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文档简介

6/24/2018,肺炎相关微生物,病原生物学与免疫学教研室,6/24/2018,知识点要求,掌握肺炎球菌的生物学性状特点、致病性特点、微生 物学检查特点等。 熟悉流感嗜血杆菌、白喉棒状杆菌、百日咳鲍特菌的 致病性和防治原则。 熟悉嗜肺军团菌的致病性、生物学特性、免疫性、微 生物学检查法和防治原则。,生物学性状*形态与染色 矛头状,多成双排列(痰液、脓汁和肺部病变组织呈 单或短链); 有毒菌株产生荚膜,无鞭毛、不形成芽胞。,链球菌属肺炎链球菌(s.pneumoniae),肺炎链球菌,*培养特性:含有血液或血清的培养基;兼性厌氧; 血平板上形成细小、溶血环的菌落; 细菌产生“自溶酶”,导致菌体溶解,平 板上菌落中央下陷呈脐状,血液肉汤中 孵育,先混浊后澄清;胆汁或胆盐可激 活自溶酶,加速细菌自溶。*生化反应:分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖; 能分解菊糖;胆汁溶菌试验阳性。,肺炎链球菌 生物学性状,培养与生化反应,抗原结构与分型荚膜多糖抗原:存在于荚膜中,将肺炎链球菌分为84 个血清型。菌体抗原:C多糖为细胞壁内特异性多糖,各型共 有,可被血清中C反应蛋白沉淀;M蛋白 具型特异性,与其致病力无关。抵抗力:对多数理化因素敏感,但有荚膜菌株对干燥 抵抗力较强。,肺炎链球菌 生物学性状,致病性 *致病物质荚膜:主要毒力因子;S-R变异后,毒力降低或消失。肺炎链球菌溶血素O:与细胞膜上的胆固醇结合,导 致细胞膜穿孔,可溶解羊、兔、马和人红细胞; 能激活补体,引起发热、炎症及组织损伤。LTA:与黏附肺上皮细胞和血管内皮细胞有关。神经氨酸酶:分解N-乙酰神经氨酸, 与在鼻咽部和 支气管黏膜上的定植、繁殖和扩散有关。,链球菌属 肺炎链球菌, *所致疾病主要引起大叶性肺炎,其次是支气管肺炎;可继发胸 膜炎、脓胸、中耳炎、乳突炎、副鼻窦炎、脑膜炎、 败血症等。在正常人群的口腔、鼻咽部寄生,一般不致病。机体 免疫力低下,尤其是呼吸道病毒感染的婴幼儿、老年 人及体质弱者易引发肺部感染。免疫性:感染后可获得牢固的型特异性免疫,同型菌 的再感染少见;体液免疫为主。,链球菌属 肺炎链球菌,微生物学检查法采取痰液、脓汁、血液或脑脊液标本;标本直接涂片染色后镜检,发现典型染色和形态结构 的细菌时,可作初步诊断;血液和脑脊液标本先在血液肉汤中增菌,后再接种血 平板。,链球菌属 肺炎链球菌,*与甲型溶血性链球菌鉴别试验胆汁溶菌试验:菌液中加入胆汁后,肺炎球菌菌体自溶,使培养液变清亮。,肺炎链球菌 微生物学检查法,Optochin试验:将待检菌涂布于血琼脂平板表面; 取浸泡过optochin的滤纸片置于平板上共同培养,观 察抑菌环的大小;肺炎球菌抑菌环直径常14mm,抑制叶酸合成, 甲型溶血性链球菌抑菌环14mm,耐药。,肺炎链球菌 微生物学检查法,荚膜肿胀(quellung)试验:将菌液中加入等量型特 异诊断血清,染色后镜检;肺炎球菌遇到同型免疫血 清后,则荚膜显著增大,菌体无变化。动物毒力试验:接种小鼠后,该菌死亡(24h内), 而甲链一般不死亡。,肺炎链球菌 微生物学检查法,多价荚膜多糖菌苗特异性预防有较好的效果;青霉素G治疗,耐药者可选万古霉素等。,肺炎链球菌 防治原则,流感嗜血杆菌 H. influenzae,流感嗜血杆菌是一类革兰阴性小杆菌,多形态、无鞭毛、无芽胞。它是于1892年由费佛博士在流行性感冒的瘟疫中发现,俗称流感杆菌。流感嗜血杆菌最初被误认为是流行性感冒的病因,但直至1933年,当发现流行性感冒的病毒性病原。,一、生物学性状,1.形态结构: 小杆菌或球杆菌、多形性、有毒株血平板上形成荚膜,上呼吸道正常菌群中无荚膜。,一、生物学性状,1.培养特性: 巧克力色培养基,需要 X,V 两种因子 X血红蛋白中的血红素 V血液中的辅酶I、II 菌落微小、无色、透明、露珠状卫星现象: 与金葡菌(可合成V因子)同时培养,离金葡菌近的菌落较大,远者较小。,一、生物学性状,3.生化反应与抗原结构 根据荚膜抗原分为a-f 6个血清型,b型致病力最强,引起儿童感染最常见的菌。4.抵抗力 较弱、对热和干燥敏感。,二、致病性与免疫性,上呼吸道正常菌群、冬季带菌率高、发病多、小儿每年300万严重病例、死亡40-70万。发达国家以脑膜炎多见,发展中国家多为急性呼吸道感染,每年200-300万例肺炎。 体液免疫为主。,二、致病性与免疫性,1.致病物质:荚膜主要毒力因子,抗吞噬菌毛粘附,定植IgA蛋白酶水解sIgA,二、致病性与免疫性,1.