原生质体制备

原生质体制备Tag内容描述：<p>1、生物药物综合实验,王 维 彬,实验 八,植物原生质体的制备,实验目的 实验原理 实验器材 实验方法 实验结果 注意事项 思考题,学习用酶溶解细胞壁的方法制备原生质体，为细胞生理研究提供必要基础。 掌握植物原生质体分离的基本原理及其操作过程,实验目的,植物原生质体是指包在植物细胞壁内的生活物质，可通过混合酶液消化细胞壁而获得。原生质体经适宜的培养能合成新壁，并进行细胞分裂，经特殊诱导可生成完整植株。 除去细胞壁后为原生质所包围的“裸露细胞”，是开展基础研究的理想材料。其中酶解法分离原生质体是一个常用的技术，其原理是。</p><p>2、文献汇报,2011.3.3,www.themegallery.com,Company Logo,www.themegallery.com,Company Logo,微生物学实验教程 周德庆（酵母）,1、接种于液体培养基上培养。 2、取培养液10ml，4000r/min离心5min, 弃上清液，用Tris-HCl(pH 7.4)、0.5mol/LEDTA、高渗缓冲液各洗涤一次。 3、用含10mmol/L巯基乙醇的高渗缓冲液稀释裂解酶液。 4、加酶液，100r/min摇床50-100min酶解。脱壁效果达70%左右即停止酶解。 5、100r/min离心三分钟，去沉淀，取上清。再2000r/min离心10min收集沉淀原生质体。 6、高渗缓冲液洗涤2次，2000r/min离心10min收集原生质体，。</p><p>3、原生质体的制备,细胞生物学实验六,目的要求,掌握植物原生质体的分离制备技术，观察原生质体的形态。,实验原理,分离原生质体常采用酶解法。其原理是根据由纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶配制而成的溶液对细胞壁成分的降解作用，而使原生质体释放出来。原生质体的产率和活力与材料来源、生理状态、酶液的组成、以及原生质体收集方法有关。酶液通常需要保持较高的渗透压，以使原生质体在分离前细胞处于质壁分离状态，分离后不致膨胀破裂。渗透剂常用甘露醇，山梨醇，葡萄糖或蔗糖。酶液中还应含一定量的钙离子，来稳定原生质膜。游离出来的原。</p>