氢化物发生-原子荧光光谱法测定中成药中砷以及仪器条件的优化 毕业论文.doc

毕业论文（设计） 题 目：氢化物发生-原子荧光光谱法测定 中成药中砷以及仪器条件的优化 学 号： 姓 名： 教 学 院： 化学与化学工程学院 专业班级： 2008 级应用化学本科班 指导教师： 完成时间： 2012 年 月 日 毕节学院教务处制 目录 摘要 .1 abstract 2 第一章 氢化物发生-原子荧光光谱法基础知识 .4 1.1 引言 4 1.2 原 子 荧 光 光 谱 法 4 1.2.1 原 子 荧 光 光 谱 的 原 理 .4 1.2.2 原 子 荧 光 光 谱 仪 .5 1.3 氢 化 物 发 生 法 5 1.3.1 氢 化 物 发 生 概 述 5 1.3.2 氢 化 物 发 生 方 法 5 1.3.3 氢 化 物 发 生 法 的 特 点 .6 1.4 砷 的 测 定 方 法 .6 1.5 原 子 荧 光 光 谱 定 量 分 析 6 1.5.1 测 定 方 法 6 第二章 氢化物发生-原子荧光光谱法测定中成药中砷含量以及仪器条件的优化 .7 2.1 仪器与试药 .7 2.1.1 仪器 7 2.1.2 试剂 .7 2.1.3 药品 8 2.2 仪器工作条件 .8 2.3 标准曲线及检出限 8 2.4 可溶性砷测定的样品处理 .8 2.5 样品测定 9 第三章 结果与分析 .9 3.1 仪器条件的优化 9 3.1.1 灯电流的选择 .9 3.1.2 光电倍增管负高压的选择 .9 3.1.3 原子化器高度的选择 .10 3.1.4 载气流量选择 .10 3.1.5 屏蔽气流量的选择 .11 3.1.6 载流液和介质纯度及浓度的选择 .11 3.1.7 还原剂浓度的选择 .12 3.2 标准曲线和线性范围 13 3.3 样品测定结果 14 结 论 .14 致 谢 .16 第 1 页 共 16 页 氢化物发生-原子荧光光谱法测定中成药中砷以及仪器 条件的优化 摘要 目前，对于种类与数量繁多的中成药中重金属含量的标准还没有明确规定， 而重金属对人的危害却是一直存在的，所以我们现在需要大量的数据，一是对现 有的中成药的信息的完善，二是为规范以后中成药生产提供依据。 本论文主要是用氢化物发生-原子荧光光谱法测定了几种含雄黄的中成药中可 溶性砷含量。砷是重金属之一，地壳中含量不多，但广泛存在于自然界中。目前 研究表明，砷根据其形态的不同，毒性也有很大差异，而对人体有害的主要是可 溶性砷。含砷的药既有毒性，又有不可忽视的药理作用，所以对中成药中的可溶 性砷的研究是很有必要的。 由于砷在物质中的含量很低，对仪器的灵敏度和检出限要求较高，故在选择 仪器是应尽量选择操作简便，灵敏度高，检出限低，稳定性好的仪器。原子荧光 光谱法从机理看属于 aes,在受激过程上与 aas 相同，它综合与发展了两项技术， 兼具两者的优点，并克服它们的不足，再与氢化物发生法连用，达到气液分离的 效果，在易形成氢化物的元素的测定中得到了广泛的应用。 本实验根据收集相关资料，先测定了在实验室条件下砷的仪器条件的优化， 然后设定仪器条件做出标准曲线，之后处理药品，最后测定中成药中砷的荧光值 并算出其中可溶性砷含量。 关键词:氢化物发生-原子荧光光谱法；中成药；可溶性砷；人工胃液 氢化物发生原子荧光光谱法测定中成药中砷以及仪器条件的优化 第 2 页 共 16 页 hg-afs determination of traditional chinese medicine and the instrument as condition optimizing abstract at present, to the number of various kinds and proprietary chinese medicine of heavy metals in standard also did not make clear a regulation, and the harm to heavy metal is always there, so we now need a large number of data, one for the existing proprietary chinese medicine of the perfect information, 2 