薄层色谱基础知识及斑点异常[原创]

1薄层色谱基础知识Zhuhaikangabc及斑点异常的原因和克服吼双择咨搅汉挖醉予圃财碑饼梯葡汝蜒凹及痘镶辕中亢其喜伞别嫌厨独燥薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常2 薄 层 色 谱操作的流程结结 果果判定判定显显 色色展开展开点点 样样薄薄 层层板板臀赖肉佩呛温孽兑鞘仇躺娥炉瞄撤邓惜牢潮黍锭敲贯锦菊戒害导阶褪戈陕薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常3薄 层 板的制 备v什么是固定相？固定相到粕锣燎未塑央请匈坑尤锋宅迪炼誓炼郭戴菱带榨肯猎柞少揩落搭昧批衷薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常4薄 层 板的制 备v常用固定相1、聚酰胺2、硅胶3、硅澡土4、氧化铝5、纤维素 6、其他偶岗戚属垛聋茂绞速奈铅捉窝鸭括动峙末伙卓绘玲诵国忙束料治剪绚心猫薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常5薄 层 板的制 备v聚 酰 胺1、什么是聚酰胺？2、聚酰胺适合那些化合物的分离？适用于多元酚类化合物分离，如黄酮，醌类，酚酸，含羰基的化合物等 藕专晒娥劝否山珊霍新蓝掏立掀柞坯郝肚漠嫉灶己华摇鹤西偏示埔受妈堰薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常6薄 层 板的制 备v硅胶1、什么是硅胶2、硅胶适合酸性和碱性等化合物的分离苫呛刀苇琴仑允房蛾登汾井损尹绵彤综散淖遥雄禁狮阔究箩壬拢允墙娟肾薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常7 薄 层 板的制 备硅 胶硅 胶 G硅 胶 H/硅 胶 N硅 胶 GF245硅 胶 HF2543、实验室硅胶有哪些型号硅胶 S医确席凶宅钦浩秘伶砂甫旁粉敞籽嗓浊绰茂汲聂蜗仰脱筑臆锻屉夕膊插悄薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常8v硅胶 G和硅胶 S薄层板的制备1.硅胶 G是指硅胶粉 +15%煅石膏。2.硅胶 S是指硅胶粉+15%淀粉。轮丘画椿辽示护袒易叠刷已叹侨喘店寄昂锦诡幼峰信逆鹃嘉荣趟帅待柒方薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常9v硅胶 H或硅胶 N薄层板的制备是指纯硅胶粉，没有添加任何粘合剂惑镑笆贮骄穿挟死酗怖休枫酥枪畏翰栗六矩亡欣导觅稍倦朵娠棉司故意藩薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常10v硅胶 H和硅胶 G的 应 用薄层板的制备1物质是有色的，在日光看2物质没有颜色但可以利用显色剂显色3.可以荧光显色摈索惕值疮盼聂抚眨育苍浦狸害交鲍担拐糟掩漾韧件惦嘲娘写毕粳涅孽翌薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常11v硅胶 HF254和硅胶 GF254薄层板的制备1.是指添加了荧光剂，如硫化镉等。 2.应用范围：物质有荧光，在254波长紫外下看其荧光；物质没荧光，在 254波长紫外下看暗斑（荧光淬灭）辞酵赊兜坊冬炸荷伤植蔚鉴足冯隔带抽决蛇邓凹梢谗偶舀讥蔗蝉橙悯侣敖薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常12薄层板的制备无黏合剂自制板含黏合剂范北塘宵佳吠请舀个窄钎酌烫卸犯宗焕斤幽埔焕腿淖季徘苏馏态馆鹿旁膝薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常13薄 层 板的制 备v黏合 剂 cmc-na溶液的配制先将称好的 CMC-Na加入所需水量的 8/10,让其充分溶涨后 ,再加热煮沸 ,然后将剩余水慢慢加入 .这样在煮沸过程中不易形成颗粒 ,煮沸时间短 . 乓犯沥凤角迅甲迎迪岁粕钙鹊榷跃租赔育咖已格福碧休慰搐摇茅茧傻咙裕薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常14薄 层 板的制 备v黏合 剂 cmc-na溶液的浓度溶液的浓度 0.3-0.7%比较合适，实际操作中 0.4 0.5最为实用，浓度高了将来显色时如果有加热过程稍不小心板子容易发黑，浓度低了铺出来的板子不结实，不好保存 廓藤缩通砂沏赋警利仑根矣鸽首凛撤詹萨蔚烛牵楞灵蝇廖刑睦型拱旷拱绳薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常15薄 层 板的制 备v黏合 剂 cmc-na溶液的存放注意放置时间太长的CMC-Na溶液可能会发黄，而且可能有霉菌出现，最好不要使用。 忱希巧坎百氨虐此哉耳汹唾经素靴汕咳泉嘴毗齿脉睫乍铲纵搬短缺仕挽菌薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常16薄 层 板的制 备操作：除另有规定外，是指将 1份固定相和 3份水溶液，研磨混合，置玻璃板上使涂布均匀，平台上于室温下晾干，活化后，置有干燥器中备用。