脱落细胞实验 ppt课件

正常脱落细胞形态特征正常脱落细胞形态特征 目的要求 : 1、掌握正常脱落细胞形态特征 2、熟悉 常用细胞学染色结果 3、 掌握 阅片方法和步骤1 一、常用细胞学染色结果 1、巴氏染色结果：完全角化的鳞状上皮细胞胞浆呈橘黄色；不完全角化的鳞状上皮细胞胞浆呈粉红色；角化前的鳞状上皮细胞胞浆呈蓝色；上皮细胞核呈紫蓝色，核仁呈红，红细胞染成粉红色。 2、 HE染色结果：上皮细胞核呈紫蓝色，核仁呈红色，胞浆染成淡红色，红细胞染成淡红色。2 二、阅片方法和步骤 （ 1）方法：从左至右、自上而下移动推进器 （ 2）观察各种细胞成分先用低倍镜观察细胞形态 再转到高倍镜观察细胞的形态结构 判断细胞的类型。3正常脱落细胞形态特征正常脱落细胞形态特征 （一）正常复层鳞状上皮细胞 1、底层鳞状上皮细胞：内、外底层鳞状上皮细胞。 2、中层鳞状上皮细胞 3、表层鳞状上皮细胞：角化前鳞状上皮细胞、不完全角化鳞状上皮细胞、完全角鳞状上皮细胞。4 内底层鳞状上皮细胞 :呈圆形 ,直径 1215 um,核圆形或椭圆形 ,直径 810 um,居中或偏位 ,核质比为1:0.51,核染色质呈细颗粒状 ,素木素染色呈紫蓝色 ,巴氏染色胞质成深蓝色或灰蓝色 .伊红染色为暗红色 .5 外底层鳞状上皮细胞 :呈圆形 ,直径 1530 um,细胞核与内底层细胞相似 , 核质比为1:12,核染色质呈细颗粒状 ,略疏松 ,素木素染色呈紫蓝色 ,巴氏染色胞质成淡蓝色或灰色 .伊红染色为暗红色 .6 中层鳞状上皮细胞 :细胞呈多边形、菱形、圆形，直径 3040 um,细胞核相对较小 , 核质比为 1:23,核染色质呈细颗粒状 ,素木素染色呈紫蓝色 ,巴氏染色胞质成淡蓝色或灰色 .伊红染色为淡红色 .7 表层角化前鳞状上皮细胞 :细胞呈多角形、直径 40406um,细胞核直径为 68um, 核质比为 1:35,核染色质呈细颗粒状 ,深染，素木素染色呈紫蓝色 ,巴氏染色胞质成淡蓝色或灰色 .伊红染色为淡红色8 表层不完全角化前鳞状上皮细胞 :细胞呈多角形、直径40406um,细胞核直径约 4um, 核质比为1:5,核染色质呈细颗粒状 ,深染，素木素染色呈紫蓝色 ,巴氏染色胞质呈淡红色 .伊红染色为淡红色9 表层完全角化前鳞状上皮细胞 :细胞呈多角形、直径 40406um,细胞核消失，巴氏染色胞质呈橘黄色 .伊红染色为淡红色10各层细胞伊红染色胞质为红色各层细胞伊红染色胞质为红色 .11 纤毛柱状上皮细胞： 细胞呈圆锥形，顶端宽平，表面有密集的纤毛，染淡红色，细胞底不尖细，细胞核居细胞中底部，直径812um，呈卵圆形顺细胞长轴排列，核染色 1质细颗粒分布均匀。12正常脱落细胞形态特征正常脱落细胞形态特征 （二）柱状上皮细胞形态特征 （ 1）纤毛柱状上皮细胞 （ 2）粘液柱状上皮细胞 （ 3）储备细胞13 粘液柱状上皮细胞： 细胞肥大，呈卵圆、或圆柱圆锥形，细胞核居细胞底部，细胞质丰富，含大量粘液着色透明，核染色质细颗粒分布均匀。14正常脱落的非上皮细胞正常脱落的非上皮细胞15 储备细胞：细胞体积小，呈圆形、卵圆形或多角形，染色质呈细颗粒状分布均匀，核边清楚，常见核仁。