blot实验

blot实验Tag内容描述：<p>1、Western blot 实验技术 定义： n印迹法（blotting）是指将样品转移到固相载体上，而后利用相应 的探测反应来检测样品的一种方法。 n1975年，Southern建立了将DNA转移到硝酸纤维素膜（NC膜）上 ，并利用DNARNA杂交检测特定的DNA片段的方法，称为 Southern印迹法。 n而后人们用类似的方法，对RNA和蛋白质进行印迹分析，对RNA 的印迹分析称为Northern印迹法，对单向电泳后的蛋白质分子的印 迹分析称为Western印迹法，对双向电泳后蛋白质分子的印迹分析 称为Eastern印迹法 Western Blot基本原理 在电场的作用下将电泳分离的多肽从凝胶转移至一。</p><p>2、Western-blot 试验,概论,它结合了凝胶分辨力高和固相免疫测定的特异敏感等多种优点，与免疫沉淀法比较，这种方法无需对靶蛋白进行同位素标记。几乎总在变性条件下进行，可以避免溶解、聚集以及靶蛋白与外来蛋白的共沉淀等诸多问题。 具有从混杂抗原中检测出特定抗原，或从多克隆抗体中检测出单克隆抗体的优越性，还可以对转移到固相膜上的蛋白质进行连续分析，具有蛋白质反应均一性，固相膜保存时间长等优点。 被广泛地用于蛋白质研究，基础医学和临床医学的研究。,溶解蛋白策略,1 使用剧烈的条件以确保细胞蛋白能全部裂解下来，但这可能。</p><p>3、Western blot试验技术 概论 它结合了凝胶分辨力高和固相免疫测定的特异敏感等多种优点 与免疫沉淀法比较 这种方法无需对靶蛋白进行同位素标记 几乎总在变性条件下进行 可以避免溶解 聚集以及靶蛋白与外来蛋白的共沉淀等诸多问题 具有从混杂抗原中检测出特定抗原 或从多克隆抗体中检测出单克隆抗体的优越性 还可以对转移到固相膜上的蛋白质进行连续分析 具有蛋白质反应均一性 固相膜保存时间长等优点 被广。</p><p>4、Western blot,雷 萍,蛋白质样品经过SDS-PAGE分离后，通过转移电泳或直接印迹方式原位转移至固相介质上，并保持原有的物质类型和生物学活性不变，然后应用抗原抗体反应进行的特异性检测。,Western Blot,免疫印迹技术,一、原理 二、步骤 1、蛋白质的分离 2、转移 3、免疫学检测,1、分离,（1）制胶 1%琼脂糖封底 装配电泳槽 灌注分离胶 灌注浓缩胶 （2）样品处理 （3）电。</p>