GB 15977-1995 血吸虫病诊断标准及处理原则

中华人民共和国国家标准血吸虫病诊断标准及处理原则5977一1995of 华人民共和国传染病防治法及中华人民共和国传染病防治法实施办法制定本标准。1主题内容与适用范围本标准规定了各期血吸虫病的诊断标准，治疗方法及防治原则。本标准适用于疫区专业机构开展血吸虫病防治工作和全国各级各类医疗卫生机构对血吸虫病患者的诊治。2诊断原则根据疫水接触史，结合发热、腹泻、肝肿大、肝纤维化门脉高压等主要症状、体征及寄生虫学检查，血清免疫学检查，血象检查结果等，予以诊断。发热、肝脏肿大与周围血液嗜酸粒细胞增多为主要特征，伴有肝区压痛、脾肿大、咳嗽、腹胀及腹泻等。见附录A),凝、酶标、胶乳等血清免疫反应阳性(环卵沉淀试验环沉率)3%及(或)间接血凝滴度)1:10,酶标反应阳性，胶乳凝集试验滴度)1:10)(详见附录B)1. 2,确诊病例:疑似病例加3. 1. 3,临床诊断:疑似病例加3. 无症状，或间有腹痛、腹泻或脓血便多数伴有以左叶为主的肝脏肿大，少数伴脾脏肿大。直肠活检无治疗史者发现血吸虫卵，有治疗史者发现活卵或近期变性虫卵(详见附录A卵沉淀试验环沉率- 3%及(或)间接血凝试验滴度1，10,酶标反应阳性，胶乳凝集试验滴度- 1，10;未治或治后1年以上的病人血清血吸虫循环抗原阳性(详见附录B),疑似病例:1与12. 2,确诊病例:疑似病例加3. 长期或反复的疫水接触史，或有明确的血吸虫病治疗史。征，或有侏儒或结肠肉芽肿表现。直肠活检无治疗史者发现血吸虫卵，有治疗史者发现活卵或近期变性虫卵(详见附录A)准参见3. 2. 4疑似病例:似病例加3. 3. 4 急性血吸虫病一般用毗喳酮总剂量120mg/童140mg/6天疗法。1至2日内分3行政村为单位，凡血吸虫感染率高于20 0进行病原或血清学检查，对5岁以上、60岁以下当年有疫水接触史而无禁忌症的人群进行普治。普治用毗喳酮40mg/下的流行区，宜进行粪检或血清免疫反应检查，2. 0mg/、船、牧民及其他频繁接触疫水的人群，不作检查，按上述剂量每年治疗1次，或2次。、重度流行区的家畜(黄牛、水牛为主)每年化疗一次，宜与人群化疗同步进行。家畜化疗黄渔中牛可用兽用毗哇酮30mg/牛25mg/30mg/流行区，人群化疗一般可在人冬感染季节结束以后进行。般宜处理易感地带的钉螺孽生地，以化学灭螺药氯硝柳胺杀螺为主，每年1以必要的、尽可能结合生产的改变钉螺擎生环境的灭螺方法。结合生产、水利改变环境为主，辅以药物杀灭，别是江、湖、洲、滩地区，必须做好血吸虫病防护工作。防护方法根据当地情况酌定。包括用杀尾坳剂杀灭水中尾坳、改变耕作方式，或进行防护性灭螺，或用徐肤防拗剂，以避免或减少人群接触疫水，杀灭或排除水中尾坳，或阻止尾坳入侵。如已接触疫水可进行早期治疗。少或避免人畜粪便污染;挖并或兴建农村自来水;或用加热或药物杀死尾坳后再使用，以减少或防止尾拗入侵。合农村卫生建设，制定管理和处理粪便的具体措施，以防止粪便污染水源，杀死粪便中血吸虫卵。5977一1995附录充件)1粪便检查尼龙袋集卵孵化法操作步骤;取受检者粪便约30g，先丝筛置于下口夹有铁夹的尼龙绢(260目八n)袋水调浆，使粪液直接滤入尼龙绢袋中，然后移去铜丝筛，继续淋水冲洗袋内粪渣，并用竹筷在袋外轻轻刮动助滤，直到滤出液变清取下夹于袋底下口的铁夹，将袋内沉渣淋洗入三角烧瓶。