蛋白质组学研究进展ppt课件

蛋白质组学研究进展蛋白质组学研究进展 1 一、蛋白质组学的产生与发展 2 人类人类 基因组计划（基因组计划（ HGP） 1986年，达尔贝科提出 1990年，美国国会批准 “HGP”， 9月，中国 获准加入，负责测定人类基因组序列的 1% 2000年 6月 26日，草图绘制成功 2003年 4月 14日，人类基因组序列图绘制成 功 背背 景景 3 改变花色的转基因矮牵牛花 4 转入荧光素酶蛋白基因 的发荧光烟草 5 蓝色玫瑰一直是人类美丽的梦想 基因工程正在将它变为现实 6 但到 2000年 6月 26日人类基因组 草图基本绘制完成，发现人类仅有 4 万个基因，并且发现人和果蝇的基 因区别不大，而水稻的基因比人的 基因多 2倍（中国科学家在 Nature 4月号发表）。 7 8 9 蛋白质组学蛋白质组学 1994年，首次提出蛋白质组概念 1996年，澳大利亚建立了第 1个蛋白质组研究中 心（ APAF） 2001年 4月，美国成立了国际人类蛋白质组研究 组织（ HUPO） 20世纪 90年代中期 蛋白质组学 以细胞内全部蛋白质的存在及其活动方式 为研究对象 10 各国政府支持，国际著名研究和商业机构 加盟： 1996年澳大利亚建立了世界上第一个蛋白 质组研究中心（ Australia Proteome Analysis Facility， APAF） 美国国立癌症研究院（ NCI）投资 1 000万 美元建立肺、直肠、乳腺、卵巢肿瘤的蛋 白质组数据库。 11 NCI和 FDA共同投资数百万美元建 立癌症不同阶段的蛋白质组数据 库。 英国建立三个蛋白质组研究中心 对已完成或即将完成全基因组测 序的生物体进行蛋白质组研究。 12 Celera公司投资上亿美元独自启动了全 面鉴定和分类汇总人类组织、细胞和体 液中的蛋白质及其异构体，构建新一代 的蛋白质表达数据库的工作。 13 1997年召开了第一次国际 “蛋白质组学 ” 会议 1998年在美国旧金山召开了第二届国际 蛋白质组学会议 1999年 1月在英国伦敦举行了应用蛋白质 组会议 14 我国也于 1998年启动了蛋白质组学研 究，在中科院上海生物化学研究所举 办了两次全国性的蛋白质组学研讨会 2003成立了中国人类蛋白质组组织 （ CHHUPO），并分别于 2003年 9月、 2004年 8月以及 2005年 8月召开了中国 蛋白质组学首届、第二届及第三届学术 大会， 2004年 10月在中国北京召开了 第三届国际蛋白质组学会议。 15 n 科技部已将疾病蛋白质组研究列入 我国 “973”计划项目和 “863”计划项 目 ； 国家自然科学基金委员会也将 “蛋 白质组研究 ”列为重点项目。 n我国在鼻咽癌、白血病、肝癌和肺 癌蛋白质组研究方面取得了较大的进 展 。 16 2003年 12月 15日， 国际人类蛋白质组组织负责人在 北京宣布，国际人类蛋白质组计划正 式启动， “人类肝脏蛋白质组计划 ”和 “人类血浆蛋白质组计划 ”两大项目首 先开始执行，其中 “人类肝脏蛋白质 组计划 ”由中国科学家领导执行，这 是我国科学家第一次领导执行重大国 际科技协作计划。 17 首次由我国科学家领导的国际重大科 研合作项目 人类肝脏蛋白质组计 划，被宣告取得阶段性新进展。几年 来围绕人类 肝脏 蛋白质组的表达谱、 修饰谱及其相互作用的连锁图等九大 科研任务，我国科学家已经成功测定 出 6788个高可信度的中国 成人 肝脏蛋 白质，系统构建了国际上第一张人类 器官蛋白质组 “蓝图 ”；发现了包含 1000余个 “蛋白质 -蛋白质 ”相互作用的 网络图；建立了 2000余株蛋白质抗体 。 18 二、蛋白质组学的相关概念 19 蛋白质组是澳大利亚学者 Williams和 Wilkins于 1994年首先提出，源于蛋白 质（ protein）与基因组（ genome）两 个词的杂合 ,意指 proteins expressed by a genome，即 “ 一个细胞或一个组 织基因组所表达的全部蛋白质 ” 。 （一）、蛋白质组学的概念 20 对应于基因组的所有蛋白质构成的整 体，不是局限于一个或几个蛋白质。 同一基因组在不同细胞、不同组织中 的表达情况各不相同 。 在空间和时间上动态变化着的整体。 蛋白质组是： 21 蛋白质组学蛋白质组学 (proteomics) 指应用各种技术手段来研究蛋白质组的一门 新兴科学，其目的是从整体的角度分析细胞 内动态变化的蛋白质组成成份、表达水平与 修饰状态，了解蛋白质之间的相互作用与联 系，揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律。 22 主要研究内容主要研究内容 了解某种特定的细胞、组 织或器官制造的蛋白质种类； 明确各种蛋白质分子是如 何形成类似于电路的网络的； 描绘蛋白质的精确三维结构，揭 示其结构上的关键部位，如与药物结 合并且决定其活性的部位。 23 Expression proteomics (表达蛋白组学 ) The study of global changes in protein expression Proteomics Cell-map proteomics （细胞图谱蛋白组学） The systematic study of protein- protein interactions through the isolation of protein complexes 24 三、蛋白质组学研究方法概述 25 蛋白质组研究更为复杂和困难： 蛋白质数目大大超过基因数目。 蛋白质随时间和空间而变化。 26 发展高通量、高灵敏度、高准 确性的研究技术平台是现在乃至相 当一段时间内蛋白质组学研究中的 主要任务。 当前主要任务 27 一、蛋白质组表达模式的一、蛋白质组表达模式的 研究方法研究方法 28 研究蛋白质组的组成成分 支撑技术主要有双向凝胶电泳、以 质谱为代表的蛋白质鉴定技术及生 物信息学分析。 蛋白质组表达模式（蛋白质组表达模式（ expression profile）：）： 29 （一）蛋白质组研究中的样品制备（一）蛋白质组研究中的样品制备 通常可采用细胞或组织中的全蛋白 质组分进行蛋白质组分析。 也可以进行样品预分级，即将细胞 或组织中的全体蛋白质分成不同部 分，分别进行研究。 30 样品预分级的主要方法样品预分级的主要方法 蛋白质溶解性：可溶性蛋白、非溶性 蛋白等 蛋白质定位：膜蛋白、核蛋白等 蛋白质细胞器定位：线粒体、高尔基 体、叶绿体等 样品预分级主要作用在于提 高低丰度蛋白质的上样量和检测 灵敏度 。 31 组织水平上的蛋白质组样品制备组织水平上的蛋白质组样品制备 临床样本都是由多种细胞或组织混 合而成，如肿瘤中癌变上皮细胞总是与 血管、间质细胞等混杂一起。 激光捕获显微切割 (laser capture microdissection， LCM)可直接在显微镜 下从组织切片中精确分离特定的细胞或细 胞群。 32 33 LCM具有其独特的优点和特性。 a)快速简单 、有效减少交叉污染。 b)样品的切割与分离 由激光一步完成，并可以保持被分离的样品 的完整性。 c)结合免疫荧光能够基于组织细 胞的表型和功能特征进行分离样品组分。 d) 对制样的要求灵活多样，使用范围较广。 通过 LCM对组织切片进行切割与分离可以分 离收集从形态上（普通染色），表型或功能 上（荧光染色）可以辨认均一性的细胞群体 ，从而克服了组织不均一的特点，有效降低 假阳性，提高了数据的准确性和可靠性，这 在肿瘤生物学研究中具有广泛应用。 34 （二）蛋白质组研究中的样品分离（二）蛋白质组研究中的样品分离 双向凝胶电泳 two-dimensional electrophoresis， 2-DE)：利用蛋 白质的等电点和分子量，结合凝胶 化学特性，分离各种蛋白质的方法 。 