it is to regulate the proprietary chinese medicine production after provides the basis. this thesis mainly is to use hg-afs determination of proprietary chinese medicine containing impurities several soluble arsenic content. arsenic is one of heavy metal, the content in the earths crust is not much, but widely exist in nature. the present study show that, according to the different forms of arsenic, toxic also makes a difference, and harmful to human body is mainly soluble arsenic. arsenic has both the medicine toxic, and can not be ignored the pharmacological function, so for the research of traditional chinese medicine soluble arsenic is very necessary. because in the material of arsenic content is very low, the sensitivity of the instrument and the detection limit the demand is higher, so while choosing instruments is choose as far as possible should be easy operation, high sensitivity, low detection limit, the stability is good instrument. atomic fluorescence spectrometry from mechanism see belong to aes, in stimulated process with aas the same, it comprehensive and development of two new technology, with the advantage of the two, and to overcome them insufficiency, again with hydride ed law, achieve the effect of gas and liquid separation, easy to form in the determination of the elements (in a wide range of applications. 第 3 页 共 16 页 this experiment according to collect relevant material, the first measure in the laboratory conditions of arsenic condition optimizing instrument, and then set a standard curve instrument conditions, and then deal with drugs, determination of arsenic in the last proprietary chinese medicine fluorescent value and figure out which soluble arsenic content. keywords: hg-afs ; proprietary chinese medicines; soluble arsenic; artificial gastric juice 氢化物发生原子荧光光谱法测定中成药中砷以及仪器条件的优化 第 4 页 共 16 页 第一章 氢化物发生-原子荧光光谱法基础知识 1.1 引言 目前，部分中成药配方雄黄含量高。