（除鸡沙门菌），多数有

菌毛。

2.培养特性

营养要求不高；

液体培养基：均匀混浊生长；

SS琼脂和麦康凯琼脂培养基：约2〜4mm的透明或半透明菌落，对胆盐耐受。产H2s者在SS琼脂上形

成黑色中心菌落。

3.生化反应

不能发酵乳糖（除亚利桑那菌），不产生靛基质，不分解尿素，甲基红反应阳性，V-P试验阴性。大多

数菌株产生FLS,发酵葡萄糖产酸产气（伤寒沙门菌产酸不产气）。

4.抗原结构

>0抗原：有58种，以阿拉伯数字依次标记。

>H抗原：H抗原是定型的依据。H抗原有两相，第一相为特异性抗原，用a、b、c……表示；第二相

为共同抗原，用1、2、3...表示。

>表面抗原：已证实沙门菌属有Vi、M和5抗原三种。

5.变异性

>S〜R变异

>H〜0变异

>相位变异：具有双相H抗原（第I相为特异相，第n相为非特异相）的沙门菌变成只有其中某一相

H抗原的单相菌，称相位变异。

AV〜W变异：失去全部Vi抗原的变异。

（二）致病性

致病因素：侵袭力、内毒素和肠毒素。

所致疾病：

1.肠热症即伤寒与副伤寒病。由伤寒与副伤寒沙门菌所引起的慢性发热症状。为法定传染病之一。

2.食物中毒

3.慢性肠炎

4.败血症

5.沙门菌的局部感染如颈部、腰部等。

全身疼痛、不适、

发热涧I驱冲

胸导管

｛湃长期）

肝、脾、肾

及胆囊等

肠热症吞噬细胞吞噬

:瑟露|反腐壁淋巴组织|

羹便j胆囊

菌血衣

!（典型病例病程为3YR》搏陵高热、肝脾肿

大、全身中毒、攻境

;并发症：J&穿孔、血栓性静腺炎、胆囊炎，落

（一由第】

（三）微生物检验

1.标本采集

根据不同