35 原原 理理 第一向在高压电场下对蛋白质进 行等电聚焦 (IEF), 再在第一向 垂直方向上进行第二向 SDS-聚 丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 。 36 特特 点点 可分离 10 100 kD分子量的蛋白质 高灵敏度和高分辨率 便于计算机进行图像分析处理 与质谱分析匹配 37 第一向第一向 IEF电泳电泳 1975年首先由 OFarrell等创立。 Bjellgvist等发展并完善了固相 pH梯 度等电聚焦技术， Grg等成功地将 之应用于双向电泳 。 38 固相固相 pH梯度等电聚焦的优点梯度等电聚焦的优点 克服了载体两性电解质阴极漂移等缺点 。 稳定的可以随意精确设定的 pH梯度。 尤其可在较窄的 pH范围内进行第二 轮分析，大大提高了分辨率及重复性 。 39 样品上样样品上样 选择合适的选择合适的 pH跨度跨度 胶条 pH范围 Broad Range pH 3-10 Narrow Range pH 3-6, pH 5-8, pH 7-10, and pH 4-7 Micro Range pH 3.9-5.1, pH 4.7-5.9, pH 5.5-6.7,and pH 6.3-8.3 胶条长度 7, 11, 17 cm ,18 cm and 24 cm 40 第二向第二向 SDS-PAGE电泳电泳 垂直板电泳 水平超薄胶电泳 41 42 2-DE技术的缺点技术的缺点 极酸、极碱性蛋白质，疏水性蛋白质， 极大蛋白质、极小蛋白质以及低丰度蛋 白质用此种技术难于有效分离。 胶内酶解过程费时、费力，难于与质谱 联用实现自动化。 43 新型非凝胶技术新型非凝胶技术 液相色谱法 liquid chromatography， LC 毛细管电泳 capillary electrophoresis， CE 44 液质联用技术（ LC-MS/MS） 蛋白质混合物直接通过液相色谱分离以 代替 2-DE的分离，然后进入 MS系统获得肽 段分子量，再通过串联 MS技术，得到部分 序列信息，最后通过计算机联网查询、鉴定 蛋白质。 45 根据蛋白质带电性及疏水性不同，用 MS分离多肽复合物。离 子交换色谱是通过溶质在离子交换色谱固定相上具有不同的保 留能力而实现样品分离的色谱技术，而反相液相色谱是基于溶 质疏水性的差异而实现分离的色谱技术。通过这两种色谱模式 的联用，可以实现对复杂生物样品的二维分离。 多维 色谱技术（ LC/LC-MS/MS） 多维蛋白质鉴定技术 (multidimensional protein identification technology) 将不同分离模式的色谱柱以 串联方式合并于同一根色谱柱中进行，在同一根色谱柱的前半 部分装填强阳离子色谱填料，后部分装填反相液相色谱填料， 该方法可对样品量较少的蛋白质进行快速分析。 46 （三）蛋白质组研究中的样品分析鉴定（三）蛋白质组研究中的样品分析鉴定 传统方法： Edman降解法 氨基酸组成分析 47 蛋白质序列分析鉴定蛋白质蛋白质序列分析鉴定蛋白质 一些传统蛋白质分析技术如蛋白质序列分析技术（ Edman 降解法 , 1950），仍然可用于当前蛋白质组研究 。 其缺点是难 于实现高通量，同时对低丰度蛋白质的鉴定上其灵敏度难于达 到要求 。 A-R-G-F-L-E-K-L (得到部分序列 ) 491蛋白质微量序列仪 印渍转移 酶解 提取肽混合物 毛细管 HPLC仪 收集肽于 PVDF 膜 PVDF膜 通过 Edman降解对双向凝胶上的蛋白质点进行鉴定的实验路线 双向电泳分离 48 新型蛋白质鉴定技术 质谱（ MS）法 基本原理 ：样品分子离子化后， 根据离子间质荷比（ m/z）的差 异来分离并确定样品的分子量。 