多肽类药物PPT课件

多肽类药物 多肽类药物习惯上常指多肽类激素。一般将 50或 50 以下氨基酸残基组成的化合物，列入多肽。现已知生物体 内含有和分泌很多种激素、活性多肽，仅脑中就存在近 40 种，而人们还在不断地发现、分 离、纯化新的活性多肽 物质。多肽在生物体内的浓度很低血液中，一般为 10 10 mol L，但生理活性很强，在调节生理功能时起着非 常重要的作用。依据多肽类药物的作用和分泌部位分为 ： 多肽类药物 1加压素及其衍生物 有脑神经垂体素、加压素、鞣酸加压素、去氨精加压 素、 苯赖加压素 、鸟加压素（ POR 8）等。 2催产素及其衍生物 有催产素、去氨基催产素、催产素酒石酸等 3、促皮质素及其衍生物 有促皮质素、锌促皮质素（ ACTH-Zn）、磷锌促皮质素、 明胶促皮质素、羧纤促皮质素、丝赖促皮质 18肽、 甘精促皮 质 18肽、锌促皮质 24肽、促皮质 24肽、 25肽、 28肽等。 多肽类药物 4、下丘脑 -垂体肽激素 有促性腺素释放激素、促甲状腺素释放激素、生长激素释放 激素（ CHRH）、生长激素抑制素（ CHIH）、 促黑色素细胞抑 制激素（ MRIH）、促黑色素细胞释放激素（ MRH）、催乳素释 放激素（ PRH）、催乳素抑制激素（ PIH）、 促皮质素释放激 素（ LRH）等 5、 消化道 激素 有促胃泌素 34肽、 17肽、 14肽、 5肽、 4肽，胰泌素、胆囊收 缩素 39肽、 33肽、 8肽， 抑胃肽 、 胃动肽、血管活性肽、胰 多肽、 P物质、 神经降压肽 、蛙皮肽 14肽、 10肽等。 多肽类药物 6、其他激素和活性肽 有胸腺素、胰高血糖素、降钙素、血管紧张肽 （ 10肽 ）、 （ 8肽）、 （ 7肽）、脑啡肽、 内啡肽、睡眠肽、记 忆肽、松果肽、胰蛋白酶抑制剂等 。 多肽类药物 活性肽类药物很多 ,根据药物的结构和特性 ,常用的测定方法如 下 . 一、酸碱滴定法 示例 苯酪肽的测定 二、紫外分光光度法 例如 五肽胃泌素的测定 三、药效测定法 例如 抑肽酶、杆菌肽的测定 多肽类药物 举出一些多肽药物的分析 苯酪肽 分子式 :C23H20N2O5 分子量 :404.4153 多肽类药物 测定方法 取本品约 0.5g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液呈中 性） 60ml，振摇，溶解后加酚酞指示液数滴，用氢氧化钠滴 定液（ 0.1mol/l）滴定，即得。 多肽类药物 一、 五肽胃泌素 为白色或类白色粉末。本品能促进胃酸、胃蛋白酶 及内因子的分泌，其促胃酸分泌作用相当于内源性 胃泌素的 1/4，作用可持续 1040分钟。临床上主要 用于胃酸分泌机能的检查。 分子式： C37H49N7O9S 分子量： 767.9 该品为 N-（ 1,1-二甲乙氧基）羰基 - 丙氨酰 -L 色氨酰 -L-甲硫氨酰 -L-门冬氨酰 -L-苯丙酰胺。按干 燥品计算，含 C37H49N7O9S应为 97.0% 103.0%。 多肽类药物 分子式 多肽类药物 性状 该品为白色或类白色粉末；无臭。 该品在二甲基甲酰胺中溶解，在乙醇中微溶，在水中不溶， 在稀氨溶液中溶解。 比旋度 取该品 ,精密称定，加二甲基甲酰胺溶解并定量稀释 成每 1ml中含 10mg的溶液，依法测定 (附录 E）。比旋度为 25.0 至 29.0 。 