球蛋白的分离纯化

球蛋白的分离纯化Tag内容描述：<p>1、血清球蛋白的 分离纯化与鉴定,刘晓如,【实验目的】 1学习盐析法、凝胶层析和离子交换层析分离纯 化蛋白质的基本原理及应用 2掌握醋酸纤维薄膜电泳技术的原理及应用 3了解蛋白质分离纯化的总体思路,【实验方法】 一、盐析法粗分-球蛋白 二、凝胶过滤方法脱盐 三、离子交换层析方法纯化-球蛋白 四、醋酸纤维素薄膜电泳法鉴定-球蛋白的纯度,【基本原理】 蛋白质的分离、纯化及鉴定是研究蛋白质化学性质及生物学功能的重要手段之一。 不同蛋白质的分子量、溶解度及在一定条件下，带电的情况等都有所不同。利用这些性质的差别，可分离纯化各种。</p><p>2、血清白蛋白、-球蛋白的分离、纯化及鉴定,分离纯化的一般程序,选择材料,破碎细胞,提取,分离纯化,分析及鉴定,（粗分级，细分级）,（预处理）,实验目的,通过从血清中分离、纯化、鉴定血清白蛋白和-球蛋白的实验，培养学生综合应用盐析、离心、色谱、电泳分光等技术来分离纯化特定蛋白质的技能。,实验原理,1. 初分级: 血清经饱和硫酸铵盐析后获得白蛋白粗分离样品和球蛋白粗分离样品。 2. 脱盐:用凝胶色谱法除去分离样品中的盐类。 3. 细分级: 用离子交换色谱法从白蛋白粗分离样品中提取纯化的白蛋白；从球蛋白粗分离样品提取纯化的-球蛋白。 。</p><p>3、血清白蛋白、-球蛋白的分离、纯化及鉴定,目的要求,(一)掌握分离纯化蛋白质的基本原理。 (二)了解柱层析技术。,（一）分离纯化的意义,从生物材料中分离制备蛋白质、核酸，研究其结构与功能，对于了解生命活动的规律，阐明生命现象的本质有重大意义。 工业生产的需要：食品、发酵、纺织、制革等工业，需要大量的高活性的酶制剂。如用淀粉酶制造葡萄糖、麦芽糖、糊精以及糖浆等。 医疗的需要：如用猪胰岛素治疗糖尿病。 基因工程的需要,（二）分离纯化的要求,1、纯度：主要取决于研究的目的和应用上的要求。如作为研究蛋白和一级结构、空间结。</p><p>4、生化教研室,血清-球蛋白的分离纯化 盐析、层析技术,1. 掌握分离纯化蛋白质的基本原理和基本过程 2. 熟悉盐析、离心、层析等生化基本技术在蛋白质分离纯化中的综合应用,实验目的,硫酸铵盐析初步分离 -球蛋白,盐析原理,中性盐能破坏蛋白质溶液的水化膜,中和蛋白质的表面电荷,从而使蛋白质聚集沉淀,分段盐析,由于不同蛋白质分子颗粒大小、亲水程度、所带电荷的不同，盐析所需的盐浓度也是不同的。 当调节不同的盐浓度，不同蛋白质将会分段沉淀，即分段盐析。,50饱和的硫酸铵能使血清中的球蛋白沉淀，而33饱和的硫酸铵则使-球蛋白沉淀。,分离-。</p><p>5、实验二 血清球蛋白的分离纯化与鉴定,层析技术 实验原理 实验思路 实验流程及操作注意事项,层 析 技 术,1层析法：又称色谱法，是一种广泛运用的物质分离纯化、分析鉴定技术.,2. 依据：混合物中各组分的理化性质差异吸附力、分子形状、大小、酸碱性或分子极性、分子亲和力以及分配系数。,固定相固定不动 流动相对固定相作单向相对运动，推动样品中各组分通过固定相向前移动。各组分理化性质不同，对流动相和固定相具有不同的作用力，因此在流动相推动样品通过固定相的过程中，通过不断地吸附、解吸、吸附、解吸作用，造成混合物中各组分在固。</p>