高效液相色谱法测定水蜜桃中维生素和有机酸的含量 毕业论文.doc

高效液相色谱法测定水蜜桃中维生素和有机酸的含量 摘摘 要要 本文选用无锡水蜜桃的两个品种阳山红花和小湖景为样，以高效液相色谱法为主 要检测手段，对水蜜桃中维生素（vb1、vb2、vc、vd、ve、烟酸）和有机酸（苹果酸、 柠檬酸、琥珀酸）的含量进行测定，并对实验结果进行分析比较，使人们对阳山红花 和小湖景两个品种水蜜桃的几种营养成分含量有更准确的认识，同时也为以后人们进 一步研究水蜜桃的营养价值奠定了基础。文章结果表明：小湖景所含的 vc和尼克酸的 含量均为阳山红花的 1.5 倍；而两者的 vb1 和 vb2含量则差不多，小湖景中 vb1 的含 量为阳山红花的 0.95 倍，vb2的含量为阳山红花的 0.93 倍。小湖景的苹果酸含量为阳 山红花的 1.6 倍；而柠檬酸含量则相反，阳山红花是小湖景的 2.4 倍；两者琥珀酸含量 相当，小湖景中琥珀酸的含量为阳山红花的 1.07 倍。脂溶性维生素 vd、ve含量，两 者含量都很低。 关键词：关键词：水蜜桃；高效液相色谱法；维生素；有机酸 目目 录录 引 言.1 1 材料与方法.3 1.1 实验原料和仪器.3 1.2 实验方法 3 1.2.1 样品前处理.3 1.2.2 标准溶液及标准曲线的制备4 1.2.3 色谱条件4 1.2.4 实验操作步骤5 2 结果与分析6 2.1 标准曲线 6 2.1.1 水溶性维生素标准曲线6 2.1.2 有机酸标准曲线7 2.1.3 脂溶性维生素的标准曲线8 2.2 色谱图分析 9 2.2.1 水溶性维生素的色谱图9 2.2.2 水溶性维生素含量.11 2.2.3 有机酸的色谱图11 2.2.4 有机酸含量12 2.2.5 脂溶性维生素的色谱图13 2.2.6 脂溶性维生素含量14 3 全文总结.15 参考文献.17 第 1 页 引 言 阳山水蜜桃素有“果大色美、皮薄肉厚、汁多味甜、香气浓郁”的优点。果实细 腻、口感好、容易消化，适合于各种年龄层的人食用，更适宜中老年人、妇女、小孩 及体弱病人。水蜜桃有健美皮肤、清胃、润肺、祛痰利尿的功能；正如本草纲目 所叙：“桃可作脯食，益颜色，肺之果，肺病宜食之。 ” 水蜜桃种类较多，如大白凤、小白凤、湖景等。水蜜桃可分成早桃和晚桃。早桃 成熟期在六七月份，晚桃成熟期在七八月份。另外，具体的来看，阳山水蜜桃又有很 多品种。比如：黄狼桃，甘甜水少，肉皮分离；白花桃，色泽青白，肉质甜美；湖景 桃，为无锡水蜜桃金牌桃；朝晖桃，肉质清脆，果型较大；白凤桃，色泽鲜艳，桃香 甜淡；晚朝阳，口感甘甜，皮肉联体；雪蜜桃，皮薄汁浓，味道鲜美；朝阳桃，口感 甘甜，保存期长；雨花露，果型均匀，色泽光润；等等。阳山水蜜桃在国内外声名赫 赫，先后获得“江苏省重点名牌产品”、“中国名牌产品”、“中国绿色食品”、 “中国水蜜桃之乡”、“江苏省水果十大果品之首”、“江苏省著名商标”等许多荣 誉称号。被称为中国水蜜桃之乡的阳山镇，地处江南水乡，南临美丽的太湖，北靠京 杭大运河，历史悠久，人文荟萃，经济发达，环境优美，水陆交通便捷，旅游资源丰 富1。阳山与山东肥城、河北深州、浙江奉化并称为全国四大传统产桃区。阳山的水蜜 桃属于软桃那一种，以果型大、色泽美、香气浓、皮薄肉厚、汁多味甜、风味独特而 在国内外名闻遐迩。阳山水蜜桃性温，味甘酸，是消暑止渴、清热润肺的佳品，素有 “肺之果”之称2。在烈日炎炎的盛夏，正是品尝水蜜桃的最佳时节。 成熟的水蜜桃略呈球形，表面裹着一层短短的绒毛，青里泛白，白里透红。一个 桃子一般重二百克，大的重 300 多克。水蜜桃皮很薄，果肉丰富，宜于生食，入口滑 润不留渣滓。刚熟的桃子硬而甜，熟透的桃子则软而多汁。这样的果品，对于老年人 和牙齿不大好的人来说，是难得的夏令珍品。 阳山水蜜桃含有多种营养成分，曾有数据显示，每百克水蜜桃可食部分含有蛋白 质 0.8 g，脂肪 0.1 g，碳水化合物 7 g，粗纤维 4.1 g，钙 8 mg，磷 20 mg，铁 1 mg 胡 萝卜素 0.01 mg，尼克酸 0.7 mg，维生素 c 6 mg。