适宜技术应对结核感染

1、1，1 .结核病背景资料2 .结核病病原学实验室诊断3 .体外r-干扰素释放试验4 .小结2 .背景结核病流行现状全球三分之一(20亿)感染结核菌中国肺结核患者达50亿人潜伏感染、复发、细菌向人体复制、播种disseminn 发作Onset、康复恢复、时间表、诊断诊断、治疗Treatment新型抗结核药物(50% )、新型快速诊断技术(40% )、新型结核疫苗(10% )、JID 2012:205 (Suppl 2)、S147 . 1882年，德国细菌学家科霍(Robert Koch )证实结核分枝杆菌是结核的病原菌。 本菌可侵犯全身各组织器官，但肺部感染最多。 在微生物分类上，结核分枝杆菌属

2、于放线菌门、放线菌纲、放线菌目、分枝杆菌科、分枝杆菌属分枝杆菌复合群的有人型、牛型、非洲型和田鼠型，人型结核分枝杆菌是人的主要病原菌。 (2)结核菌无内毒素和外毒素，也不产生侵袭性酶，其致病性主要与细胞壁含有大量脂质有关。 主要是磷脂：刺激单核细胞增殖，结核结节与干酪样坏死形成相关的分枝菌酸：与抗酸染色性相关的索状因子：破坏细胞线粒体膜，慢性肉芽肿形成相关的硫酸脑苷酯：抑制食溶体形成，具有抗蚀作用蜡质d，刺激生物体的延迟型超敏反应(3)结核菌主要引起细胞免疫反应，属于传染性免疫，7，背景结核患者发现，症状：肺结核可疑症状者，主要有咳嗽、咳痰2周以上者，或有咯血症状者发现方式：原因病的就诊、转诊

3、和原因病的推荐是发现肺结核患者的主要方式. 背景-结核实验室的任务provideearlyandaccuratediagnosis早期提供正确的诊断initiationofrighttreatmentandinterventionearly制定正确的治疗方案， 早期介入monitoringtherapyefficacyinapromp的t manner的快速监测疗效treatmentanddiagnosiscompanionintuberculosisdrugdevelopment与抗结核药的开发同时、10、结核病实验室的诊断技术概要、1 .结核抗体2 .结核蛋白芯片3 .体外r-干扰素试验4

4、 .结核杆菌分泌抗原、1 .涂片2 .培养3 .药敏4 .菌型鉴定、细菌学、免疫学、分子生物学，其他1.HPLC 2. 结核分枝杆菌形态学检查，1 .直接涂抹法2 .离心切片法，1 .抗酸染色2 .荧光染色，1 .普通显微镜2 .荧光显微镜3 .自动读影技术，结核菌形态学检查-离心切片技术，2015年7月至2015年15月结核菌形态学检查-自动读影技术，2016年2月至2016年3月， 我院对308例涂膜进行人工读影和校正机自动读影对比试验的结果为286例，综合适合率为92.58%。、14、结核病诊断金标准结核分枝杆菌培养、 分枝杆菌全自动连续检测系统-BACTEC MGIT 960操作简单安

5、全可靠性性能优异的高性能价格比m=mycobacterium g=growthi=indica tte检测对象CO2 O2检测手段颜色荧光发光元素培养基改良Middle Brook 7H9营养添加剂抗菌剂安全、结核病诊断金标准结核分枝杆菌培养、简单的工作流程、17、结核病诊断金标准结核分枝杆菌培养、BACTEC MGIT 960阳性结果判定1 .抗酸染色2 .普通培养血液平板3.MPB64抗原检查、18、结核病诊断金标准结核分枝杆菌培养、BACTEC 9120只能进行血液培养。 标本：血液，无菌体液，我可以！ 普通细菌真菌分枝杆菌，19，结核分枝杆菌体外药敏试验，结核杆菌体外药敏试验，MIC测

6、定法，固体培养法，液体仪器法，液体微量法判断的阈值是1%药敏试剂为： SIRE Kit (Streptomycin，Isoniazid， Rifampin and Ethambutol) 4-13日pza工具包4-21日siresusceptibibity在内的I， e (在低浓度耐药品性的情况下，可用于高浓度试验)、BACTEC MGIT 960药敏系统、 21、结核分枝杆菌体外药敏试验、MGIT Plastic Tubes、mgit plastic tubes ba ctec 960 pza kit， 960 direct LIS、BACTEC 960 for GD、手动镜头、BACTEC

7、 460TB、BACTEC 9000MB， 2003 bdisalways epicenter for the 960， 22，结核分枝杆菌体外药敏试验，drugfreeisoniazidethambutolinoculummedia0.2mcg/ml2.0mcg/ml10-310-52690 % resistant 34.60.1 interpretationresistantsusceptible，23，结核分枝杆菌体外药敏试验， 收集了结核分枝杆菌液体微量药敏、结核分枝杆菌体外药敏试验、结核分枝杆菌液体微量显色法药敏试验我院2015年8月至11月临床分离菌株511例，采用液体微量显色法分

