核酸的研究方法

核酸的研究方法Tag内容描述：<p>1、第15章核酸的研究方法,NucleicAcid,制备天然核酸必需采用温和的条件，防止过酸、过碱，避免剧烈搅拌，尤其重要的是防止核酸酶的作用,一、核酸的分离、提纯和定量测定,真核DNA以核蛋白（DNP）形式存在，DNP溶于水或高盐溶液（1mol/LNaCl），但不溶于低盐溶液（0.14mol/LNaCl去除蛋白质：水饱和酚，氯仿异戊醇。DNA沉淀：0.3MNaAC-70%乙醇,（一）DNA分离纯。</p><p>2、核酸的研究方法,核酸的分离、提纯和定量测定,核酸的超速离心,核酸的凝胶电泳,核酸的核苷酸序列测定,DNA聚合酶链式反应（PCR）,DNA的化学合成,制备天然核酸必需采用温和的条件，防止过酸、过碱，避免剧烈搅拌，尤其重要的是防止核酸酶的作用,一、核酸的分离、提纯和定量测定,真核DNA以核蛋白（DNP）形式存在，DNP溶于水或高盐溶液（1mol/L NaCl），但不溶于低盐溶液（0.14mol/L NaCl），据此，细胞破碎后采用高盐提取，低盐沉淀，可将DNP与RNA核蛋白分开，提取出DNP。 去除蛋白质：水饱和酚，氯仿异戊醇。 DNA沉淀：0.3M NaAC-70%乙醇,（一。</p><p>3、第十五章 核酸的研究方法,1、核酸的分离、提纯和定量测定,DNA的分离 RNA的分离 核酸的定量,Isolation of Nucleic Acids,Goals: removal of proteins DNA vs RNA isolation of a specific type of nucleic acid,Types of Methods: differential solubility adsorption methods density gradient centrifugation,Types of DNA: genomic (chromosomal) organellar (satellite) plasmid (extra-chromosomal) phage/viral (ds or ss) complementary (mRNA),General Features: denaturing cell lysis (SDS, alkali, boiling, chaotropic) enzyme。</p><p>4、第15章 核酸的研究方法,Nucleic Acid,制备天然核酸必需采用温和的条件，防止过酸、过碱，避免剧烈搅拌，尤其重要的是防止核酸酶的作用,一、核酸的分离、提纯和定量测定,真核DNA以核蛋白（DNP）形式存在，DNP溶于水或高盐溶液（1mol/L NaCl），但不溶于低盐溶液（0.14mol/L NaCl 去除蛋白质：水饱和酚，氯仿异戊醇。 DNA沉淀：0.3M NaAC-70%乙醇,（一）DNA分离纯化,制备RNA时，最重要的是使RNase灭活： 所有容器都要经过高温处理，不能高温高压的用0.1焦碳酸二乙酯（DEPC）处理。 加入强变性剂（如胍盐）使RNase失活； 在RNA的反应体系内加。</p><p>5、第十五章 核酸的研究方法,一、核酸的分离、提纯和定量测定,二、核酸的超速离心,三、核酸的凝胶电泳,四、核酸的核苷酸序列测定,五、DNA聚合酶链反应（PCR）,六、DNA的化学合成,楚雄师范学院化学与生命科学系 范树国,一、核酸的分离、纯化和定量测定,尽可能保持其天然状态，防止降解和变性。 条件温和，防止过酸、过碱、剧烈搅拌。 抑制核酸酶。,（一）DNA分离,真核DNA以核蛋白（DNP）形式存在，D。</p><p>6、第十五章 核酸的研究方法 第一节 核酸的分离、提纯和定量测定 一、DNA 的分离 用1mol/L 的NaCl 制备组织匀浆，离心除去组织残渣，多次用苯酚处理使蛋白质变性，每次处理后离心取上层水相，最后加2 倍体积的乙醇沉淀出DNA。 二、RNA 的分离 由于RNA 酶存在广泛，且十分稳定，破碎细胞时要加入胍盐破坏RNA 酶，试剂要用0.1%的DEPC（焦碳酸二乙酯）配制，器皿要高压灭菌或用0.1。</p>