原发感染(外源性): 荚膜b型菌株引起急性化脓性感染。 脑膜炎、鼻咽炎、咽喉炎、会厌炎、化脓性关节炎、心包炎、严重可有菌血症,小儿多见。,二、致病性与免疫性,2.继发感染(内源性):继发于流感、麻疹、百日咳、结核病,临床表现为:慢支、鼻窦炎、中耳炎,成人多见。,三、微生物学检查,1.直接涂片、染色镜检2.分离培养:巧克力色培养基,卫星现象、荚膜肿胀实验3.抗原检测:b型荚膜多糖抗原4.PCR,鉴定依据,1. 革兰阴性、小杆菌、多形性2. 巧克力色培养基,卫星现象、荚膜肿胀实验3. X、V因子需求实验,四、防治原则,1. b型流感嗜血杆菌多糖疫苗,有效率93%2. 治疗:广谱抗生素或磺胺类药物,克雷伯氏杆菌,肺炎克雷白杆菌是呼吸道感染最常见的致病菌之一。在痰标本所得革兰阴性杆菌中占第二位,仅次于铜绿假单胞菌。 医院内交叉感染常导致细菌在咽部寄殖,继引起支气管炎或肺炎。长期住院、应用抗菌药物等引起的急性肺炎与肺炎链球菌肺炎相似。,克雷伯氏杆菌,克雷伯菌对一般的抗生素有一定的耐药性。克雷白杆菌属(Klebsiella)存在于正常人的肠道和呼吸道,亦存在于水和谷物中。 肺炎克雷白杆菌肺炎可表现为慢性病程,也可由急性延续成慢性,呈肺脓肿、支气管扩张与肺纤维化的临床表现。 败血症、化脓性脑膜炎、尿路感染等等。,6/24/2018,白喉棒状杆菌(C.diphtheriae),白喉(Diphtheria )是一种急性呼吸道传染病,特征:患者咽喉部出现灰白色的假膜,6/24/2018,一、生物学性状,1. *白喉棒状杆菌的形态学特征 细长杆菌,粗细不一,一端或两端膨大呈棒状,排列不规则,呈栅栏状、V字形或L形。,奈瑟染色,革兰染色,6/24/2018,异染颗粒 成分: 核糖核酸 + 多磷酸盐 作用: 储存养料、鉴定价值,Albert染色,一、生物学性状,6/24/2018,2.培养特性,吕氏血清培养基 含凝固的血清,生长迅速,灰白色小菌落,异染颗粒明显。 亚碲酸钾血平板 黑色菌落。(亚碲酸盐碲被还原,显黑色),在亚碲酸钾血琼脂平板上的白喉棒状杆菌菌落(1824 h),6/24/2018,根据对亚碲酸钾的还原能力、菌落形态及生化反应可将白喉棒状杆菌分为3种类型:重型(gravis)、轻型(mitis)和中间型(intermedius)。,重型菌落不溶血、不规则、有条纹,2.培养特性,6/24/2018,3.变异 白喉棒状杆菌形态、菌落和毒性均可发生变异。 *无毒株 携带噬菌体后成为溶原性细菌(产生外毒素),6/24/2018,4.抵抗力 抗寒冷和干燥对湿热抵抗力弱对青霉素、氯霉素、红霉素敏感对磺胺不敏感,6/24/2018,二、致病性与免疫性,1. 致病物质:白喉毒素(diphtherotoxin)索状因子(cord factor)K抗原(K antigen),6/24/2018,2. 致病机制1) *白喉外毒素:只有携带棒状杆菌噬菌体的溶原性白喉杆菌才能产生外毒素外毒素结构: B亚单位:有结合和转位功能 A亚单位:其上有1个催化区 作用靶位:心肌和神经细胞,6/24/2018,延伸因子-2(EF-2) 灭活 蛋白质作用特点:多种细胞,特别心 肌、神经细胞均有毒素受体肿瘤细胞对此毒素特别敏感,A亚单位,作用机制,6/24/2018,3.*所致疾病 白喉急性呼吸道传染病传染源:患者、恢复期带菌者、健康带菌者传播途径:飞沫或污染(多在秋冬季),6/24/2018,临床表现 1)细菌与毒素共同作用引起局部症状: 炎症,坏死,纤维蛋白渗出,假膜导致窒息2)毒素入血引起全身中毒症状: 外周神经炎:膈肌麻痹呼吸困难声带麻痹声音嘶哑软颌麻痹吞咽困难 心肌炎,6/24/2018,4. 免疫性1)人群易感性 普遍易感;1-5岁儿童;成人也有可能。,6/24/2018,2)免疫特点 抗毒素免疫; 感染后机体可获得牢固的免疫力; 机体还可通过其它方式获得免疫力: 6个月以下婴儿- 母亲 成人- 隐性感染、疫苗,6/24/2018,三、微生物学检查法,标本:假膜边缘取材 涂片镜检 : 标本片 镜下特点革兰染色 菌体颜色奈瑟染色 典型 菌体排列Albert染色 异染颗粒,6/24/2018,分离培养 :,标本,接种,吕氏血清斜面,37,612 h,接 种,亚碲酸钾琼脂平板,培养,黑色菌落,1218 h,灰白色小菌落,(快速诊断),直接涂片镜检,6/24/2018,毒力鉴定,Elek毒力实验结果,含白喉抗毒素滤纸片,动物试验,Elek平板毒力实验,6/24/2018,四、 *防治原则,1.预防:人工主动免疫

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