鉴别 （ 1）取含量测定项下的溶液，照分光光度法（附录 A），在 230 350nm的波长范围内测定吸收度，在 280nm与 288nm的波 长处有最大吸收，在 275nm的波长处有转折点。 多肽类药物 （ 2）取该品约 5mg，加盐酸溶液（ 12 ） 0.5ml，混匀，置安瓿内， 封口，在 150 水解 30分钟，将水解液移置小烧杯中，置水浴上蒸 干，残渣加水 0.1ml使溶解，作为供试品溶液。取甲硫氨酸、色氨 酸、苯丙氨酸、门冬氨酸及 丙氨酸对照品各适量，加水分别制 成每 1ml中含 2.5mg的对照品溶液及各含 2.5mg的对照品混合溶液。 照薄层色谱法（附录 B)测定，吸取上述供试品溶液、对照品混 合溶液及五种对照品溶液各 3l ，分别点于同一硅胶 G薄层板上， 以正丁醇 -水 -异丁酸 -冰醋酸（ 50:50:5:7）的上层液为展开剂，进 行单向三次展开，每次展开约 15cm，取出后俟展开剂挥干后再进行 下一次展开，且比前一次多展开一些，展开后，取出，晾干，喷以 茚三酮溶液（取茚三酮 0.1g，加水 0.2ml与冰醋酸 0.4ml，加三甲基 吡啶 1ml，加乙醇使成 20ml），在 70 80 加热 15分钟。对照品混 合溶液应显 5个斑点，供试品溶液所显斑点的位置与颜色应与各相 应的对照品溶液的主斑点相同。 多肽类药物 检查 吸收度比值 取含量测定项下的溶液，照分光光度法（附录 A）测定，在 280nm与 288nm的波长处吸收度的比值应为 1.12 1.22。 干燥失重 取该品，置五氧化二磷干燥器中减压干燥 24小时， 减失重量不得过 0.5%（附录 L）。 氨基酸比值 取该品，加盐酸溶液（ 12 ），于 110 水解 24 小时后，用氨基酸自动分析仪测定，各氨基酸之间比值应为 1 。 有关物质 取该品，加甲醇浓氨溶液（ 24:1）混合 液 制成每 1ml中含 5mg的溶液作为供试品溶液；精密量取适量制成每 1ml 中含 0.1mg的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法（附录 B) 多肽类药物 试验，吸取上述两种溶液各 10l ，分别点于同一硅胶 G薄层 板上，以乙醚冰醋酸水（ 10:2:1）为展开剂，展开后， 晾干，在 100 干燥 2分钟，喷以对二甲氨基苯甲醛溶液 取对 二甲氨基苯甲醛 1g，加甲醇盐酸（ 3:1）混合使溶解 ，在 100 加热至斑点出现（约 2分钟），供试品溶液如显杂质斑 点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。 多肽类药物 含量测定 取该品适量，精密称定，加 0.01mol/L氨溶液溶解并定量稀释制 成每 1ml中约含 50g 的溶液，照分光光度法（附录 A）， 在 280nm的波长处测定吸收度，按 C37H49N7O9S的吸收系数（ E1% 1cm）为 70计算，即得。 【类别】 诊断用药。 【贮藏】 遮光，密封保存。 【制剂】 五肽胃泌素注射液 多肽类药物 测定方法 方法名称：五肽胃泌素原料药 五肽胃泌素的测定 分光光度法 应用范围：该方法采用分光光度法测定五肽胃泌素原料药中五肽胃 泌素的含量。 该方法适用于五肽胃泌素原料药。 方法原理：供试品加 0.01mol/L氨溶液定量稀释，制成供试液，置 紫外可见分光光度计，于 280nm波长处测定吸收度，计算出其含 量。 