雄黄是 砷 硫 化 物 矿 物 之 一 ， 主 成 分 为 二 硫 化 二 砷 (as2s2)， 并 夹 有 少 量 三 氧 化 二 砷 等 杂 质 1， 含 as 高 达 70.1%。 由于近几年发生了很多含雄黄的中成药中毒的事件 2-6，导致人们不能正确评价含 雄黄的药的价值。其实雄黄主要成分 as2s2 难溶于水，几乎不被机体吸收，其可 溶性的成份主要是 as2o3，毒性成分目前被认为是其中的可溶性砷盐部分。 虽说砷是重金属元素之一，但是砷同时作为人体必 需 微量元素，它对人体的 作用是不可替代的。根 据 动 物 实 验 资 料 提 出 ， 人 的 砷 需 要 量 为 6.25g/4.18mj 12.5g/4.18mj， 世 界 各 地 砷 的 摄 入 量 一 般 为 12 40g。 砷 含 量 较 低 ， 会 导 致 生 长 滞 缓 ， 怀 孕 减 少 ， 自 发 流 产 较 多 ， 死 亡 率 较 高 ； 砷 含 量 偏 高 ， 又 会 中 毒 。 所 以 对 砷 的 摄 入 量 控 制 是 很 必 须 的 。 正 是 由 于 中 成 药 中 雄 黄 的 高 含 量 与 被 人 体 吸 收 的 低 含 量 之 间 的 差 距 ， 说 明 雄 黄 进 入 人 体 后 ， 或 是 由 于 人 体 内 的 某 种 物 质 的 影 响 不 被 吸 收 ， 或 是 药 物 本 身 性 质 所 致 ， 这 种 不 确 定 性 就 是 我 们 研 究 的 方 向 。 本 实 验 以 含 雄 黄 的 药 为 切 入 点 ， 测 定 了 中 成 药 中 的 可 溶 性 砷 含 量 ， 以 及 在 人 工 模 拟 胃 液 中 可 溶 性 砷 含 量 ， 为 药 进 入 人 体 后 的 作 用 机 理 提 供 分 析 依 据 。 1.2 原 子 荧 光 光 谱 法 1.2.1 原 子 荧 光 光 谱 的 原 理 1.2.1.1 原 子 荧 光 光 谱 的 产 生 气 态 和 基 态 原 子 核 外 层 电 子 吸 收 了 特 征 频 率 的 光 源 辐 射 后 被 激 发 至 第 一 激 发 态 或 较 高 的 激 发 态 ， 在 瞬 间 又 跃 迁 回 基 态 或 较 低 能 态 。 若 跃 迁 过 程 以 光 辐 射 的 形 式 发 射 出 与 所 吸 收 的 特 征 频 率 相 同 或 不 同 的 光 辐 射 ， 即 产 生 原 子 荧 光 。 原 子 荧 光 是 光 致 发 光 ， 当 光 辐 射 停 止 激 发 时 ， 荧 光 发 射 就 立 即 停 止 。 1.2.1.2 原 子 荧 光 光 谱 的 类 型 原 子 荧 光 可 分 为 共 振 荧 光 、 非 共 振 荧 光 、 敏 化 荧 光 和 和 多 光 子 荧 光 等 多 种 类 型 。 第 5 页 共 16 页 1.2.2 原 子 荧 光 光 谱 仪 原 子 荧 光 光 谱 法 的 仪 器 装 置 主 要 由 三 部 分 组 成 ： 激 发 光 源 、 原 子 化 器 、 和 检 测 部 分 。 7 1.3 氢 化 物 发 生 法 1.3.1 氢 化 物 发 生 概 述 大 部 分 的 原 子 光 谱 仪 器 均 设 计 在 可 见 光 范 围 ， 而 as、 sb、 bi、 ge、 sn、 pb、 se、 te 八 种 元 素 的 激 发 谱 线 大 都 落 在 紫 外 区 间 ， 而 且 一 些 仪 器 测 定 时 有 背 景 干 扰 ， 因 此 测 量 灵 敏 度 较 低 。 as、 sb、 bi、 ge、 sn、 pb、 se、 te 八 种 元 素 的 氢 化 物 都 有 有 挥 发 性 ， 且 沸 点 都 低 于 0 ， 见 表 1。 表 1 氢 化 物 沸 点 /k ash3 sbh3 bih3 geh4 teh2 pbh4 snh4 h2se 218 226 251 184.5 269 260 221 231 氢 化 物 发 生 进 样 方 法 ， 是 利 用 某 些 能 产 生 出 初 生 态 氢 的 还 原 剂 或 化 学 反 应 ， 将 样 品 溶 液 中 分 析 元 素 还 原 为 挥 发 性 共 价 氢 化 物 ， 然 后 借 助 载 气 将 其 导 入 原 子 光 谱 分 析 系 统 进 行 测 量 的 方 式 8。 