胞质量少，略嗜碱性。16脱落细胞标本制备技术脱落细胞标本制备技术 目的 :掌握脱落细胞标本采集和涂片制作、伊红染液染色方法 .17 脱落细胞标本采集和涂片制作 苏木素 -伊红（ H-E）染色 1、染色原理 :细胞核的核酸带有磷酸根，当染液PH大于 2时，核酸带负电荷，能结合染液中带正电荷的碱性染料氧化苏木素矾，而呈紫蓝色。由于天然苏木素的着色力弱，需经碘化钾氧化成氧化苏木素，才具有染色，氧化的苏木素红呈弱酸性，所带的阳离子电荷不强，与含铝金属的媒染剂结合后，可成为带强正电荷的氧化苏木素矾，能与 DNA磷酸复合物牢固地结合。染液中的伊红能与细胞质的蛋白质结合，而呈红色。18 2、实验标本采集：胸、腹水。 3、器材：玻片、离心机、吸管、染色缸、盖玻片（ 24x50mm） 4、试剂：伊红染液、苏木素染液、乙醇、稀碱、中性树胶、二甲苯。 （ 1）苏木素染液：苏木素染料 1.18g+碘酸钠 0.1g+硫酸铝 8.8g+乙二醇 125ml+蒸馏水365ml放入 1000ml烧杯混匀后，恒们温 30度搅拌约 2小时，停止后再加 10 ml冰醋酸混匀，放入棕色瓶，存放半个月后才使用效果更佳。19 （ 2）稀碱：于 100ml蒸馏水中加入 12饱和碳酸锂 （ 3）乙醇： 95%乙醇、 80%乙醇、 70%乙醇、 50%乙醇 （ 4）伊红染液： 0.5g伊红 +100ml蒸馏水20 5、涂片制备步骤： 1）将胸或腹水混匀后，取 10ml放入离心管离心 5分钟 . 2)吸去上清液，然后用吸管吸取沉淀物的灰白色细胞层 12滴（如沉淀物少可将其混匀后再取沉淀物涂片）滴在玻片一端，用滴管前端部分平放于标本后向玻片另一端推移或用玻片推片，使沉淀物分布均匀，厚薄适宜，一般涂片 34张。 3）涂片固定：涂片干燥时放入 95%乙醇固定液固定。 4）固定时间： 1530分钟。21 4、涂片的染色操作步骤： （ 1）核染色：将涂片从固定液中取出，用自来水洗净固定液后，再放入苏木素染液中 23分钟，取出用自来水洗净。 （ 2）核蓝化：将涂片放入稀碱约 30秒，取出用自来水洗净。 （ 3）胞质染色：将涂片放入伊红染液中 12分钟，取出放入 70%乙醇洗去多余的染料。 （ 5）脱水：将涂片依次放入 80%、 95%乙醇脱水30秒，再放如无水乙醇 1分钟。 （ 6）树胶封片后镜检。22 6、染色结果 :细胞核呈紫蓝色 ,细胞质呈淡玫瑰红色 ,红细胞呈淡红或朱红色 .23 涂片制备步骤 :取标本 10ml 离心 5min 吸去上清液 ,取沉淀物涂片 干燥 95%乙醇固定 1530nim染色步骤 :（ 1）核染色：将涂片从固定液中取出，用自来水洗 净固定液后，再放入苏木素染液中 23分钟，取出用自来水洗净。（ 2）核蓝化：将涂片放入稀碱约 30秒，取出用自来水洗净。（ 3）胞质染色：将涂片放入伊红染液中 12分钟，取出放入 70%乙醇洗去多余的染料。（ 4）脱水：将涂片依次放入 80%、 95%乙醇脱水30秒，再放如无水乙醇 1分钟。（ 5）树胶封片后镜检。24