第二章 药物的鉴别试验6

化学与制药工程学院 *药物分析第二章 药物的鉴别试验（ Indentification Test）本讲要求：1、掌握鉴别试验的目的，常用鉴别方法。2、熟悉鉴别实验的影响因素与注意事项。3、了解鉴别试验方法的验证。1化学与制药工程学院 *药物分析一、鉴别试验的定义与目的（一）定义 ：药物的鉴别试验根据药物的分子结构、理化性质，采用物理、化学或生物学方法来判别药物的真伪，是药物检验工作中的首要任务。（ 二）目的 ：药典所收载的药品项下的鉴别试验方法，均为用来证实贮藏在有标签的容器中的药物是否为其所标识的药物，而不是对未知物进行定性分析。这些方法虽有。一定的专属性，但不足以确证其结构，因此 不能赖以鉴别未知物 。第一节 概述2化学与制药工程学院 *药物分析二、鉴别项目（一）性状 ：药物性状反映了药物的物理性质，一般包括外观、臭、味、溶解度以及物理常数等。（ 二）一般鉴别试验 （ general identification test）：是以某一类药物的化学结构及其物理化学性质为依据，通过化学反应来鉴别药物的真伪，对 无机物 是据其组成的阴阳离子的特殊反应，并以药典附录 项下的一般鉴别试验为依据。 对 有机物 则大都采用典型的官能团反应。3化学与制药工程学院 *药物分析 一般鉴别试验仅供确认药物质量标准中 单一 的化学药物，如为数种化学药物的混合物或有干扰物质存在时，除另有规定的外，应不适用。 通过一般鉴别试验 只能证实是某一类药物而不能证实是哪一种药物 ，举例见教材 p72。 要想确证被鉴别的物质到底是哪一种药物，必须在一般鉴别的基础上进行专属鉴别试验。4化学与制药工程学院 *药物分析（三）专属鉴别试验 （ specific identification test）：是 证实某一种药物的依据 ，它是根据 每一种 药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应来鉴别药物的真伪。5化学与制药工程学院 *药物分析（ 四）一般鉴别试验与专属鉴别试验的比较综上所述， 一般鉴别试验 是以 某类别 药物的共同化学结构为依据，根据其共同的物理化学性质进行药物真伪的鉴别，以区别不同类别的药物。而 专属鉴别试验 则是在一般鉴别试验的基础上，利用 各种药物 的化学结构差异来鉴别药物，以区别同类药物或具有相同化学结构部分的各个药物单体，达到最终确证药物的目的。6化学与制药工程学院 *药物分析第二节 药物鉴别方法（一）化学鉴别法：1、干法 ：将供试品加适当试剂在规定的温度条件下（一般是高温）进行试验，观测此时所发生的特异现象。a、焰色反应： Na+、 K+方法：取铂丝，用盐酸润湿后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，使火焰显出特殊的颜色。利用元素所具有的特殊焰色，可鉴别它们是哪一类盐类药物。b、加热使供试品分解：在适当的温度条件下，加热使供试品分解，生成有特殊气味的气体。7化学与制药工程学院 *药物分析2、湿法：系指供试品和试剂在适当的溶剂中，于一定条件下进行反应，发生易于观测的化学变化，如颜色、沉淀、气体、荧光等。8化学与制药工程学院 *药物分析（二）光谱鉴别法 ：1、紫外光谱鉴别法 （ UV或 Vis 紫外或可见）a、利用最大吸收波长（ max1、 max2、 max3）b、利用在一定浓度 C供 下的最大吸收波长及它的吸收度 A；c、利用在 C供 下两个波长的吸收度的比值 A2/A2，更严格。9化学与制药工程学院 *药物分析常用的 方法 有：（ 1）标准品对照法；（ 2）规定吸收波长法；（ 3）规定吸收波长和相应的吸收度法；（ 4）规定吸收波长和吸收系数法；（ 5）规定吸收波长和吸收度比值法。10化学与制药工程学院 *药物分析2、红外光谱鉴别法（ IR）a、与标准谱图对照法；b、与参比标准品对照法。如果峰位、峰形、相对强度都一致时，即为同一种药物11化学与制药工程学院 *药物分析红外光谱与物质结构的关系：分子中每个基团一般都有相应的吸收峰。药物分子的组成、结构、官能团不同时，其红外光谱也不同。药物的红外光谱能反映药物分子的结构特点，具有专属性强、准确度高的特点，是验证已知药物的有效方法。12化学与制药工程学院 *药物分析指纹区 1300 400cm-1密，高度敏感特征区 4000 1300cm-1疏，易辨认 13化学与制药工程学院 *药物分析（三）色谱鉴别法：利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱行为（ Rf值或保留时间）进行鉴别试验。 常用方法：1、薄层色谱鉴别法（ TLC）：一般采用对照品（或标准品）比较法，要求供试品斑点的 Rf值应与对照品斑点一致。2、高效液相色谱鉴别法（ HPLC）：要求：供试品和对照品色谱峰的保留时间一致 ,即 tr供 =tr对3、气相色谱鉴别法（ GC）：要求同液相色谱。14化学与制药工程学院 *药物分析（四）显微鉴别法显微鉴别法主要用于中药及其制剂的鉴别，通常采用显微镜对药材的（饮片）切片、粉末、解离组织或表面制片，以及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。（五）生物学法利用药效学和分子生物学等有关技术来鉴定药物品质的一种方法，主要用于抗生素、生化药物以及中药的鉴别，分为生物效应鉴别法和基因鉴别法两类。（六）指纹图谱与特征图谱鉴别法15化学与制药工程学院 *药物分析一、鉴别试验条件：（一）溶液的浓度；（二）溶液的温度；（三）溶液的酸碱度；（四）干扰成分的存在；（五）试验时间。第三节 鉴别试验的条件及方法验证16化学与制药工程学院 *药物分析二、鉴别试验的灵敏度鉴别试验是以灵敏度的专属反应为依据，在合适的条件下进行试验判定工作的，如果选择的鉴别反应的灵敏度高，则产生可被观测的结果所需要的药物愈少。17化学与制药工程学院 *药物分析（一）反应的灵敏度和空白试验1、 反应的灵敏度 （ sensitivity）：在一定的条件下，能在尽可能稀的溶液中观测出尽可能少量的供试品，反应对这一要求所能满足的程度，即称为 反应的灵敏度 。（ 1）最低检出量 （ minimum detectable quantity）：又称为检出限量，以 m表示，就是利用某一反应，在一定条件下，能够观测出的供试品的最小量，单位： g 。（ 2）最低检出浓度 （ minimum detectable concentration ）：又称界限浓度，以 1:G（或 1:V）表示，其中 G（ V）表示含有 1g重某供试品的溶液的克（ mL）数。即应用某一反应，在一定条件下能够观测出供试品的最低浓度。 18化学与制药工程学院 *药物分析2、 空白试验 （ blank test）在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供试品外，其他试剂同样加入进行试验。在选用灵敏度很高的反应时必须采用高纯度的试剂和非常洁净的器皿，才能保证试验结果的可靠性。为了消除试剂和器皿可能带来的影响，应同时进行空白试验进行对照。19化学与制药工程学院 *药物分析（ 二）提高鉴别反应灵敏度的方法1、加入与水互不相溶的溶剂：在鉴别试验中，如生成物具有颜色且颜色比较浅时，可采用此法，浓集有色物质，使有机溶剂中颜色较深，易于观测。2、改进观察方法 ：将目视观测溶液颜色，改为可见分光光度法；将观测生成物沉淀改为比浊度法。20化学与制药工程学院