是 测 定 这 些 元 素 的 最 佳 样 品 引 人 方 式 。 1.3.2 氢 化 物 发 生 方 法 氢 化 物 发 生 方 法 包 括 金 属 一 酸 还 原 体 系 ， 硼 氢 化 钠 （ 钾 ） 一 酸 还 原 体 系 ， 碱 性 模 式 还 原 体 系 以 及 电 解 还 原 法 四 种 。 其 中 ， 本 实 验 采 用 硼 氢 化 钠 （ 钾 ） 一 酸 还 原 体 系 ， 其 氢 化 物 形 成 原 理 为 ： nabh4+3h2o+hcl h3bo3+nacl+8h 氢化物发生原子荧光光谱法测定中成药中砷以及仪器条件的优化 第 6 页 共 16 页 8h +em+ ehn+h2(过 剩 ) 1.3.3 氢 化 物 发 生 法 的 特 点 1.3.3.1 氢 化 物 发 生 进 样 方 法 的 主 要 优 点 1 分 析 元 素 能 够 与 可 能 引 起 干 扰 的 样 品 基 体 分 离 ， 消 除 了 干 扰 。 2 与 溶 液 直 接 喷 雾 进 样 相 比 ， 氢 化 物 法 能 将 待 测 元 素 充 分 预 富 集 ， 进 样 效 率 近 乎 100%。 3 连 续 氢 化 物 发 生 装 置 宜 于 实 现 自 动 化 。 4 氢 化 物 发 生 法 是 价 态 金 属 的 有 效 分 离 与 富 集 的 手 段 ， 不 同 价 态 的 元 素 氢 化 物 发 生 实 现 的 条 件 不 同 ， 可 进 行 价 态 分 析 。 1.3.3.2 氢 化 物 发 生 法 的 缺 点 1 不 能 分 析 不 形 成 氢 化 物 或 者 挥 发 性 化 合 物 的 元 素 。 2 这 种 方 法 存 在 液 相 干 扰 和 气 相 干 扰 。 1.4 砷 的 测 定 方 法 测 定 砷 的 方 法 有 很 多 ， 有 分 光 光 度 法 （ 包 括 二 乙 基 二 硫 化 氨 基 甲 酸 银 比 色 法 (agddc) 、砷 化 氢 一 钼 蓝 光 度 法 、 砷 斑 法 、 催 化 动 力 学 光 度 法 、 阻 抑 动 力 学 光 度 法 、 荧 光 猝 灭 法 ） ， 光 谱 法 （ 包 括 氢 化 物 发 生 一 原 子 荧 光 光 谱 法 、 原 子 吸 收 光 谱 法 、 电 感 耦 合 等 离 子 体 发 射 光 谱 法 、 x-射 线 荧 光 法 (xrf)， 电 感 耦 一 合 等 离 子 体 质 谱 法 (icpms)， 电 化 学 法 ， 中 子 活 化 分 析 法 等 9。 各 种 方 法 都 有 自 身 的 优 点 和 缺 点 。 其 中 ， 原 子 荧 光 法 是 20 世 纪 80 年 代 以 来 发 展 较 快 的 一 种 痕 量 分 析 技 术 ， 其 中 氢 化 物 发 生 -原 子 荧 光 光 谱 法 结 合 了 原 子 发 射 光 谱 法 与 原 子 吸 收 光 谱 法 的 优 点 ， 具 有 快 速 准 确 、 操 作 简 便 、 选 择 性 好 、 灵 敏 度 高 、 线 性 范 围 宽 以 及 费 用 低 等 优 点 。 1.5 原 子 荧 光 光 谱 定 量 分 析 1.5.1 测 定 方 法 原 子 荧 光 光 谱 法 的 测 定 方 法 包 括 标 准 曲 线 法 ， 标 准 加 入 法 7。 标 准 曲 线 法 即 在 分 析 元 素 的 线 性 范 围 内 ， 配 置 系 列 浓 度 的 标 准 溶 液 ， 在 最 佳 的 分 析 条 件 下 测 定 系 列 浓 度 标 准 溶 液 的 荧 光 值 ， 采 用 最 小 二 乘 法 回 归 if-c 线 性 方 程 或 绘 制 if-c 标 准 曲 线 图 。 然 后 在 相 同 分 析 条 件 下 测 量 样 品 溶 液 的 荧 光 强 度 ， 求 出 样 品 溶 液 的 浓 度 。 此 法 适 用 于 基 体 影 响 较 小 的 样 品 溶 液 的 分 析 ； 且 在 满 足 一 定 质 量 控 制 要 求 时 ， 一 条 标 准 曲 线 可 以 同 时 进 行 多 个 样 品 分 析 。 