高效液相色谱法检测治伤胶囊设备表面关附甲素的清洁残留

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 高效液相色谱法检测治伤胶囊设备 表面关附甲素的清洁残留 【摘要】目的：建立测定治伤胶 囊生产设备表面关附甲素的清洁残留的 方法。方法：色谱柱：Zorbax Eclipse XDB-C8 柱（4.6mm*250mm，3.5m） ， 流动相：0.2%庚烷磺酸钠缓冲液（加入 0.2%三乙胺，磷酸调节至 pH3）-乙腈 （梯度洗脱） ，流速：0.5ml/min；检测 波长：205nm；柱温 25。结果：盐酸 关附甲素质量浓度在 0.02mg/ml- 0.16mg/ml 的范围内与峰面积呈良好的 线性关系（r=0.9999 ） ，其平均加样回收 率（n=9）为 101.4%。结论：本方法分 离度和重复性良好，简单易行，可用于 治伤胶囊设备表面关附甲素清洁残留的 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 检测。 中国论文网 /1/view-13038993.htm 【关键词】高效液相色谱法；关 白附；盐酸关附甲素；擦拭法；清洁残 留 【中图分类号】R746.5 【文献标 识码】A 【文章编号 】2095- 6851（2017）12-01 清洁验证是为了确定在中药生产 过程中，设备、容器清洗后相关操作规 程的可行性和有效性，清洁验证检测方 法是衡量其清洁操作后是否符合规定的 重要手段，公司主要产品治伤胶囊为复 方制剂，处方有关白附、白芷、制南星 和防风组成，其中关白附为生品毒性药 材，从中药使用安全性考虑，选择关白 附作为目标残留物，基于关附甲素最大 日允许携带量为 1.727mg/Kg，与关白附 共用设备的与药品接触的总的表面积， ，结合批量，以单位面积设备表面关附 甲素残留限度为 0.139 mg/100cm2。 1 材料与仪器 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 高效液相色谱仪、电子天平、酸 度计、庚烷磺酸钠、盐酸关附甲素对照 品、治伤胶囊等。 2 检验方法与结果 2.1 色谱条件： 色谱柱：Zorbax Eclipse XDB-C8 柱（4.6mm*250mm，3.5m） 流动相 B：乙腈。 流动相 A：0.2%庚烷磺酸钠缓冲 液（加入 0.2%三乙胺，磷酸调节至 pH3） 流速：0.5ml/min；z 测波长： 205nm；柱温 25；进样量 10l。 2.2 对照品溶液的制备： 精密称取盐酸关附甲素对照品， 用流动相 A 溶解并稀释，制成 80?g/ml 的溶液。 2.3 供试品溶液的制备： 取治伤胶囊内容物约 0.5g，精密 称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 1% 盐酸溶液 50ml，称重，超声处理（功 率 300W，频率 50kHz）30 分钟（水温 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 50以下） ，放冷，加入 1%盐酸溶液补 足失重，摇匀，移取上清液，过 0.45m微孔滤膜。 2.4 供试品擦拭样制备： 取治伤胶囊粉末约 0.1g 均匀涂布 在面积约为 100 cm2 的不锈钢板上，待 涂匀后，用干净的棉球（用纯化水浸润） 将不锈钢板擦拭干净，然后将棉球浸在 10ml1%盐酸溶液中，超声处理（功率 300W，频率 50kHz）30 分钟（水温 50以下） ，放冷，摇匀，取上清液， 过 0.45m微孔滤膜，即得。 2.5 系统适用性 按 2.1 项下的色谱条件，取 2.3 项下供试品溶液，测得理论板数按盐酸 关附甲素峰计不低于 10000，与其相邻 色谱峰分离度大于 1.5。 2.6 方法学考察 2.6.1 线性关系考察。 精密量取盐酸关附甲素对照品储 备液（0.8mg/ml） -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 0.3、0.5、0.7、1.0、1.2、1.5、2.0ml 分 别至 10ml 容量瓶中用流动相 A 稀释至 刻度，制成系列标准溶液，进样，记录 图谱。以峰面积（A）为纵坐标，质量 浓度（C ）为横坐标进行回归计算，得 回归方程 A=11367C+28.96（r=0.9999） 。 其质量浓度范围为：0.0199mg/ml- 1.591mg/ml。 2.6.2 重复性试验。精密称取同 一批治伤胶囊内容物，按 2.3 处理，制 成 6 份供试品溶液，进样，记录色谱图。 测得结果 6 份样品的盐酸关附甲素含量 的 RSD（n=6）为 3%。表明该方法的 重复性良好。 2.6.3 回收率试验。取 3 个 10ml 量瓶，加入浓度约为 0.4mg/ml 盐酸关 附甲素溶液 0.5ml 及治伤胶囊内容物 85mg；取 3 个 10ml 量瓶，加入浓度约 为 0.4mg/ml 盐酸关附甲素溶液 1.0ml 及 治伤胶囊内容物 171mg；取 3 个 10ml 量瓶，加入浓度约为 0.4mg/ml 盐酸关 附甲素溶液 1.5ml 及治伤胶囊内容 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 260mg。9 个样均按 2.3 处理，进样，记 录色谱图。结果 50%的回收率为 101.2%，100%的回收率为 102.3%，150% 的 回收率为 100.8%平均加样回收率为 101.4%，RSD（n=9）为 0.9%。 2.6.4 擦拭回收率。 50%浓度 （约 0.04mg/ml）：取治伤胶囊内容物 约 195mg，按 2.4 方法制备三份；100% 浓度（约 0.08mg/ml）：取治伤胶囊内 容物约 390mg，同法制备；150%浓度 （约 0.12mg/ml）：取治伤胶囊内容物 约 585mg，同法制备。结果测得：50% 的质量浓度，擦拭回收率为 86.9%； 100%的擦拭回收率为 86.8%； 150%的擦拭回收率为 86.9%。 RSD（n=9）为 3%。该擦拭方 法可将残留在设备表面的大部分药粉擦 拭下来。 2.6.5 生产车间设备清洁后，擦 拭取样，按 2.4 制备供试品溶液。结果 未检出盐酸关附甲素的残留。 3 讨论 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 该方法为中药治伤胶囊中毒性药 材的残留提供了可靠的方法，此方法的 建立，解决了公司中药产品清洁残留的 问题。关白附、治伤胶囊含量测定一直 采用传统的滴定方法，而且以生物碱关 附甲素计算含量，缺少毒性药材中毒性 物质的定量检测，据文献1记载，关白 附中毒性成分主要有关附甲素、关附壬 素和关附辛素，其中关附辛素的毒性最 高，能抑制骨骼肌系统和呼吸系统，而 且含量较高，如何采用有效的方法来定 量控制关白附中所含的毒性物质，需要 我们采用灵敏度更高、方法简