药物鉴别试验授课幻灯1

2第二章 药物的鉴别试验3/45一、鉴别的定义 Identificationn 中国药典 2010年版定义n 鉴别项下规定的试验方法， 仅 反映该药品某些物理、化学或生物学等性质的 特征 ，不完全代表 对该药品化学结构的 确证 。n 注意：鉴别试验方法仅证实贮藏在有 标签容器中的药物是否为其所标示的药物 ，而非对未知物进行定性分析。4/45药品质量检验工作中的首项任务含量测定方法相同， 采用中性乙醇溶解供试品后，用 0.1mol/l的 NaOH进行滴定，酚酞为指示剂指示终点。5/45二、鉴别试验的项目n 性状（ Description)n 一般鉴别试验（ general identification test）n 专属鉴别试验（ specific identification test） 6/45（一）性状n 药物的性状（ description）反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、溶解度和物理常数等。1. 外观： 指药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。2. 溶解度： 药典采用 “极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶 ”来描述药品在不同溶剂中的溶解性能。7/45水杨酸 阿司匹林外观 白色细微的针状结晶或白色结晶性粉末；无臭或几乎无臭白色结晶或结晶性粉末；无臭或微带醋酸臭溶解度 在 乙醇或乙醚中易溶 ；在沸水中 溶解 ；在三氯甲烷中 略溶 ；在水中 微溶在 乙醇中易溶 ；在三氯甲烷或乙醚中 溶解 ；在水或无水乙醚中 微溶 ；在氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液中 溶解 ，但 同时分解8/45（一）性状3. 物理常数 : 不仅对药品具有鉴别意义，也反映了该药品的 纯杂程度。n 药典收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。水杨酸 阿司匹林熔点 158-161 135-138（ 1）熔点：固体 液体的温度9/45（一）性状（ 2）比旋度 :在一定波长与温度下，偏振光透过长1dm且每 1 ml中含有旋光性物质 1g的溶液时测得的旋光度称为比旋度。 是反映手性药物特性及其纯度 的主要指标，用于 鉴别药品、含量测定 。附录 VIE 旋光度测定法10/45n 已知比旋度，如何求算物质含量？n 药物分析实验指导 P170， 葡萄糖含量测定为比旋度； 为 旋光度；l为 光程 长 短（ dm）；c为 每 100ml中含有干燥品物 质 重量（ g）11/45（一）性状（ 3）吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。有两种表示方式： 摩尔吸收系数和百分吸收系数。 后者是中国药典收载的方法，它是指在一定波长下，溶液浓度为 1（ W/V) ，厚度为 l cm时的吸收度，用 表示，用于考查药品的质量，定量分析。12/45几种常见喹诺酮类药物的紫外吸收特征药 物 介 质 max (nm)诺 氟沙星 0.1 mol/L NaOH 273 1098司帕沙星 0.025 mol/L NaOH 291 691洛美沙星 0.1 mol/L HCl 287 975吡 哌 酸 0.1 mol/L HCl 275 1630氧氟沙星 0.1 mol/L HCl 226； 294 918甲磺酸培氟沙星 0.1 mol/L HCl 277 1001由吡啶酮酸并联苯环、吡啶环或嘧啶环等芳香环组成的化合物13/45(二 ) 一般鉴别试验 （ general identification test） n 依据某 一类药物 的化学结构或理化性质的特征，通过 化学反应 来鉴别药物的真伪。n 无机药物： 药物中的 阴离子和阳离子 的特殊反应；n 有机药物： 典型的 官能团 反应。n 一般鉴别试验 只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。 通常一般鉴别试验不适用于数种化学药物的混合物鉴别或在有干扰物质存在时鉴别。14/45一般鉴别试验项目n 丙二酰脲类：苯巴比妥n 芳香第一胺类：对乙酰氨基酚n 托烷生物碱类：硫酸阿托品n 有机酸盐：阿司匹林n 无机金属盐类：钠盐n 无机酸盐：氯化物n 有机氟化物类：氟康唑15/45水杨酸盐（ Salicylates）的鉴别试验方法 1：取水杨酸供试品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显 紫色 。