第 7 页 共 16 页 标 准 加 入 法 即 配 置 含 有 等 量 样 品 溶 液 的 系 列 浓 度 的 标 准 加 入 溶 液 ， 测 定 系 列 浓 度 标 准 加 入 溶 液 的 荧 光 值 ， 采 用 最 小 二 乘 法 回 归 if-c 线 性 方 程 或 绘 制 if-c 标 准 曲 线 图 ， 并 外 推 到 荧 光 值 为 零 时 与 浓 度 轴 的 交 点 ， 即 为 样 品 溶 液 的 浓 度 。 此 法 适 用 于 基 体 影 响 较 大 或 无 法 确 证 的 样 品 溶 液 的 分 析 ， 一 条 标 准 加 入 曲 线 只 能 进 行 一 个 样 品 分 析 。 第二章 氢化物发生-原子荧光光谱法测定中成药 中砷含量以及仪器条件的优化 2.1 仪器与试药 2.1.1 仪器 afs-8220 原子荧光光度计（北京吉天仪器有限公司） ，配有计算机处理系统； 砷空心阴极灯（北京有色金属研究总院） ；thz-82 水浴恒温振荡器（金坛市汉康 电子有限公司） ；tg20 台式高速离心机（长沙迈佳森仪器设备有限公司） ； auy220 电子天平；优普 ups 系列纯水系统（成都） 2.1.2 试剂 超纯水（电阻率为 182mcm） ；1000ug/ml as 单元素标准溶液 gbw08611(中国计量科学研究院)；胃蛋白酶；硫脲（分析纯） ；抗坏血酸（分析 纯） ；硼氢化钠（优级纯） ；氢氧化钠（分析纯） ；盐酸（优级纯） ；钢瓶氩气 9999。实验所用器皿用前需用 5%硝酸浸泡 24h 后，用超纯水洗净备用。 1.5%（ v/v）载液：取 15ml 浓盐酸到 1l 容量瓶中，稀释到刻度，摇匀 预还原剂:称取硫脲 5.0 g,抗坏血酸 5.0 g,用去离子水溶解 ,定容至 100 ml(现配 现用) 硼氢化钠溶液:称取硼氢化钠 3.0 g 加入溶解了 0.8 g 氢氧化钠的水溶液中,定 容至 200 ml,配成 15 gl-1 硼氢化钠溶液（现配现用） 稀盐酸：取 23.4ml 浓盐酸于 100ml 容量瓶中，稀释，定容到刻度，摇匀 人工胃液 10：取 16.4ml 稀盐酸于 1l 烧杯中，加入 800ml 超纯水与 10g 胃 蛋白酶，使之溶解，转入 1l 容量瓶中，洗涤烧杯 2-3 次，并将洗涤液也转入容 量瓶中，稀释到刻度，摇匀 氢化物发生原子荧光光谱法测定中成药中砷以及仪器条件的优化 第 8 页 共 16 页 不加胃蛋白酶的人工胃液：取 16.4ml 稀盐酸于 1l 容量瓶中，稀释到 1l， 摇匀 2.1.3 药品 牛黄解毒片 1（贵州百灵） ；牛黄解毒片 2（云南） ；牛黄解毒片 3（四川） ； 六神丸（苏州） 2.2 仪器工作条件 参考文献 11-14，在我们实验环境下对仪器的负高压，灯电流，原子化器高度， 载气流量，屏蔽器流量等进行测定，优化后的仪器条件见表 2 表 2 仪器条件 as 负高压/v 270 灯电流/ma 60 原子化器高度 /mm 8 载气流量/(ml/min) 300 屏蔽器流量/(ml/min) 800 度数时间 /s 12 延迟时间 /s 0.5 读数方式 peak area 测定方法 std.curve 注入量/ml 0.5 2.3 标准曲线及检出限 依次移取质量浓度为 100ug/l 的砷标准溶液 0、1、2、3、4、5、6ml 到一系 列 50ml 容量瓶中，加入 0.75ml 浓盐酸，再加入 10ml 现配的硫脲（50g/l）与 抗坏血酸（50g/l）混合液，用超纯水定容到刻度，摇匀，静置 15min 左右，在 找出的最优仪器条件下测定 11 次试剂空白和砷标准液的荧光值。 2.4 可溶性砷测定的样品处理 先称每颗牛黄解毒片重量，然后取 10 片,研细, 按 2-3 片/次精密称取药量(根 据处方每次口服 23 片/次 ,小片 3 片,大片 2 片),置于 1000ml 带塞的玻璃瓶中,分 别加入水、不加胃蛋白酶的人工胃液、人工胃液各 670 ml ，放入水浴恒温振荡 器中，在 37条件下来回振荡 5h,振荡频率不宜过快。取出,用离心机分离（条件: 第 9 页 共 16 页 800r/min，20min）, 取出,装入容量瓶中。从中取出 2.5ml，加入 0.375ml 浓盐酸， 再加入 5ml 预还原剂，稀释到 25ml，作为待测液，同样设置试剂空白。 