若需加做沉淀镜检，可在烧瓶中吸取沉渣3成涂片，涂面应占载玻片面积的2/3。涂片的厚度以能透过涂片尚能看清印刷字体为标准将涂片置于低倍显微镜下检查。全片镜检时问不宜少于2份粪便至少检查两张涂片，镜检时应仔细识别血吸虫卵和其他蠕虫卵。然后将盛有粪便沉渣的三角烧瓶加水至离瓶口1入孵化室(箱)或在室温下孵化。一定时间后取出烧瓶，观察毛蝴一般需观察2察时间随温度高低而不同。温度高时孵出较早;温度低时毛坳孵出迟。气温超过301次观察可在。性者可在4次均为阴性者，判作阴性结果;气温在26时，可在孵化后4性者8及12温在20时，则可在82利用自然气温孵化，一昼夜之间的气温悬殊，可在操作后的次晨再观察1次;气温在200般室温在20利用自然气温孵化，无须加温。观察毛拗时，应将烧瓶向着光源，并衬以黑纸板。要注意毛蝴与水中原生动物的区别。如有怀疑，可用毛细吸管吸出，在显微镜下鉴别。2改良加藤厚涂片法2. 软性塑料刮片在尼龙绢片上轻刮，粪便细渣即由绢片微孔中露至绢片表面。2将定量板(3 4 2. 5中圆孔的孔径为3. 5平后，孔中可容粪量41. 1在载玻片中部，以刮片从尼龙绢片上刮取细粪渣填入定量板的中央孔中，填满刮平。样即留在载玻片上。2,30 30盖在粪便上，用橡皮塞或另一块载玻片覆于玻璃纸上轻压，使粪便均匀展开至玻璃纸边缘。，相对湿度75%下过夜，镜检。对薄壳虫卵，如钩虫卵等的透明时间以0. 5长不能超过2l. 镜检每片平均检出的虫卵数乘以24即为11G)3集卵透明法操作步骤:将粪便充分搅匀后，取5水调成粪液。把粪液通过60目八深20口直径8袋260目八n，内袋120目八n)。然后移去铜丝筛，继续淋水冲洗袋内粪渣，并把袋轻轻振荡，使加速过滤，直至滤出液变清为止。用药勺刮取外袋内全部沉渣，分作涂片。在沉渣涂片上，覆盖经甘油一孔雀绿溶液浸溃2425c.)，以牙签压匀跪室温中过夜，次日镜检。以全部沉渣获得的虫卵数相加，再除以5得出每克粪便中虫卵数()5977一1995法可用于医院内对疑似病人的诊断，不宜用于普查。脏及其他组织活检或手术标本病理检查发现血吸虫卵的都可确诊。附录充件)处理超声干燥虫卵粉。以重感染兔血清(接种尾勤15002000条，42天的免血清)测试环沉率30%为合格。用熔化的石蜡在洁净的载玻片两端分别划两条相距20蜡线之间加受检者血清2滴(0. 05然后用针头挑取干卵约100入血清中，混匀，覆以24 24周用石蜡密封后，置于370480)显微镜观察反应结果，疑似者应在高倍(40O X)显微镜下加以识别。为简化操作亦可选用预制干卵需加入血清，置湿盒中37保温经24去血清，加少量盐水显微镜下观察反应。3反应标准:典型的阳性反应为泡状、指状或细长卷曲的带状沉淀物，边缘较整齐，有明显的折光。其中泡状沉淀物须大于1即m(约相当于两个红细胞大小)，才能定为阳性。阳性反应的标本片，应观察10。个成熟虫卵，计算其沉淀率;阴性者必须看完全片。阴性反应:虫卵周围光滑，无沉淀物。或有小于性反应的强度和环沉率:a.“+”虫卵周围出现泡状、指状沉淀物的面积小于虫卵面积的1/4;细长卷曲的带状沉淀物小于虫卵的长径。b.“+”虫卵周围出现泡状、指状沉淀物的面积大于虫卵面积的1/4;细长卷曲的带状沉淀物相当于或超过虫卵的长径。.