原理 本品在中性或弱酸性条件下，和三氯化铁试液生成配位化合物。方法 2：取供试品溶液，加稀盐酸，即析出白色水杨酸沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液中溶解。16/45（三）专属鉴别试验 （ specific identification test）n 证实某一种药物的依据，它是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些 特有的灵敏的定性反应， 来鉴别药物的真伪。 n 注意与一般鉴别试验的区别 n 共性中找寻个性差异17/45n 加碳酸钠试液煮沸后放冷，加过量稀硫酸，析出 白色沉淀 ，并有 醋酸臭味+H2SO4CH3COOH18/45三、鉴别方法n 药物的鉴别方法要求专属性强，重现性好，灵敏度高，以及 操作简便、快速 等n 对于化学药物，常用鉴别方法有 化学法， 光谱法 ， 色谱法 和 生物学法 。n 对于中药材及其制剂等，还有显微鉴别法和特征图谱或指纹图谱。19/45（一）化学鉴别法n 原则：反应迅速、现象明显，具有明确的原理n 常用方法：呈色反应鉴别沉淀生成反应鉴别荧光反应鉴别气体生成反应鉴别使试剂褪色鉴别测生成物熔点20/451.呈色反应鉴别法：n 系指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易于观测的有色产物。在鉴别试验中最为常用的反应类型有：n （ 1） 三氯化铁呈色 反应：一般都含有酚羟基或水解后产生酚羟基；n （ 2） 异羟酸铁 反应：一般多为芳酸及其脂类、酰胺类；21/45n （ 3）茚三酮呈色反应：氨基酸及氨基糖苷；n （ 4）重氮化一偶合显色反应：一般都有芳伯氨基或能产生芳伯氨基；1.呈色反应鉴别法：22/452.沉淀生成反应鉴别法：n 系指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成不同颜色和具有特殊形状的沉淀。常用的沉淀反应有：n （ 1）与重金属离子的沉淀反应：在一定条件下，药物和重金属离子反应，生成不同形式的沉淀；n （ 2）与硫氰化铬胺（雷氏盐）的沉淀反应：这类药物多为生物碱及其盐和具有芳香环的有机碱及其盐；23/453.荧光反应鉴别法n 常用的荧光发射形式有以下类型：（ 1）药物本身 （ 2）药物溶液加硫酸使呈酸性后 （ 3）药物和溴反应后（ 4）药物和间苯二酚反应后在可见光下发射荧光；24/454.气体生成反应鉴别法n 胺类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物 ：经强碱处理后，加热，产生氨气；n 含硫的药物 ：可经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体；n 含碘有机药物 ：经直火加热，可生成紫色碘蒸气；n 含醋酸酯和乙酰胺类药物 ：经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。25/45例：葡萄糖的鉴别 呈色反应取本品约 0.2g，加水 5ml溶解后，缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀26/45（二）光谱鉴别法n 1. 红外光谱法n 专属性强、应用较广 （固体、液体、气体样品）n 主要用于 组分单一、结构明确的原料药，特别适合于 结构复杂、细微差别同类药物， 如磺胺类、甾体激素类和抗生素类药品。n 鉴别方法： 中国药典和 BP均采用标准图谱对照法 ； USP采用对照品法。27/4528/45n 试样制备方法压片法、糊法、膜法、溶液法n 应用光谱图对照时应注意的问题：（ 1）固体药物晶型（ 2）供试片制备条件（ 3） CO2和水汽等大气干扰（ 4）仪器间分辨率及操作条件的影响（ 5）多组分药物与多晶型现象（ 6） 制剂鉴别2.红外光谱法29/452. 紫外光谱法 n 光谱简单， 专属性差。n 常用的方法有：（ 1）测定最大吸收波长或同时测定最小吸收波长；（ 2）规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸收度；（ 3）规定吸收波长和吸收系数法；（ 4）规定吸收波长和吸收度比值法；（