试剂：氨溶液（ 0.01mol/L） 仪器设备：紫外可见分光光度计 试样制备： 1 . 供试品溶液的制备 多肽类药物 精密称取供试品适量，加 0.01mol/L氨溶液溶解并定量稀释制 成每 1mL中约含 50g的溶液，即得供试品溶液。 注： “ 精密称取 ” 系指称取重量应准确至称取重量的千分之 一。 “ 精密量取 ” 系指量取体积的准确度应符合国家标准中 对该体积移液管的精度要求。 操作步骤：取供试品溶液照紫外分光光度法，于波长 280nm处 测定吸收度，按 C37H49N7O93S的吸收系数（ E1%1cm）为 70计 算，即得。 多肽类药物 二、 抑肽酶 抑肽酶 (Trasylol，别名：抑胰肽酶、屈来密多、胰蛋白酶 抑制剂 ) 能抑制胰蛋白酶及糜蛋白酶，阻止胰脏中其他活性 蛋白酶原的激活及胰蛋白酶原的自身激活。临床用于预防和 治疗急性胰腺炎、纤维蛋白溶解引起的出血及弥漫性血管内 凝血。还可用于抗休克治疗。在腹腔手术后，直接注入腹腔 可预防肠粘连。 多肽类药物 剂量与用法 第一、二日， 8万 U 12万 U/日，首剂用量应大些，缓慢静脉 推注（每分钟不超过 2ml）。维持剂量宜采用静滴， 2万 U 4 万 U/日。由纤维蛋白溶解引起的出血，应立即静注 8万 U 12 万 U，以后每 2小时 1万 U，直至出血停止。 预防剂量，手术前 1日开始， 2万 U/日共 3日。预防术后肠粘连 ，在手术切口闭合前，腹腔内直接注入 2万 U 4万 U，注意勿 与伤口接触。 多肽类药物 副作用 1 注速过快，偶有恶心、荨麻疹、发热、瘙痒及血管痛等。 2 多次注射可能产生静脉炎及脉搏加快、青色症、多汗、呼吸 困难等。 3 少数过敏体质病人用药后发生变态反应，应停药。 多肽类药物 通用名称：抑肽酶 英文名称： Aprotinin 中文别名：屈来赛多、抑胰肽酶 英文别名： Antagosan、 Antikrein、 Apotinin、 Iniprol、 Tissucol、 Trypsin Inhibitor、 Zymofren 药理 抑肽酶通过按一定化学比例形成的可逆的酶 -抑制剂复合物从 而抑制人体的胰蛋白酶、纤溶酶、血浆及组织中血管舒缓 素。丝氨酸活性的蛋白酶在血管舒缓素 -激肽原 -激肽系统、 补体系统、凝血系统中起着主要作用，而在这些系统中，纤 溶酶及血浆血管舒缓素都起关键作用。 多肽类药物 抑肽酶通过酶上的丝氨酸活性部分，形成抑肽酶 -蛋白酶复合 物而达到抑制作用。然而与不同的蛋白酶结合，显示出不同 的离解常数。与胰蛋白酶的结合最牢固（ Ki=0.06nmoN），这 个常数是目前所报导的蛋白质间作用中最低的之一（ Laydunski et al 1974）与人体纤溶酶的结合不很牢固。 因为酶 -抑制物复合体的 K值较大（ Ki=1 nmoN），因此可能是 可逆的（ Wimann， 1980），与人血浆血管舒缓素结合的复合 物相当不牢固（ ki=30nmol/l），但仍在抑肽酶的治疗范围内 （ Nakahara， 1983）。 多肽类药物 适应症 能抑制胰蛋白酶及糜蛋白酶，阻止胰脏中其他活性蛋白酶原 的激活及胰蛋白酶原的自身激活，故可用于各型胰腺炎的治 疗与预防；能抑制纤维蛋白溶酶和纤维蛋白溶酶原的激活因 子，阻止纤维蛋白溶酶原的活化，用于治疗和预防各种纤维 蛋白溶解所引起的急性出血；能抑制血管舒张素，从而抑制 其舒张血管、增加毛细血管通透性、降低血压的作用，用于 各种严重休克状态此外，该品在腹腔手术后直接注人腹腔 ，能预防肠粘连 多肽类药物 用法用量 . 