49 MAIDI-TOF ESI-MS/MS 酶解 脱 盐 浓 缩 飞行时间质谱仪 电喷雾串联质谱仪毛细管 HPLC仪 点样板 序列标签 (PST) 数据库搜索 双向电泳分离 蛋白质鉴定 通过质谱对双向凝胶上的蛋白质点进行鉴定的实验路线 肽 肽质指纹 （ PMF） 质谱技术鉴定蛋白质路线图 50 基质辅助激光解吸 /电离飞行时间质谱（ matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry， MALDI-TOF MS ） 电喷雾质谱（ electrospray ionization mass spectrometry， ESI-MS） 主要质谱类型 51 鉴定和注释蛋白质的路线 通过肽质谱指纹图（ peptide mass fingerprinting， PMF）和数据库搜寻匹 配 通过测出样品中部分肽段二级质谱信息或 氨基酸序列标签和数据库搜寻匹配 52 仪仪 器器 MALDI-TOF质谱仪：灵敏度高（可达 fmol），分析速度快，谱图简单易于 解析以及受缓冲液、盐份的干扰小 电喷雾质谱仪：灵敏度高 ,能与液相色 谱、毛细管电泳等高效分离手段联用 53 组织切片或印片原位质谱分析技术 两级飞行时间串联质谱（ MALDI- TOF/TOF） 傅里叶转换回旋共振质谱（ FTMS） 表面增强激光解吸 /电离飞行时间质 谱（ SELDI-TOF-MS） 联合技术精确鉴定蛋白质 54 （四）蛋白质组学研究的生物信息学（四）蛋白质组学研究的生物信息学 生物信息学是蛋白质组学研究 的一个不可缺少的部分。 55 1、对双向电泳结果进行图像分析，识 别差异表达的蛋白质斑点；构建双向 凝胶电泳图谱。 2、单独或综合运用质谱分析数据、氨 基酸测序结果等查询数据库以鉴定蛋 白质。 3、构建蛋白质组数据库。 应 用 56 蛋白质组数据库是蛋白质组 研究水平的标志和基础 瑞士的 SWISS-PROT拥有目前世界上最大、种类最 多的蛋白质组数据库。（ http:/www.expasy.ch/） 目前应用最普遍的数据库是 NRDB 和 dbEST数据库 。 NRDB是由 NCBI创建的，是 NCBI的 BLAST搜索程 序的默认蛋白质序列数据库。该数据库由 GenPept （由 GenBank 编码序列自动翻译而成数据库）、 PDB序列 数据库、 SWISS-PROT数据库、 SPupdate（每周更新的 SWISS-PROT数据库）、 PIR（蛋白质信息资源 ）和 GenPeptUpdate(每天更 新的 GenPept)数据库复合而成。因此该数据库是一 个较完全的，包含最新信息的数据库 。 57 dbEST数据库数据库 由美国国家生物技术信息中心（ NCBI）和 欧洲生物信息学研究所（ EBI）共同编辑， 包括许多生物体的表达序列标签（ EST） 肽序列标签 (PST)或部分序列信 息最适合查寻 58 概念： 把一个基因组表达的全部 蛋白质或一个复杂体系中所有的 蛋白质进行精确的定量和鉴定。 （五）定量蛋白质组学研究（五）定量蛋白质组学研究 59 低丰度蛋白质检测困难 蛋白质表达量差异很小，如在 50%以下 时，精确定量成为瓶颈 蛋白质表达的瞬时变化 蛋白质定量的难点蛋白质定量的难点 60 1基于双向凝胶电泳的定量蛋白基于双向凝胶电泳的定量蛋白 质组研究策略质组研究策略 双向凝胶电泳 (2-DE) 荧光差异显示双向电泳（ F-2D-DIGE） 结合了多重荧光分析的方法，在同一块胶上共同分离多个分别 由不同荧光标记的样品，并第一次引入了内标的概念。两种样 品中的蛋白质采用不同的荧光标记后混合，进行 2-DE，用来检 测蛋白质在两种样品中表达情况，极大地提高了结果的准确性 、可靠性和可重复性。在 DIGE技术中，每个蛋白点都有它自己 的内标，并且软件可全自动根据每个蛋白点的内标对其表达量 进行校准，保证所检测到的蛋白丰度变化是真实的。 