出凝血实验

出凝血相关实验 止血机制 当血管发生破损时，首先是局部血管发生短暂地收缩， 使血流变缓，破损伤口缩小，之后血管内皮细胞表达并释放 出 vWF粘附于暴露的胶原组织上，血小板通过膜糖蛋白 GP b与 vWF相连接而粘附于胶原纤维，同时血小板以膜糖 蛋白 GP b/ a复合物为纤维蛋白原的受体，通过纤维蛋白 原介导血小板间的聚集，在 ADP、肾上腺素、胶原、凝血酶 等诱导剂的参与下，聚集的血小板释放出 ADP、 5-羟色胺、 血栓素 A2、 -血小板球蛋白等，导致血小板非可逆性聚集 , 形成血小板血栓。同时，血管受损后暴露的胶原纤维和释放 的组织因子，启动内源性和外源性凝血途径 ,形成牢固的止血 血栓，血小板释放出血栓收缩蛋白，使血块退缩，加强止血 作用，使出血停止。 凝血机制 抗凝机制 v 抗凝血酶 是人体内最重要的抗凝物质，主要由肝脏及血管内皮细胞产生。它在肝 素的辅助下，主要与活性因子 和凝血酶结合为复合物，抑制活性因子 和凝血酶的 凝血作用 . v 蛋白 C系统 由蛋白 C、蛋白 S及血栓调节素等组成。蛋白 C和蛋白 S在肝内合成，血栓调 节素主要存在于血管内皮细胞表面，凝血酶与其结合后，即失去了它原来的凝血活性 ，并可激活蛋白 C，使之变成活性蛋白 C，再通过 Ca2+与内皮细胞上的蛋白 S结合成活 性蛋白 C-蛋白 S复合物，灭活因子 和因子 ，发挥抗凝作用。 v 组织因子途径抑制物 (TFPI)为一种对热稳定的糖蛋白。内皮细胞可能是其主要产生部位 。 TFPI的抗凝机制： 1、有直接抗 F a作用。 2、在 Ca2+存在的条件下，有抗 TF/F a复合物作用。 纤溶机制 当血管受 损启动内外源性凝血过程时， F a和激肽酶可将纤溶酶原激活为纤溶酶。血液中的链 激酶和尿激酶等物质也可将纤溶酶原激活。血管损伤部位分泌的组织型纤溶酶原激活 物（ t-PA），特异性的同纤维蛋白结合，再与纤溶酶原结合，激活纤溶酶原为纤溶酶 ，大大加快了纤溶酶分解纤维蛋白的作用。 出血时间测定 v 基本原理 v 皮肤毛细血管被刺破后出血自然停止所需的时间称为出血时间。出血时间的变 化主要受血小板数量和功能的影响，其次是血管壁的完整性和收缩功能。血浆凝 血因子的影响较小。 简要步骤 出血时间测定器测定法：将出血时间测定 器（双刀片或单刀片弹簧装置）在肘窝下 2横指 处常规消毒后贴于皮肤表面，按动按钮，开动秒 表计时。 v 实验结果 参考值： 2 6分钟 v 临床意义 v 出血时间延长见于： 1、血小板明显减少或功能异常 如原发性血小 板减少性紫癜、血小板无力症等； 2、严重缺乏血浆有关因子 如 vWD 、 DIC； 3、其他异常，如：遗传性出血性毛细血管扩 张症、服用抗血小板药物 v 基本原理 v 静脉血放在玻璃试管中，观察自采血开始至血凝所需的时间称为凝 血时间。本试验反映自因子 被负电荷表面激活，至纤维蛋白形成所需 的时间，主要反映内源性凝血过程有无异常 。 v 简要步骤 v 抽静脉血 3ml分别注入 3支小试管内。置 37 水浴中， 3分钟后每隔 30秒钟轻轻倾斜第 1支试管 1次，直至血液不再流动为止，依次倾斜第 2 和第 3支试管，记录第 3管血液凝固 所需时间。 v 实验结果 v 参考值： v 玻璃试管法 4 12min 凝血时间测定 v 临床意义 v 凝血时间延长见于 v 1、 因子 、 、 明显减少 如血友病、血 管性血友病等； v 2、 凝血酶原和纤维蛋白原高度减少 如严重 的肝病、阻塞性黄疸、先天性纤维蛋白原减少症等 ； v 3、 纤溶亢进 ； v 4、 循环抗凝物质增多及使用 活化部分凝血活酶时间测定 v 基本原理 v 部分凝血活酶 (脑磷脂 )可代替血小板 3因子参 与 F 和 F 的凝血作用。本试验是在血浆中 加入 APTT试剂 (接触因子激活物 +磷脂 )和 Ca2+后 ,测定其凝血时间。本试验是反映内源 性凝血功能的综合性检查。如以白陶土 (Kaolin)作为接触因子激活物时，亦可称为白 陶土部分凝血活酶时间 (KPTT). v 简要步骤 v 取抗凝血 ,分离血浆 ,加 APTT试剂， 37 温 育 3分钟后加 Ca2+,记录血浆凝固所需时间。 