15-17 2.5 样品测定 从中取出 2.5ml，加入 0.375ml 浓盐酸，再加入 5ml 预还原剂，稀释到 25ml，摇匀静置 15min 左右后上机测定，同样设置试剂空白。 第三章 结果与分析 3.1 仪器条件的优化 3.1.1 灯电流的选择 空心阴极灯电流与荧光信号强度有一定关系。在一定范围内灯电流增大，测 得的荧光信号越强，灵敏度增高，但灯电流过大会降低灯的使用寿命。本实验测 定了 20 ma 150 ma 砷的灯电流，由图 1 可以看出，在一定的范围内荧光强度 随灯电流的增加而增大，在 60ma 80 ma 之间相对平稳，综合考虑到空白值对 实验的影响，灯电流选择 70m。 图 1 荧光强度-灯电流 3.1.2 光电倍增管负高压的选择 光电倍增管( pmt) 负高压的高低与测定的荧光强度有密切的关系，在一定 范围内，荧光强度随负高压增加而增大，但负高压太高会缩短光电倍增管的使用 寿命且增加噪声，影响方法的稳定性。本实验测了在 220v-320v 范围内的负高压， 如图 2 所示，负高压在 250-270v 之间荧光强度比较稳定，故选择 260v。 0 2000 4000 6000 8000 10000 0 20 40 60 80 100 120 140 160 灯 电 流 荧光 强度 空 白4ug/l的 砷 溶 液 氢化物发生原子荧光光谱法测定中成药中砷以及仪器条件的优化 第 10 页 共 16 页 图 2 as-负高压对荧光强度的影响 3.1.3 原子化器高度的选择 原子化器高度影响灵敏度和测量精度，原子化器高度过低，将导致气相干扰， 使空白应光强度增高，检出限变差；原子化器高度过高，灵敏度降低，平行性不 好。实验做了 2mm-15mm 的高度范围，如图 3 从 7mm 开始趋于稳定，综合考虑 了灵敏度、信噪比，实验选用原子化器高度为 8mm。 图 3 as-原子化器高度对荧光强度的影响 3.1.4 载气流量选择 载气流量的大小在反应条件一定的情况下对氩氢火焰的稳定性，测定荧光强 度的大小有很大的影响，载气流量小，氩氢火焰不稳定，测定的重现性差；载气 流量大，原子蒸气被稀释，测定的荧光信号降低，同时也造成氩气浪费。由图 4 可知，随载气流量增大，荧光值降低，考虑到对氩氢火焰的稳定性，实验选择 300ml/min。 0 5000 10000 15000 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 负 高 压 荧光 强度 空 白 4ug/l的 砷 溶 液 0 5000 10000 15000 20000 25000 30000 0 2 4 6 8 10 12 14 16 原 子 化 器 高 度 /mm 荧光 强度 空 白4ug/l砷 标 准 液 第 11 页 共 16 页 图 4 as-载气流量对荧光强度的影响 3.1.5 屏蔽气流量的选择 屏蔽气是氩氢火焰的外围保护气，起到保持火焰型状稳定，防止原子蒸气被 周围的空气中的氧气氧化。屏蔽气流量小，氩氢火焰火苗肥大，而且跳动、不稳 定。屏蔽气流量大，火焰细长，信号不稳定且灵敏度降低.本实验做了 500ml/min- 1200ml/min 范围的屏蔽气流量实验，基本稳定，考虑到火焰的稳定性与灵敏度， 选择中间一点的屏蔽气流量为 800ml/min。如图 5 图 5 as-屏蔽器流量对荧光强度的影响 3.1.6 载流液和介质纯度及浓度的选择 本实验分别用 5%优级纯和分析纯的盐酸做载液对空白溶液随灯电流变化做 曲线，由图 6 看分析纯的酸空白的荧光强度随灯电流的变化很大，当灯电流变到 70 左右时，此酸空白的荧光强度就达到了 4000 左右，空白荧光值过高，不适合 做载液和介质。而优级纯的酸空白随灯电流的变化不大如，灯电流从 20ma- 150ma，荧光强度才从 100-3000 左右，故应选用优级纯的酸来做实验的载液与介 质。 0 500 1000 1500 2000 0 200 400 600 800 1000 1200 载 气 /ml/min 荧光 强度 空 白 4ug/l砷 标 准 液 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 屏 蔽 气 流 量 /ml/min 荧光 强度 空 白4ug/l砷 标 准 液 氢化物发生原子荧光光谱法测定中成药中砷以及仪器条件的优化 第 12 页 共 16 页 在 12 个 25 ml 容量瓶中均加入 1ml 1ug/ml 砷标准液，分别取 0.125ml.0.25 ml.0.375 ml.0.5 ml.0.75 ml.1 ml.1.25 ml.1.5 ml.1.75ml .2 ml.2.25 ml.2.5 ml 作为介质， 加入预还原剂，同时以上述不同浓度酸作为载液，测定荧光强度随不同浓度酸变 化。