缓慢静脉推注（不超过 2ml/分），头 2天每日注射 8-12万 单位，首剂宜大些 .维持量用静滴，一日 2-4万单位，分 4次 用 . .纤维蛋白溶解引起的急性出血：立即静注 8-12万单位 ，以后每 2小时 1万单位 . .预防剂量：术前 1日开始，每日 注射 2万单位，共 3天 . 治疗肠瘘及连续渗血可局部使用 . . 预防术后肠粘连：手术切口闭合前，腹腔内直接注入 2-4万单 位，勿与伤口接触。 多肽类药物 禁用慎用 对抑肽酶过敏者禁忌使用该品。 动物试验显示该品虽无任何致畸和胚胎毒性作用，然而根据 一般的原则，妊娠头三个月不应使用。 多肽类药物 不良反应 少数病人可出现过敏反应，应立即停药 .输注过快有时出 现恶心，呕吐，发热，搔痒，寻麻疹等。支气管痉挛、胃肠 道不适、皮疹、心动过速等均属过敏反应。较少见的不良反 应有：治疗胰腺炎时可出现凝血机制障碍、过敏性休克等。 使用该品可能发生过敏和类过敏反应（ 0.5%）。症状范围 自皮疹、瘙痒、呼吸困难、恶心、心动过速到循环衰竭的过 敏性休克，可导致个别病例死亡。心脏外科病人高剂量 Trasylol治疗期间，血清肌酐可一过性增高。输注抑肽酶后 可能出现血栓性静脉炎。 多肽类药物 效价的测定 （ 1）试液的制备 底物溶液的制备 取 N-苯甲酰 -L-精氨酸乙酯盐酸盐 171.3mg ，加水溶解并稀释至 25ml，临用前配制。 胰蛋白酶对照液的配制 精密称取胰蛋白酶对照品适量，用 0.001mol/l的盐酸液制成每毫升约 50FIP单位（约每毫升含 1mg的溶液），临用时配制并放置冷处。 多肽类药物 胰蛋白酶对照品稀释液的制备 精密量取本品适量，加硼砂 氯化钙缓冲液（ pH8.0）稀释成 20ml。 供试液的配制 精密量取本品适量，加硼砂氯化钙缓冲液（ pH8.0）制成每毫升约含 100FIP单位，（约每毫升中含 0.6mg ）的溶液，精密量取 0.5ml与胰蛋白酶对照品溶液 2ml，再用 硼酸氯化钙缓冲液（ pH8.0）稀释成 20ml，反应 10min后，立 即测定。 多肽类药物 （ 2）测定方法 取硼砂氯化钙缓冲液（ pH8.0） 9ml与底物溶液 1.0ml，置 25ml烧杯中，于 25+-0.5 恒温水浴中，在搅拌下滴加 0.1mol/l的氢氧化钠溶液至 PH值为 8.0，精密加入供试液 1ml ，并立即记时，用 1ml微量滴定管以氢氧化钠滴定液（ 0.1mol/l）滴定释放出的酸，使溶液的 PH值始终维持在 7.9 8.1，每隔 1min读取 pH值恰好为 8.0是所消耗的氢氧化钠溶液 （ 0.1mol/l）的毫升数，共 6min。另精密量取胰蛋白酶对照 品稀释液 1ml，按上法操作，作为空白对照，以时间为横坐标 ，消耗的氢氧化钠滴定液（ 0.1mol/l）的毫升数。 多肽类药物 （ 3）注意事项 本法测定的原理为：在一定的条件下（ pH8.0,25 ），胰 蛋白酶可使 N-苯甲酰 -L-精氨酸乙酯水解为 N-苯甲酰 -L-精氨 酸，溶液的 pH值下降。当加入氢氧化钠滴定液后，使溶液的 pH值又回到 8.0，水解就继续进行。当胰蛋白酶溶液中加入抑 肽酶后，使 50%胰蛋白酶的活性被抑制，剩余的胰蛋白酶与 N- 苯甲酰 -L-精氨酸乙酯仍进行水解反应，用氢氧化钠滴定液滴 定释放出的酸，使溶液 pH值始终维持在 7.9-8.1。