标准解读
《LY/T 2305-2014 油茶品种微卫星标记鉴别技术规程》是一项国家标准，旨在通过微卫星标记技术对油茶品种进行准确鉴别。该标准详细规定了使用微卫星（Microsatellite, MS）或简单序列重复（Simple Sequence Repeats, SSRs）作为分子标记来区分不同油茶种质资源的方法。它适用于科研机构、高等院校以及相关企业，在进行油茶遗传多样性分析、亲缘关系鉴定等方面时提供技术支持。
标准中首先介绍了微卫星标记的基本概念及其在植物遗传学研究中的应用价值，并指出了选择合适的微卫星引物对于实现高效准确的品种鉴别的关键性。接着，文档列出了从样品采集到DNA提取、PCR扩增条件设定、电泳分离直至数据分析等一系列实验操作的具体步骤与要求。例如，在DNA提取过程中推荐采用CTAB法；PCR反应体系则需要根据所选引物及其实验室条件做适当调整等。
此外，《LY/T 2305-2014》还强调了质量控制的重要性，包括但不限于对照样本设置、重复实验验证结果的一致性检查等内容。为了保证数据的可靠性和可比性，标准建议在同一实验室内部建立统一的操作流程，并定期参加外部能力验证活动以持续改进技术水平。
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- 现行
- 正在执行有效
- 2014-08-21 颁布
- 2014-12-01 实施
©正版授权
文档简介
ICS6502020 B61 . . 中华人民共和国林业行业标准 LY/T23052014 油茶品种微卫星标记鉴别技术规程 TechnicalregulationsofCamelliavarietiesidentificationbySSR markers2014-08-21发布 2014-12-01实施 国 家 林 业 局 发 布 LY/T23052014 前 言 本标准按照 给出的规则起草 GB/T1.12009 。本标准由国家林业局提出 。本标准由全国林木种子标准化技术委员会 归口 (SAC/TC115) 。本标准负责起草单位 南京林业大学 : 。本标准参加起草单位 湖北省林业科学研究院 福建省林木种苗总站 : 、 。本标准主要起草人 尹佟明 戴晓港 陈赢男 李淑娴 史洁 张新叶 陈伟 : 、 、 、 、 、 、 。 LY/T23052014 油茶品种微卫星标记鉴别技术规程1 范围 本标准规定了以油茶 Camellia 幼嫩组织 叶片 芽等 为材料 利用微卫星标记法对油茶品 ( spp.) ( 、 ) , 种进行分子鉴定的术语 原理 主要仪器和设备 试剂与溶液 操作程序和鉴定 、 、 、 、 。 本标准适用于附录 中所列油茶品种的鉴别 A 。2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。21 . 微卫星 microsatellite 简单重复序列 simplesequencerepeats;SSR 也称基因组中由 个 个核苷酸组成的 串联重复序列 2 6 DNA 。22 . 基因型频率 genotypefrequency 群体中某一位点特定基因型个体数占全部个体数的比率 。3 原理 微卫星广泛分布于植物基因组的不同位置 微卫星位点具有高度的遗传多态性 微卫星标记具有高 , , 度的物种特异性和良好的扩增重现性 是用于植物品种遗传鉴别的首选标记 本标准采用高通量测序 , 。 获得了大量微卫星标记 通过实验检测 筛选了 对高度多态性的微卫星标记 用于油茶品种的遗传鉴 , , 10 , 别 在检验过程中 我们可采用真实品种的 模板做为标准品 从待检苗木中抽样做为待检样品 。 , DNA , 。 利用微卫星引物进行扩增时 若待检样品与标准品在任一引物扩增位点上基因型不同 则可判定待检样 , , 品与标准品不是同一品种 当不同引物扩增位点上基因型都相同时 可根据标准品种在不同位点上的 。 , 基因型频率乘积 计算出待检样品与标准品是同一品种的概率 , 。4 主要仪器和设备 41 扩增仪 . PCR 。42 离心机 . 12000r/min。43 微量可调移液器 . (2L、10L、100L、1000L)。44 数显式稳压稳流电泳仪 电压 电流 . EPS-300 ( 10V300V, 10mA400mA)。45 全自动数码凝胶图像分析系统 透射紫外波长 透射紫外面积 . ( :302nm, :20cm20cm)。46 微量 核 酸 蛋 白 检 测 仪
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