61 2基于生物质谱的定量蛋白基于生物质谱的定量蛋白 质组研究策略质组研究策略 原理： 对于具有相同离子化能力的蛋 白质或多肽，可以通过比较质谱峰的 强度（或峰面积）得到待比较蛋白质 的相对量。 62 同位素亲和标签技术（同位素亲和标签技术（ ICAT） 63 二、蛋白质组功能模式的二、蛋白质组功能模式的 研究方法研究方法 64 揭示蛋白质组成员间的相互作用、相互协 调的关系，并深入了解蛋白质的结构与功 能的相互关系，以及基因结构与蛋白质结 构功能的关系。 主要研究目标 65 （一）蛋白质翻译后修饰的研究（一）蛋白质翻译后修饰的研究 翻译后修饰 糖基化 乙酰化 甲基化 羧基化 二硫键磷酸化 66 修饰肽的检测的高灵敏度方法 蛋白质翻译后修饰的定量分析 合适的修饰状态下处理和电离条件 测定工作量巨大 研究面临的困难： 67 （二）蛋白质相互作用研究技术（二）蛋白质相互作用研究技术 生命的基本过程是不同功能蛋白质在时空 上有序和协同作用（蛋白质复合体、多蛋 白质网络） 68 1989年 Field 和 Song等人在酵母细胞中 设计的分析蛋白质相互作用的方法。 以真核细胞转录激活因子的结构和活性 特点为基础的。 1酵母双杂交系统 （ yeast two-hybrid system） 69 转录激活因子转录激活因子 GAL4的特点的特点 DNA结合结构域 (DNA binding domain, 简称为 DB):N端含 NLS和与酵母 GAL1基因 启动子上游激活序列 (UASG)结合的结构 域 转录激活结构域 (activation domain, 简称为 AD):C端含 GAL1转录激活结构域 70 功能上相互独立又互相依赖，只有通 过某种方式结合在一起才具有完整的 转录因子活性 71 72 主要特点和优势主要特点和优势 使蛋白质表现型和基因型相联系 筛选 cDNA文库 真实反应体内蛋白质间相互作用情况 不需分离靶蛋白 敏感性高 73 缺 点 1.假阳性结果 2.假阴性结果 3.限于核内表达的蛋白质的相互作用 4.不能检测依靠翻译后修饰的相互作用 74 2基于质谱的蛋白质相互作用基于质谱的蛋白质相互作用 研究方法研究方法 靶蛋白制备 蛋白质复合体的纯化 蛋白质 复合体 的质谱鉴定 基本步骤： 75 （ 1）亲和层析耦联质谱技术）亲和层析耦联质谱技术 基本原理： 将某种蛋白质以共价键固定在基质（ 如琼脂糖）上，含相互作用蛋白质的细胞裂解液 过柱，先用低盐溶液洗脱下未结合的蛋白质，然 后用高盐溶液或 SDS溶液洗脱结合在柱子上的 蛋白质，最后用多维液相色谱耦联质谱技术（ MDLC-ESI-MS/MS）鉴定靶蛋白的结合蛋白。 76 先决条件先决条件 得到足够多的保持生物活性的重组 靶蛋白作为诱饵（ bait） 获得足够量、纯度高的与诱饵相互 作用的蛋白质 77 （ 2）免疫共沉淀耦联质谱技术）免疫共沉淀耦联质谱技术 原理： 以细胞内源性靶蛋白为诱饵 ， 用 抗靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行免疫共 沉淀 （ immuno-precipitation， IP） 纯 化靶蛋白免疫复合物 ， 凝胶电泳分离后 ， 质谱鉴定靶蛋白的结合蛋白。 78 研究鼻咽癌细胞系中的研究鼻咽癌细胞系中的 p53 相互作用蛋白相互作用蛋白 抗 p53抗体与 HNE1和 HNE2总蛋白进行 免疫共沉淀 SDS-PAGE分离免疫沉淀复合物 切取 p53结合蛋白条带，酶解后进行电喷 雾串联质谱（ LC-ESI-MS/MS）分析， 得到相应的肽序列标签 搜索数据库 79 特特 点点 生理条件下蛋白质之间的相互作用 所有蛋白质与靶蛋白的相互作用 可检测依赖于修饰的蛋白质相互作用 80 局局 限限 性性 A. 灵敏性不高 B. 假阳性 C. 受免疫球蛋白的干扰较大 81 基本原理： 将高度密集排列的蛋白分 子作为探针点阵固定在固相支持物上 ，当与待测蛋白样品反应时，可捕获 样品中的靶蛋白，再经检测系统对靶 蛋白进行定性和定量分析。 