在一定时间 内，根据样品消耗的氢氧化钠滴定液（ 0.1mol/l）的毫升数 算出其活力单位。 多肽类药物 结果计算 每毫克抑制酶的单位数 KIU=（ 2*V-V1） *100*30/p 式中 V-胰蛋白酶对照品稀释液每分钟消耗氢氧化钠滴定液（ 0.1mol/l）的毫升数； V1-供试品溶液每分钟消耗氢氧化钠滴定液（ 0.1mol/l）的毫 升数； 30-FIP单位转换成 KIU的换算因子； P-滴定液中抑肽酶的量（ mg） 1个胰蛋白酶单位（ FIP） =每分钟水解 1umol的 N-苯甲酰 -L-精 氨酸乙酯 1个抑肽酶活力单位（ FIP） =能抑制 1个胰蛋白酶单位（ FIP） 的活力 多肽类药物 三、 杆菌肽 (枯草菌肽、雀西杆菌素 ) 英文名： Bacitracin(Baciguent) 本为类白色或淡黄色的粉 末；无臭，味苦；有引湿性；易被氧化剂破坏，在溶液中能 被多种重金属盐类沉淀。本品在水中易溶，在乙醇中溶解， 在丙酮、氯仿或乙醚中不溶。对大多数革兰阳性菌和奈瑟球 菌有抗菌作用，现作外用抗菌药，局部应用，也可口含，治 口咽部感染。 多肽类药物 分子结构 多肽类药物 作用与用途 金色葡萄球菌受此药物抑制 抗菌谱与 青霉素 相似，对 革兰阳性细菌 和阴性球菌、 肺炎双 球菌 、 葡萄球菌 、 淋球菌 、脑膜炎双球菌及 螺旋体 等均有杀 菌作用。其作用机制不仅作用于 细胞壁 ，也影响 原生质体 ， 对 胞浆膜 也有损坏作用，影响其渗透性。 本品对 肾脏 毒性大，临床应用受到限制，一般不作全身用药 ，临床主要用于耐 青霉素 的葡萄球菌感染及外用于 皮肤 感染 等。 多肽类药物 杆菌肽 - 剂量与用法 局部应用，软膏， 500U/g，每日涂用 2 3次。另有溶液剂、 滴耳剂等。 杆菌肽 - 副作用 可有过敏性反应，如皮疹。 多肽类药物 杆菌肽 - 药效学 杆菌肽属 多肽类 抗生素，对 革兰阴性菌 具杀菌作用，其机理 主要为特异性地抑制细菌细胞壁合成阶段的脱磷酸化 作用，影响了磷脂的转运和向细胞壁支架输送 粘肽， 从而抑 制了 细胞壁 的合成。杆菌肽尚可与敏感细菌的细胞膜结合， 损伤 细胞膜 ，致使各种 离子 、 氨基酸 等重要物质流失。 杆菌肽 - 药动学 通常情况下本品局部应用并无明显吸收，但在应用较大 剂量 灌注入体腔或用于较大手术创面时可有微量吸收。口服本品 后自 胃肠道 吸收亦不明显。 多肽类药物 杆菌肽 - 适应症 用于金葡菌、 溶血性链球菌 、肺炎球菌等敏感菌所致的皮肤 软组织及 眼 部感染。由于本品的严重 肾毒性 反应，现已不作 全身用药，仅 局部 应用。也可口含，治口咽部感染。 多肽类药物 杆菌肽 - 注意事项 1、本品仅限眼部使用。 2、涂眼前，注意清洁双手，管口勿接触手与 眼睛 ，防止损伤与污 染。 3、本品不宜长期连续使用，使用 3-4日症状未缓解时，应停药就 医。 4、若出现充血、眼痒、 水肿 等症状，应停药就医。 5、如使用过量或出现严重不良反应，应立即就医。 6、对本品 过敏 者禁用，过敏体质者慎用。 7、本品 性状 发生改变时禁止使用。 8、请将本品放在儿童不能接触的地方。 9、 儿童 必须在成人监护下使用。 10、如正在使用其他药品，使用本品前请咨询医师或 药师 。 多肽类药物 杆菌肽 - 药物相互作用 如与其他药物同时使用可能会发生药物 相互作用 ，详情请咨 询医师或药师。 杆菌肽 - 给药说明 因毒性