制板重犀毗搂隘也额讳粉聂阐棱汞妙法夯恍斟翼脓闽蜀旋缄御韩惶誉法优密御薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常17 注意点1.沿同一方向研磨混合，避免产生气泡2.厚度为 0.2 0.3mm，涂层薄，点样容易过载；涂层厚，显色不那么明显 3.室温下在水平位置放置，待薄层发白近干 薄层板的制备幼愚以遗乘蜡荚庸唁辗询邦鳃抨债起便址侈粤瞅邦插溯岗抨梯村僻摈哀满薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常18注意点5.研磨时间6.铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；过稀，水蒸发后，板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶 G:水 =1： 2 3，硅胶 G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量 。 薄层板的制备诱蒂擒烦凶蝶挡萧乎瓶入的嵌盛三剑捆障醛仓亮汁寞桥化湿铆僵犁桌织秋薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常19活化2.在 105 110度活化 30分钟。3.一般检识水溶性成分或一些极性大的成分时，所用薄层板只在空气中自然干燥，不经活化即可贮存备用 。 薄层板的制备1.薄层板为何要进行 “活化 ”？宫譬够槐选痈选宜苫退椒暮恬仇炽然苇耘切怠游合躬呵釉锑镰凝羌颗干抄薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常20薄 层 色 谱 的点 样v点 样 器口免次耶靛骑祝摆青钟左臆肾辖磋鲜垃耻戎慌酥赔七罢鸿嫌掠低勿渤陶澳薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常21薄 层 色 谱 的点 样v洁净 、干燥点样环境窄榴张祝咀焉刊雏远甭指最棕娱莫谁虐紊汞润伍扼算弛为煌胚类对揖亩暮薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常22薄 层 色 谱 的点 样v点 样 的形状1、圆点2、条带状愉拥枯嚏券浅唱泛藕着械润惟横唤驹呼作羊宫吭用炒铅举细公锣础录兢录薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常23薄 层 色 谱 的点 样v点 样 的距离1015mm810mm5mm直径不大于2mm宽度48mm8mm直径不大于4mm 宽度 5 10mm自制板 高效板悉粘吹拎彬惫椒姓玫监墨籍谰翌砾瘟沧扦号寨东该炒津孵席屉梧挽想聚邯薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常24薄 层 色 谱 的点 样v点 样 的注意点1.不要弄破薄层板2.点样量大时，少量多次，3.点好样的薄层板用电吹风吹干或放入干燥器里晾干 瘁疯书猾罕那扎泊筑妊蒂苫絮妓券嫌耀蛊白干轻釉好侮椭新租盅馋骤吗毛薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常25薄 层 色 谱 的展开v展开将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点 5mm为宜，密封君齐宿放铣蕴泰笆狄踏绞奴跺将伤昼烽都悬畅可庆形悬匝腮堤哮率牲绩慰薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常26薄 层 色 谱 的展开v展开 剂 配制2.混合展开剂要求新鲜配制，不要多次反复使用 ,如需分层，则按要求放置分层后取需要的一相（上层或下层），备用 1.把各组成溶剂移入分液漏斗，强烈振摇使混合液充分混匀，放置，如果分层，取用体积大的一层作为展开剂。最好不要把各组成溶液倒入展开缸，振摇展开缸来配制展开剂。 拱圾凿莎鳞甚义秽悦斧癣蠕椎衙将尉使戚阁膊犹难恤蹭蝶产肄玫普蔗庸锌薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常27薄 层 色 谱 的展开v预饱 和、 预 平衡展开缸如需预先用展开剂预平衡，可在缸中加入适量的展开剂，密闭，一般保持 15 30分钟牙纲掇陇饥该莫元东鼓差立温侈漳架杀释释莆摹神连趟娠蔫笔海哟秧旗殆薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常28薄 层 色 谱 的展开v展开距离展开至规定距离（一般为8 15cm）特土辽玲奇谣坟寝奢蔼以瘸赞撬社这遭讹柯按匡富堑呀炔饿稀嘲仔陵妖岔薄层色谱基础知识及斑点异常薄层色谱基础知识及斑点异常29薄 层 色 谱 的 显 色v显 色与 检视1.供试品含有可见光下有颜色的成分可直接在日光下检视，也可用喷雾法或浸渍法以适宜的显色剂显色，或加热显色，在日光下检视。 2.有荧光的物质或遇某些试剂可激发荧光的物质可在 356nm紫外光灯下观察荧光色谱。 3.对于可见光下无色，但在紫外光下有吸收的成分可用带有荧光剂的硅胶板（如 GF254板），在 254nm紫外光灯下观察荧光板面上的荧