3、蛋白质芯片 （ protein chips， protein array） 技术 82 四、蛋白质组学在肿瘤研究中的四、蛋白质组学在肿瘤研究中的 应用应用 83 （一） 研究肿瘤发病机理、寻找用于肿瘤诊断和治疗 的生物标志物 运用蛋白质组研究技术，通过比较肿瘤组织（细胞）和正 常组织（细胞）或肿瘤发展不同阶段组织中，蛋白质在表达数 量、表达水平和修饰状态上的差异，可以发现与癌变相关的特 异性蛋白质， 这些肿瘤相关的特异蛋白质不仅可为认识和研究这些肿瘤相关的特异蛋白质不仅可为认识和研究 肿瘤发病机理提供线索，而且可作为肿瘤诊断和治疗的生物标肿瘤发病机理提供线索，而且可作为肿瘤诊断和治疗的生物标 志物。志物。 如 Celis等对膀胱鳞状细胞癌 (SCC)和移形细胞癌（ TCC ）的蛋白质组进行了比较研究，在膀胱癌病人的尿液中找到 4 种与膀胱癌相关的蛋白质：其中银屑素是 SCC的生物标志，可 用于 SCC的早期诊断、鉴别诊断和病情监控。 84 。 （二） 发现肿瘤药物作用的靶点 药物多是通过特异地作用于体内的靶蛋白质而重新调整病人 的生理功能达到治疗目的。新的药物靶蛋白在药学研究中有重要 作用。基因组研究提示，控制人类疾病的潜在药物靶蛋白，粗略 估计大约有 5000-10000个。然而在过去的 100年发现的药物靶蛋 白只有 500-1000个。 因此后基因组时代的一个紧迫任务是发现 这些药物靶蛋白，为开发治疗人类疾病的新药提供依据。 用蛋白质组研究技术，通过比较肿瘤组织（细胞）和正常组 织（细胞）或肿瘤发展不同阶段组织中，蛋白质在表达数量、表 达水平和修饰状态上的差异，可以发现肿瘤特异性蛋白质， 这些这些 蛋白质不仅可作为肿瘤诊断的标志物，而且可作为抗肿瘤药物作蛋白质不仅可作为肿瘤诊断的标志物，而且可作为抗肿瘤药物作 用靶点，用于治疗肿瘤药物的设计和开发用靶点，用于治疗肿瘤药物的设计和开发 。 85 （三） 肿瘤药物作用机理研究 目前，一些抗肿瘤药物在体内的作用机理并不清楚。应用蛋 白质组研究技术，分析药物处理过的细胞 /组织或体液表达的蛋 白质组， 比较治疗前后的蛋白质组的差异、鉴定其中发现相应变比较治疗前后的蛋白质组的差异、鉴定其中发现相应变 化的蛋白质，可揭示药物的作用机理。化的蛋白质，可揭示药物的作用机理。 如比较抗肝癌化合物 OGT 719和 5-FU处理过的肿瘤细胞株的 蛋白质表达谱，发现二者处理过的细胞蛋白质表达谱发生了类似 的变化，这提示 OGT 719与已知的 5-FU的作用机制类似， 其中 核糖体 RNA结合蛋白（嘧啶合成过程中的一种重要蛋白）变化 显著，可能是二者作用的靶点。 86 （四）抗 肿瘤新药筛选 目前，组合化学技术的成熟可以源源不断地大量提供用于药 物开发的新化合物。但是，由于筛选技术的相对落后，使得先导 化合物的发现和优化，仍是制约新药研发的最大瓶颈。而应用蛋 白质组研究技术进行新药筛选具有明显优势。具体地说，通过分 析比较化合物处理前后模型细胞或组织的蛋白质表达谱， 不仅可不仅可 快速获得该化合物的有效性和毒性方面有价值信息，而且可将化快速获得该化合物的有效性和毒性方面有价值信息，而且可将化 合物作用的靶蛋白构建成分子药理学模型、用于大量新化合物的合物作用的靶蛋白构建成分子药理学模型、用于大量新化合物的 筛选和评价其药物效能。筛选和评价其药物效能。 87 如一种新的抗癌药 oltipraze，可用于治疗和预防黄曲霉毒素 诱导的肝癌。通过蛋白质组的研究发现它可调控肝脏中许多蛋 白质的表达，其中黄曲霉毒素 B1醛还原酶（ AFAR）的含量增 加了 7倍，该酶与黄曲霉毒素的解毒有关。因此， AFAR作为蛋 白质标记物（分子药理学模型）已用于筛选和评价 oltipraze其 它类似物的抗肿瘤效果。 88 （五） 抗肿瘤药物毒副作用分析与临床前安全性评价 通过比较药物损伤的组织器官和