液相色谱方法开发

液相色谱方法开发Tag内容描述：<p>1、液相色谱的方法开发,（二）梯度方法,梯度洗脱的特点,优点 单位时间的分离能力增加 检测灵敏度提高 缺点 仪器设备要求高 不适合某些检测方式 柱需再生 定量分析的重复性较低,梯度的洗脱方式,高压梯度及低压梯度,梯度洗脱的可变参数,A及B液的成分和化学特性 梯度的陡度 梯度的变化形状,如不用梯度：分离不理想,梯度条件的优化,梯度曲线的变化凹线,梯度曲线的变化凸线,梯度平衡时间的影响（一）,10分钟的梯度，6分钟的平衡时间色谱图不重复,梯度平衡时间的影响（二）,平衡时间6分钟,平衡时间7分钟,平衡时间8分钟,平衡时间9分钟,平衡时间从6到。</p><p>2、液相色谱的方法开发,分离机理及色谱柱,选HPLC参数时的基本考虑,溶解度 - 选择流动相的条件 分子量 - 在样品预处理或GPC分析时有用 官能团 - 有否离子化基团? 保留特性如何? 样品的基质 - 考虑如何前处理 在基质中样品的含量 - 分析、制备都考虑 检测特性 - 有否紫外吸收? 荧光? 找出样品中不同组份之间的差异 摸索条件的重要线索,极性问题,液相色谱的分离机理,正相 反相 体积排除 离子交换 其他 不同的分离模式是不同的机理,吸附色谱的分离机理,随着样品在固定相上的吸附能力由大到小 在色谱柱上的保留由长到短,吸附色谱概述,分离基于样品。</p><p>3、液相色谱的方法开发,（二）梯度方法,梯度洗脱的特点,优点 单位时间的分离能力增加 检测灵敏度提高 缺点 仪器设备要求高 不适合某些检测方式 柱需再生 定量分析的重复性较低,梯度的洗脱方式,高压梯度及低压梯度,梯度洗脱的可变参数,A及B液的成分和化学特性 梯度的陡度 梯度的变化形状,如不用梯度：分离不理想,梯度条件的优化,梯度曲线的变化凹线,梯度曲线的变化凸线,梯度平衡时间的影响（一）,10分钟的梯度，6分钟的平衡时间色谱图不重复,梯度平衡时间的影响（二）,平衡时间6分钟,平衡时间7分钟,平衡时间8分钟,平衡时间9分钟,平衡时间从6到。</p><p>4、液相色谱的应用以及方法开发,提 纲：,一.HPLC的应用 二.方法开发过程 1）选择HPLC检测器 2）方法开发的具体步骤 3）梯度洗脱方法,一.HPLC的广泛应用,据2008年统计，世界上化合物总数多达5000多万种 在全部有机化合物中仅有20左右的样品适用于GC分析 而HPLC可对80左右的有机化合物进行分离和分析,HPLC的广泛应用,HPLC特别适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物以及生物活性物质的分离和分析并且可以做制备 在医药、食品、农业、生命科学、化工、环保等领域都有着广泛的应用潜力。,HPLC的应用领域,在食品研究中的分析应用 食品。</p>