8、析利福平、异烟肼、链霉素、乙醇、卷曲、25、结核分枝杆菌体外药敏试验、结核分枝杆菌液体微量显色法药敏试验对比试验收集临床分离菌株和国家参比室质量控制菌株117例，采用液体微量显色法和罗氏比例法分别用利福平、异烟肼、链霉素、乙醇醇、卡霉素、氧氟沙星、乙基乙基收集了结核分子生物学诊断、一、结核分枝杆菌探针溶解曲线技术、27、结核分子生物学诊断、结果判断、结核分子生物学诊断、我院样品库临床分离菌株154例，经溶解曲线法耐药性基因突变分析以及罗氏比例法耐药性试验，对耐药性结果不一致的11株菌进行基因序列、29、结核分子生物学诊断、二、结核分枝杆菌RNA检测(TB-RNA) RNA作为临床分子诊断靶的优

9、点： RNA拷贝数DNA拷贝数更有临床意义的：生命力旺盛的病原体RNA转录活跃RNA远不如DNA，导致病原体死亡， RNA快速降解的结核分子生物学诊断，修订了今年我院住院患者179例，分析涂膜、培养和TB-RNA检测报告，我院涂膜、培养阳性率分别为15.1%和37.9%。 TB-RNA的总阳性率为35.8%。31、结核分子生物学诊断、三、EasyNAT TB-DNA检测(恒温扩增法)原理：将病原体DNA扩增、核酸杂交和核酸试纸条检测三项技术有机一体化，恒温扩增反应中加入了两对TB特异性引物、一对特异性探针，同时完成的检测对象片段：的目标是结核、32、结核分子生物学诊断、操作规程、结核分子生物学

10、诊断，2015年6月，我科参加了CTCTC“EasyNAT结核分枝杆菌核检试剂盒现场应用评价”项目，结果如下：注*:1例培养阳性最终鉴定为非结核分枝杆菌。 四、Gen-Xpert MTB/RIF可将进行标本处理、实时PCR和利福平耐药性检测的完整平台痰标本直接装入模块，无需与任何试剂混合处理即可实现标本液化、去污、富集、DNA提取、rpoB实时放大、 结核分子生物学诊断，Xpert MTB/RIF和PCR TB-DNA检测的比较：阳性符合率99.03，阴性符合率92.61，总符合率95.31，36，结核分子生物学诊断，涂膜阳性肺结核3360xpert检查率结核分子生物学诊断，Xpert MTB

11、/RIF和BD960液体培养比较实验：阳性适合率95.52，阴性适合率95.51，总适合率=95.51，结核分子生物学诊断，Xpert MTB/RIF和比例法药敏比较实验：阳性适合率96 39，结核分子生物学诊断，WHO关于Xpert MTB/RIF的建议Xpert MTB/应采用RIF作为MDR-TB的高风险组，早期发现并有效控制疫情MDR-TB患者。 Xpert MTB/RIF在MDR和HIV问题不严重的地区，可以用于基于显微镜检查的后续检查，特别是涂阴标本的进一步检查。40、体外r干扰素释放试验、蛋白水平、结核菌素试验(TST )、T-SPOT.TB，quantiferon-tbgold

12、in-tube (qft-tube )特异性仅对结核分枝杆菌复合组敏感，大多数环境分枝杆菌和卡介苗(BCG ) 与无交叉反应的美国FDA数据：特异性97.1%(297/306 )国内临床数据：特异性94.1%(478/508 )敏感度几乎对免疫力下降/无法抑制的肺外结核患者具有高检出率的美国FDA数据：敏感度95.6%(175/183 )国内临床数据：敏感度95.3 43、体外r干扰素释放试验、实验效果图避免临床无效药品检验灵敏度的提高有利于临床对结核病的早期发现、早期治疗，避免疾病的传播和扩散提前48小时产生结果，45、体外r干扰素释放试验、阴性结果对患者体内结核菌的特异效果假阴性结果：感染

13、阶段不同的少数免疫系统功能不全/疾病实验工作不正常。阳性结果提示患者体内存在对结核菌特异效应t细胞，患者存在结核感染。 但是，是否为活性结核症，有必要结合临床症状及其检查指标进行综合判断。 假阳性结果：感染4种环境分枝杆菌时： M.kansasii(堪萨斯)、M.szulgai (苏)、M.marinum (海)、M.gordonae (戈登)。 WHO 2014潜伏结核感染管理指南： 1、在HIV感染者、与肺结核患者密切接触的成人和儿童、开始接受抗肿瘤坏死因子(TNF )治疗的患者、接受透析治疗的患者、准备接受器官或血液移植的患者以及矽肺患者中开展LTBI系统检查和治疗。 LTBI检查推荐使用干扰素释放试验(IGRA )或结核菌素皮试验(TST )。 2 .对监护权、医疗从业者、结核病高负担国家的移民、流浪汉、吸毒者，可以有条件地开展LTBI系统的检查和治疗。 3 .对于糖尿病人、酒精依赖者、吸烟中毒者、低体重者，如果他们不属于上述1和2的情况，则不建议通常开展LTBI的系统检查。47、体外r干扰素释放试验、LTBI筛选和诊断提案流程、48、体外r干扰素释放试验、Menzies等人在200