v 实验结果 v参考值 : 30 45秒。与正常对照相差在 5秒以 内为正常，延长 10秒以上为异常。 v 临床意义 1、 APTT延长见于： （ 1）先天性凝血因 子异常：血友病，血管性血友病、接触因子 缺乏 ； （ 2）多种凝血因子缺乏（后天性），如严 重肝病、维生素 K缺乏、 DIC等； （ 3）循环抗 凝物质增加，如系统性红斑狼疮。 2、 APTT缩 短见于： 高凝状态：如 DIC高凝期和凝血因子 活性增高等；血栓性疾病：如心肌梗死、脑血管病 变、糖尿病、肾病综合征、妊娠高血压综合征等 凝血酶原时间测定 v 基本原理 v 在被检血浆中加入因子 和 Ca2+后，激活 凝血酶原，使纤维蛋白原转化为纤维蛋白， 观察血浆凝固所需时间即为凝血酶原时间。 本试验是外源性凝血过程的过筛试验。因子 、 、 、 、 质和量异常影响此试验 . v 简要步骤 取静脉抗凝血，分离血 浆，在待检血浆中加入因子 和 Ca2+，计录 血浆凝固的时间。 v 实验结果 v参考值： 11 13s，比正常对照延长 3s以上 有临床意义，国际标准化比值（ INR）为 0.9 1.1。 v 临床意义 v 凝血酶原时间延长见于： （ 1） 先天性凝血 因子异常 如因子 、 、 、 、 之一或两种 以上的凝血因子有质量异常时。 （ 2） 后天性 凝血因子异常 如严重肝病、维生素 K缺乏、 DIC后 期、使用抗凝药物、纤溶亢进等。 凝血酶原时 间缩短见于： 血液高凝状态（ DIC早期、心肌 梗死、脑血栓形成、急性血栓性静脉炎）、血栓性 疾病、多发性骨髓瘤、洋地黄中毒、口服避孕药等 。 凝血酶时间测定 v 基本原理 v在被检血浆中加入标准凝血酶溶液后，血浆 凝固所需时间，为凝血酶凝固时间。当纤维 蛋白原明显减少或有结构异常或血循环中有 抗凝血酶物质时，本试验时间长。 v 简要步骤 v 取待检血浆，加入标准凝血酶溶液中，记录血浆凝固时间。 v 实验结果 v 参考值： 16 18S，较正常对照延长 3S以上有诊断意义。 v 临床意义 凝血酶时间延长见于： （ 1）患者 血循环中 AT- 活性明显增高； （ 2）肝素样物质增多， 如严重肝病、胰腺病及过敏性休克等； （ 3）纤溶亢进 ，如 DIC； （ 4）纤维蛋白原少或有异常纤维蛋白时； （ 5）异常球蛋白增多，如多发性骨髓瘤。 束臂试验 v 基本原理 束臂试验也称为毛细血管抵抗力试 验（ capillary resistance test， CRT）。毛细血管 壁的完整性有赖于毛细血管的结构以及血小板的正 常。通过对毛细血管施以压力，观察出血点的多少 ，可反映血管壁、血管内皮细胞和血小板的综合止 血作用。 v 简要步骤 在前臂屈侧肘下 4cm出 划一直径 5cm圆圈，并用血压计袖带束于该 侧上臂 ,使压力保持在收缩压和舒张压之间， 持续 8分钟，解除压力观察出血点。 v 实验结果 Rumpel-leede法：正常人不 超过 10个出血点（阴性）， 10个以上出血点 为阳性。 v 临床意义 v 束臂试验阳性见于： v 1、 血管病变 如过敏性紫癜、遗传性出血性毛细血 管扩张症、单纯性紫癜、坏血症、败血症等； 2、 血小板减少 如特发性血小板减少性紫癜、血栓 性血小板减少性紫癜、再生障碍性贫血等； 3、 血小板功能异常 如血小板无力症； 4、 其它因素 如血管性血友病、服用大量抗血小板药物 等。 血浆鱼精蛋白副凝试验 v 基本原理 v硫酸鱼精蛋白能分离 FDP与非交联的纤维蛋 白单体（ FM）聚合的可溶性复合物，使 FM 沉析出来，呈凝胶状态。 v 简要步骤 v 取患者静脉血，分离血浆，在受检血浆中加入硫酸 鱼精蛋白，观察是否出现纤维状物。 v 实验结果 正常人为阴性反应。 v 临床意义 3P试验阳性 是血中有微量凝血酶生 成的标志，也是血管内纤维蛋白溶解的标志； 3P 试验阳性 见于血栓性疾病、溶栓治疗期、血液高凝 状态、 DIC的早期和中期等，是检查这类疾病的过 筛检查之一 常用 检查项 目的 选择 表 项 目 血管性疾病 血小板疾病 凝血异常疾病 凝固异常