埃博拉出血热采样及标本运送ppt课件

u 潜伏期 2-21天 ,一般为 5-12天。u 传播途径：接触传播、 气溶胶传播 。u 临床表现：突然发病，各器官出血，肌肉疼痛， DIC（弥散性血管内凝血）等u 90%的死亡患者在发病后 12天内死亡 (7-14天 )。u 病死率高， 可达 50%-90%。 尚无特效药和疫苗。u 埃博拉出血热是最严重的出血热型别 扎伊尔型 （ Ebola-Zare）： 毒力强 ， 人感染后病死率高 。 苏丹型 （ Ebola-Sudan）： 科特迪瓦 （ Ebola-Cte dIvoire） ： 对黑猩猩有致死性 , 对人的毒力较弱。 雷斯顿型 （ Ebola-Reston）： 在非人灵长类中有致死性 , 人感染不发病。抵抗力埃博拉 病毒在室温下稳定， 60 1小时大部分病毒被灭活 , 对紫外线、 射线、甲醛、次氯酸、酚类等消毒剂和脂溶剂均敏感 。u 1、 流行病学：来自疫区，或 3周内有疫区旅行史，或与患者、感染动物接触。u 2、临床表现：急性起病，发热伴极度乏力、牙龈出血、鼻出血、黏膜出血、瘀点和紫斑、血便等及其他症状（头痛、肌痛、咽痛、恶心、呕吐 )。u 3、实验室检测：（ 1）病毒抗原阳性（ 2）血清特异性 IgM抗体阳性（ 3）恢复期血清 IgG比急性期有 4倍升高（ 4）核酸阳性（ 5）分离到埃博拉病毒u 疑似病例： 1+2u 确诊病例：疑似病例 +3中任一检测阳性u 1、所有样本的采集或处理应遵守 医院感染管理规范 和 病原微生物实验室生物安全管理条例 等相关生物安全规定，在标准预防的基础上 采用飞采用飞沫和接触隔离沫和接触隔离 的预防措施。u 2、样本采集时，应严格按照 BSL-3级级 实验室规定做好个人防护。应穿戴医用防护服、可遮盖口鼻的医用防护口罩 (N95)、双层乳胶手套、护目镜、头部面部保护罩、专用橡胶靴等。u 3、采血场所应在相对独立的场所，应符合 负压负压 要求。如果不具备上述条件，可用相邻的房间提供足够的安全空间，备有除了病人常规护理的材料外应具备手套、防护服和防护面具等，同时要装备有洗手的设施和装有消毒液的桶。u 4、采样人员应由经过 生物安全防护培训生物安全防护培训 的人员执行，采血时应 2人人 在场。1、标本采集时间u 初次送检：目前检测方法中主要是核酸检测，埃博拉出血热患者发病后 3天内的血标本，病毒核酸阳性的可能性很小，因此 建议采集发病建议采集发病 72小时后的血标本小时后的血标本 送检。u 再次送检：如果留观 /疑似病例发病 72小时后血标本实验室检测阴性，但临床表现比较典型的患者，可在 初次检测初次检测24-48小时后小时后 再次采集血标本送检。u 解除隔离治疗送检：确诊病例解除隔离治疗前采集血标本进行复检。2、标本采集方法 . 用 分离胶无菌真空促凝管分离胶无菌真空促凝管 采集静脉血，每管 3mL，标记后 4 保存 。并 填写标本采集登记表（ 附表 1） . 标本采集数量留观病例、疑似病例留观病例、疑似病例 采集 4管，其中 2管送省疾控中心进行埃博拉病毒检测， 2管保存于本单位，待排除埃博拉病毒感染后用于其他病原体的筛查；确诊病例确诊病例 采集恢复期血标本，送国家疾控中心病毒病所进行检测。3、标本保存方法 . 未分离血清的全血标本应 4 保存，并尽快分离血清； . 血清标本长期保存应置于 -70 以下 ； . 标本保存不超过 1周可置 -20 。 4、标本信息收集（填写埃博拉出血热 流行病学个案调查表 ）u 病例一般信息：姓名、性别、年龄、国籍u 来自疫区国名、入境时间，发病日期，发病前 21天的疫区居住史，旅行史、类似病例接触史等。u 主要临床症状：发热、严重乏力、头痛、肌痛、呕吐、腹泻、出血表现等u 标本详细信息：采样时间、种类、标本量等。u 送样信息：负责送检的联系人姓名、联系电话、送检时间等第一层2mL,可离心有垫圈第二层15mL,封口膜封口易标记1、包装方式：A类包装（ UN2814要求）按照三重包装系统包装：第一层包装（可密封样本袋、 50mL离心管）；第二层安全壳容器（防水、防漏）；第三层外层运输包装。样本袋放入防水防漏的第二层安全壳容器中，为降低破碎或泄漏的风险，用吸水纸等填充物固定标本袋。安全壳容器和外包装放冰袋。2、运输方式：全血采用冷藏运输，血清可采用冷冻运输不要打开采集管或分装样本。专人专车。u 凡涉及埃博拉病毒的分离、培养和动物实验，需在生物安全 4级（ BSL-4/ABSL-4）实验室内进行。u 涉及未经培养有感染性材料的实验活动，需在 BSL-3实验室内进行。u 血清学检测应在 BSL-3实验室内，且标本需先 60 1小时灭活后，再进行后续实验操作。u 核酸检测时 ,需在 BSL-3实验室内加入核酸提取裂解液 ,完成病毒RNA提取，并对装有病毒 RNA样品管的外表面进行彻底消毒后，可在 BSL-3实验室以外进行扩增检测。1、病原学检测： 核酸检测：主要检测方法。发病后 3天内，血标本中埃博拉病毒核酸检出率低，检测阴性不能排除埃博拉病毒感染。发病后 3 10天血标本病毒核酸检出率高，检测阴性可排除埃博拉病毒感染。 病毒抗原检测：用酶联免疫法检测埃博拉病毒核蛋白抗原。病毒抗原检测阳性可确诊。发病后 3天内，血标本中埃博拉病毒抗原检出率低，检测阴性不能排除埃博拉病毒感染，发病后 3 10天血标本病毒抗原检出率高。2.血清学检测： 血清特异性 IgM抗体：采用捕获法 ELISA方法检测。IgM抗体阳性可确诊。 血清特异性 IgG抗体：目前采用间接法 ELISA检测 IgG抗体。单份血清埃博拉病毒 IgG抗体阳性提示曾感染埃博拉病毒，双份血清埃博拉病毒 IgG抗体阳转或恢复期滴度较急性期 4倍或者以上增高者可确诊。u 实验室检测埃博拉病毒阳性血标本，应根据相关生物安全规定保存在 -70 以下，实行 “双人双锁 ”管理和取样 “审批 ”制度。u 实验室检测埃博拉病毒阴性血标本，应所采集疑似患者或密切接触者完全排除埃博拉病毒感染后，转入其他血清库保存或销毁。u 所有血清销毁时，均应在冰箱内取出后，在生物安全柜内，待其自然融化后，置于含有效消毒剂（ 0.5%有效氯）内浸泡，然后高压灭活。u 所有销毁样本均应在相应数据库清单内标明，销毁的时间和操作人，阴性样本