“+”虫卵周围出现泡状、指状沉淀物的面积大于虫卵面积的1/2;细长卷曲的带状沉淀物相当于或超过虫卵长径的2倍。环沉率(%)00:.”，”(1. 处理超声干燥虫卵粉。以25mg/试环沉率30%为合格。国产打有双国孔的双面胶纸(厚度约150孔直径16距8先将其一面的覆盖纸揭去，然后粘贴于载玻片上，胶纸条须与玻片紧密粘牢，不能留有空隙。以盖玻片(22 22，置37察481. 2. 3反应标准:同1. 3,5977一19952. 用葡聚糖凝胶步纯化的可溶性血吸虫卵抗原致敏的绵羊红细胞。二醛醛化及1:5000裸酸溶液辑化后再行致敏。致敏后的红细胞以含10%蔗糖及1%液，分装安瓶低压冻干封存。每批致敏红细胞作效价测定，滴度达11280支以11. 2. 2用微量滴管加4滴(0. 025)生理盐水于三孔空白，第四孔加1滴1, 2. 3第一孔内储存待检血清，并从中吸取血清1滴加入第二孔内，充分混匀后，吸出两滴于第三孔和第四孔各加1滴在第四孔混匀后弃去1滴使第三孔、第四孔血清稀释度分别为1:5,1; 10,2. 4用定量吸管吸取致敏红细胞悬液，于第三孔和第四孔内各加1滴，温下挣沂1察结果。3.，阴性反应为红细胞全部沉入孔底，肉眼见一边缘光滑，致密的小圆点。+斗一+红细胞形成薄层凝集，边缘呈现不规则的皱褶。+十+红细胞形成薄层凝集，充满整个孔底。+红细胞形成薄层凝集，面积较+者小。+红细胞大部分沉集于孔底，形成一圆点，周围有少量凝集的红细胞，肉眼见周边模糊(或中间出现较为明显的空白点)。0稀释出现阳性反应可判为血吸虫病患者。2二氨酚致敏法2. 1抗原:为日本血吸虫虫卵可溶性抗原(成虫尿素溶解性抗原(合而成，其比例为 0。所用绵羊或人“)型红细胞经5%戊二醛醛化后，用二氨酚法致敏。致敏后的红细胞中加入含10%蔗糖及1%正常免血清的2装后冻干保存。每批致敏红细胞以阳性参考血清作效价测定滴度达1 1 6402操作方法2. 用前用12. 2. 2在“v 01 (900)血凝板中，将受检血清用生理盐水做1:540倍比稀释2. 2. 3除1:5稀释孔外，其余每孔加滴(0. 03敏红细胞，振荡30s，静置60 - 902. 2. 3反应标准:以1:10稀释孔呈强凝集(+)为阳性反应。2. 1于微童聚苯乙烯塑料板的凹孔中加入。. 2 6碳酸盐缓冲液作1 e 3000或工:1000,随抗原效价而定)稀释的虫卵抗原，置4B 温一20的磷酸缓冲盐水( )洗涤3次，每次5作1:200稀释的受检者血清0. 237C 洗涤3次，每次5作1:1000稀释的辣根过氧化物酶(标记结合物。，27C 洗涤3次，每次52物溶液1PD+0柠檬酸缓冲液250%过氧化氢(l 0. 2 37 0C , 301. 2. 2. 硫酸()0. 05酶标专用比色计上读取492D)值。每次实验均设阳性参考血清对照，同法求出其此对样本血清D 1一值进行校正。(50/75/饱和硫酸钱纯化的日本血吸虫虫卵可溶性抗原(2. 2操作方法:1已包被(4)洗涤1次。2. 2. 2血清用稀释成1:200，每孔加。. 份血清加2个孔，置有盖湿盒内，20温育303. 2. 2. 3去尽反应板孔内的液体，用灌满各孔，3此反复洗涤3次。2. 2- 4每孔加1:1000稀释辣根过氧化物(结合物0. 12. 2. 22. 