实验表明酸浓度从 0.5%v/v-1.5%v/v 时，荧光值变化很大，从 1.5%v/v- 10%v/v，荧光值变化不大，考虑到酸对仪器管道有腐蚀作用，故选择 1.5%v/v 盐 酸作为载液和介质。如图 7 图 6 优级纯与分析纯的酸对灯电流荧光强度的影响 图 7 不同浓度酸对荧光强度的影响 3.1.7 还原剂浓度的选择 3.1.7.1 氢氧化钠浓度的选择 氢氧化钠的作用是作硼氢化钠的稳定剂，浓度过低，起不到稳定的效果，浓 度过大，又会使酸浓度降低，本实验做了 0.2%-0.8%（w/v）范围的浓度，影响不 大，考虑到实验的酸浓度低于本实验所用酸浓度，故考虑用 0.4%（w/v）的氢氧 化钠浓度。 0 2000 4000 6000 8000 10000 12000 14000 16000 0 50 100 150 200 灯 电 流 荧光 强度 分 析 纯 的 酸 对 灯 电 流 的 荧 光 强 度 的 影 响 优 级 纯 的 酸 对 灯 电 流 的 荧 光 强 度 的 影 响 0 500 1000 1500 2000 2500 0 2 4 6 8 10 12 不 同 浓 度 酸 /v/v 荧光 强度 不 同 浓 度 酸 第 13 页 共 16 页 图 8 氢氧化钠浓度对荧光强度的影响 3.1.7.2 硼氢化钠浓度的选择 硼氢化钠的作用生成砷化氢气体和影响氩氢火焰的质量，硼氢化钠浓度过低， 起不到还原的作用，氩氢火焰荧光信号会受影响，过高会产生大量的氢气，稀释 了氢化物的浓度，使灵敏度下降。实验测定了 0.5%-3.5%（w/v）范围的硼氢化钠 对荧光强度的影响，在 1.5%（w/v）时荧光强度最好，故选择硼氢化钠浓度为 1.5%（ w/v）可以得到较好的结果。 图 9 硼氢化钠浓度对荧光强度的影响 3.2 标准曲线和线性范围 在上述仪器条件下，砷在 0g / l 12.0 g / l 范围内，线性回归方程 y = 390.9x + 132.1，相关系数 r = 0.9994，用仪器连续测量空白溶液 11 次，算出空 白值的标准偏差，然后，根据公式 qm=3sbl/s(其中 qm 表示最低检测量，s bl 是空白 0 500 1000 1500 2000 2500 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 氢 氧 化 钠 /（ w/v） 荧光 强度 空 白4ug/l砷 标 准 液 0 500 1000 1500 2000 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 硼 氢 化 钠 浓 度 /(w/v) 荧光 强度 空 白 4ug/l砷 标 准 液 氢化物发生原子荧光光谱法测定中成药中砷以及仪器条件的优化 第 14 页 共 16 页 信号的绝对标准差，s 表示灵敏度 )，得出砷的检出限为： 0.011ug/l。 图 10 as-标准曲线 3.3 样品测定结果 按 2.4-2.5 方法对几个药品在水、不加胃蛋白酶的人工胃液、人工胃液中可溶 性砷含量,发现含雄黄的中成药中可溶性砷含量都较高，而且不同厂家生产的同一 中成药中可溶性砷含量有很多差异，测定结果(n=3) 见表 3 表 3 样品名称 水/ug/g 不加胃蛋白酶的人工胃液/ug/g 人工胃液/ug/g 牛黄解毒片 1 20.91 19.12 21.43 牛黄解毒片 2 77.19 76.48 85.39 牛黄解毒片 3 73.14 74.15 69.00 六神丸 115.29 121.67 131.13 结 论 本实验用氢化物发生-原子荧光光谱法，模拟人体胃环境测定了四个中成药中 可溶性砷的含量，结果表明砷含量都较高。牛黄解毒片是日常生活中常备药，很 多人都服用的，但是中毒的却是个别例子，这说明人体的砷中毒是与人食入的总 可溶性砷有关，而非中成药一个原因所致。测得几种中成药中砷含量都超出人体 所需量