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文档简介

,硝酸还原酶(NR)活性的测定,制作人： 车永梅单 位： 生命科学学院,一、实验目的,了解硝酸还原酶在氮代谢中的地位，掌握硝酸还原酶活性测定的方法。,二、实验原理,植物吸收的硝酸根离子，首先通过硝酸还原酶的催化，被还原成亚硝酸根离子。其反应如下： NO3-+NADH+H+ NO2-+NAD+H2O 产生的亚硝酸根离子可以从组织内渗到外界溶液中，测定反应液中亚硝酸含量，通过一定公式计算就可得硝酸还原酶活性的大小。,亚硝酸离子的测定用比色法。其反应如下：对氨基苯磺酸(或磺胺)+2H+NO2- 叠氮化合物叠氮化合物+-萘胺（或盐酸萘乙二胺） 偶氮化合物(红色) 生成的红色偶氮化合物在520nm波长比色，其光密度值与NO2-含量成正比。,二、实验材料,待测植物组织,三、方法步骤 1绘制标准曲线：,试管号,2. 取样,按下式计算酶活性：,3. NaNO2 含量测定,五、实验结果,NR活性（gNO2-/gFWh）,六、思考题,1.NR活性测定时取材前为什么要进行一段时间光合作用？2.测定酶促反应时为什么要在暗处保温？3.NR活性测定时加入磺胺、盐酸萘乙二胺和KNO3的作用各是什么？,
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