3. 2. 2. 5加0柠檬酸一磷酸盐缓冲液50前加30%00. 12. 2. 2温育。5止反应。2. 2. 7用酶标检测仪读取492份标本求出2孔实测的用标准血清予以校正。待测标本的。值 (3. 2. 3反应标准:每次每板标准血清的79达不到此质控范围，应重测试标本本血吸虫可溶性虫卵抗原(8尿素溶解性虫卵抗原(等量混合。3. 2操作方法:涤液(温盐水)洗一次，然后每孔加. 批作一个阴性对照，一个阳性对照)，每孔匀，置37 C 5放25去稀释血清，用洗涤液连续洗8次，控干。12. 4加入按工作浓度稀释的酶结合物，每孔。2 5用洗涤液洗8次，再用蒸馏水洗一次， 四甲基联苯胺(物液，每孔。. 2应5 103. 3反应标准:3. 每批的阳性对照及阴性对照判断结果。阳性为鲜蓝色，阴性基本无色。用止，则选用590P/N1判为阳性(P病人正常人A)0稀释2在反应板(黑色，与妊娠诊断胶乳试验使用的相同)各格子上分别滴加稀释血清以及阳性和阴性控制血清各1滴(503滴加血吸虫胶乳试剂1滴(50轻轻摇动10清晰凝集者为阳性，不出现凝集者为阴性。1:10稀释血清阳性者可进一步倍比稀释，重复上述测定，呈现凝集的血清最高稀释度即为抗体滴度毛面为正面)上，置700C 30h。将点好的纤维膜连同参考阳性和参考阴性血清的纤维膜一并置染色盘内。2将1号试剂(200分溶解后即为5. 3取上述2号试剂(吐温)，充分混匀后即为此溶液20去溶液。抗酶结合物)加分混匀后加至含纤维膜的染色盘内。间轻摇数次，倾去溶液。5用次5去溶液。物)加吐温)20匀后再加5号试剂(后加至染色盘中，轻摇数次，15色后的纤维膜置暗处晾干保存。7仔细观察纤维膜上所呈的颜色反应，并与参考血清所呈现的斑点显色反应相比较。以斑点色泽超过参考阴性血清者为阳性反应。根据阳性反应强度可判以+反应。考件)l. 1支持和对症治疗重症患者，可先用氢化考的松或地塞米松加入补液中静脉滴注，退热改善症状后开始病原治疗。2病原治疗可采用毗喳酮总剂量120mg/6天疗法，其中二分之一剂量在第1及第2日分服完，其余二分之一在第3日剂量3次分服。可采用成人总剂量500mg/童体重小于5977一199532日疗法，每日量分2重超过60疗可由医务人员送药上门，或定点发药，年老、体弱，伴发其他疾病者应在当地血防组或卫生院住院服药，服药期间及服药结束后3轻体力劳动，避免高空和水上作业。大多数肝脏功能代偿良好的晚期病人，可用总剂量60mg/年老、体弱、肝功能较差或有夹杂症的病人可用总剂量6日疗法或90mg/日剂量3次分服。1巨脾:凡脾脏肿大达，级，或脾肿大达伴明显脾机能亢进者，或脾肿大伴食管胃底静脉曲张者，均为脾脏手术的适应症。手术治疗有单纯脾切除术、脾切除加责门周围血管离断术、脾切除加门奇静脉血流阻断术、脾肾静脉分流术等。疗原则与一般肝硬化腹水相同。内科治疗可采用中西医结合疗法。西医治疗包括支持疗法、限制钠盐与水分摄入、营养与支持药物的应用、合理使用利尿剂等。中医则辩证论治。先内科处理。包括补充血容量、纠正休克、止血剂的合理使用、垂体后叶素静脉滴注与三腔管气囊填压止血，必要时也可考虑内窥镜注射硬化剂止血，或去甲肾上腺素冰水溶液洗胃。内科治疗出血停止和全身情况改善后，如无手术禁忌症，应在短期内择期进行手术治疗，以免近期再次发生上消化道出