去角膜上皮联合羊膜覆盖在角膜移植术应用的前瞻性研究

去角膜上皮联合羊膜覆盖在角膜移植术应用的前瞻性研究 Study on corneal transplantation removing epithelium and covering with amniotic membrane 曾健 王晓莉 代艳 Zeng jian Wang xioli Dai yan Mian yang central hospital, Sichuan province,目的,在利用羊膜移植技术减少无上皮状态对实验结果的干扰因素后，研究角膜上皮在角膜排斥反应诱发因素中的地位。Abstract Purpose To study the role of epithelium in causative factors of corneal rejection using amniotic membrane transplantation to avoid the influence of removing epithelium,理论基础：,角膜上皮层是全层角膜组织中抗原性最强部分，它在诱发排斥反应中的作用尚未完全阐明其在角移术后会被患者自身上皮组织完全替代,羊膜组织具有抗炎，促上皮生长的优点用于抵消去处角膜上皮后引发的一系列炎症反应等因素导致的排斥反应风险。,资料及方法,1.角膜供体： SD雌性大鼠； 2.对照组：Wister大鼠40只，常规角膜移植；实验组：Wister大鼠40只，常规角膜移植+植片去上皮（20%酒精20秒后刮除）+羊膜覆盖（上皮面向下）*所有大鼠均由四川大学实验动物中心提供,手术后局部抗生素眼膏治疗，睑裂缝合5天裂隙灯显微镜下观察排斥反应发生情况。记录排斥反应发生时间、程度,诊断标准：术后炎症反应期过后角膜植片水肿和浑浊再次加重，并伴明显植床新生血管。分级标准：根据植片浑浊水肿及新生血管面积计算，轻度 1/3；中度 1/3且 2/3；重度 2/3,手术后6月统计分析实验结果*麻醉死亡、观察过程中死亡及前房消失、感染等情况排除在统计资料外。,结果：,对照组36只在术后614天全部出现中到重度角膜排斥反应；实验组32只在术后730天出现轻到重度角膜排斥反应。经统计学处理，在排斥反应发生时间（ p = 0.032 ）和严重程度（ p 0.018 ）两组数据中均有统计学差异， 0.01 p 0.05。,讨论：,近年的研究证明，在角膜各层组织中，角膜上皮具有最强的抗原性，其中：HLA-1抗原和HLA-2抗原主要分布在上皮层和角膜基质层；MHC-抗原和次要组织相关性抗原主要分布于角膜上皮层。 有实验证明上皮层的强抗原性可以对抗由角膜内皮所诱发的免疫赦免(AVAID)，促进排斥的发生。,国外学者进行了去除角膜上皮的角膜移植实验，多次实验提示:单纯去除上皮和常规角膜移植的排斥反应发生并无差异，甚至更高。缺乏完整上皮可能诱导新生血管长入+非特异炎症促使排斥反应的发生。,羊膜移植是近年来发展和广泛推广的眼表重建技术之一；羊膜具有来源广泛，抗原性低，含有多种抑制炎症的生物活性因子，是最优良的上皮细胞生长基质结构。羊膜被广泛用于眼表手术达到抑制炎性反应，促角膜上皮生长和维持生理功能，减少新生血管长入并预防粘连。,本组实验结果提示角膜上皮仍然是角膜排斥反应早期诱发因素之一；去上皮联合羊膜覆盖在高危患者可能具有减少排斥反应的作用，为证明其可行性以新生血管化角膜为高危模型的动物实验正在进行中。,结论,在角膜移植手术后角膜上皮虽存留时间有限，但因其强烈的抗原性，仍然是角膜排斥反应早期诱发因素之一。去角膜上皮联合羊膜覆盖在角膜移植术尤其是在高危患者可能具有减少排斥反应的作用。,Conclusion,After corneal transplantation， epithelium is one of the causative factors of early corneal rejection because of strong antigenicity although it is a short time。Corneal transplantation covering with amniotic membrane and removing epi