营养学家在分析比较后，确定其中蛋 白质的含量比苹果、葡萄高一倍，比梨多七倍；铁的含量比苹果多三倍，比梨多五倍。 因此在国内外水果市场上被称为“果中皇后” 。 第 2 页 从水蜜桃目前的市场来看，其市场潜力也很大。阳山水蜜桃主要采用统一商标、 统一包装、运往上海、南京、无锡等城市大超市（如麦德隆、家乐福、苏果、天惠） 销售。在解决了水蜜桃贮运保鲜问题后，近年来，阳山水蜜桃已经打通出口环节，把 水蜜桃销往泰国、新加坡、日本等地。据阳山镇副镇长、镇桃农协会会长周九兴介绍， 销往泰国的阳山水蜜桃市场价为每公斤 289 泰铢(折合人民币 65 元)。比国内市场售价 高出 6 倍左右，最好的阳山水蜜桃目前在泰国卖到 48 元一只，而且供不应求3。 本文选用水蜜桃的两个品种阳山红花和小湖景为样，以高效液相色谱法为主要检 测手段，对水蜜桃中维生素（vb1、vb2、vc、vd、ve、烟酸）和有机酸（苹果酸、柠檬 酸、琥珀酸）的含量进行测定，并对实验结果进行分析比较，使人们对阳山红花和小 湖景两个品种的水蜜桃的几种营养成分含量有更准确的认识，同时也为以后人们进一 步研究水蜜桃的营养价值奠定基础。 第 3 页 1 材料与方法 1.1 实验原料和仪器 原料原料：水蜜桃阳山红花（阳山水蜜桃试验基地，产于无锡） 水蜜桃小湖景（阳山镇花园村俞化，产于无锡） 试剂试剂：分析纯磷酸（上海化学试剂有限公司） 、色谱纯乙腈（山东禹王实业有限公 司） 、色谱纯甲醇（山东禹王实业有限公司） 、ph2.0 磷酸盐缓冲液（h3po4-nah2po4） 、 纯净水（娃哈哈集团） 、分析纯焦性没食子酸（天津市科密欧化学试剂开发中心） 、分 析纯氢氧化钾、分析纯石油醚（上海化学试剂有限公司） 、分析纯无水乙醇（上海中试 化工总公司） ；流动相经 0.45m 滤膜过滤。 标准品标准品:烟酸(上海源聚生物科技有限公司)、抗坏血酸/vc（天津市科密欧化学试 剂开发中心） 、vitamin b1(南京创鑫生物技术有限公司)、vitamin b2（博泰生物技术有 限公司） 、有机酸（中国药品生物制品检定所） 、vitamin d(中国药品生物制品检定所)、 vitamin e（中国药品生物制品检定所） 。 仪器仪器：微孔滤膜/混合纤维膜（上海市新亚净化器件厂） 注射器（金玻璃注射器 200ml） 打浆机（多功能 878-b，金坛市富华仪器有限公司） 离心机(型号 3k15，博励行仪器有限公司) 高效液相色谱仪（agilent1100 型，二级管阵列检测器） 超声波清洗器（型号 up3200h，熊猫集团南京电子计量有限公司） 水浴锅（hh-2，常州国华电器有限公司） 旋转蒸发仪（re-52aa，上海亚蒸生化仪器厂） 1.2 实验方法 1.2.1 样品前处理 1.2.1.1 水溶性维生素和有机酸测定的样品前处理 水蜜桃，洗净，取样 200g打浆转移至离心管中，转速 3000r/min，室温下 第 4 页 离心 15min吸取上层清液定容至 200ml取 5ml 以 0.45m 滤膜过滤置于冰 箱保藏，待测4。 1.2.1.2 脂溶性维生素测定的样品前处理 适量样品，加入 40ml 的 16g/l 焦性没食子酸和 20ml 50%的氢氧化钾，于 80水 浴 30min（避光） ；取出后加入等体积的石油醚萃取 3 次（可先离心） ，合并上层石油 醚相，转移至旋转蒸发仪（135）蒸干后，用 10ml 甲醇分三次溶解，再以 0.45m 滤膜过滤，于冰箱保藏，待测。 1.2.2 标准溶液及标准曲线的制备 1.2.2.1 水溶性维生素和有机酸标准曲线的制备 准确称取各标准品适量(精确至 0.1 mg)，用超纯水超声波溶解并定容至 100ml 容 量瓶中，作为各标准样母液；临用时稀释为 7 个浓度梯度溶液；其中，有机酸母液浓 度为 2.5mg/ml，稀释后梯度浓度为 1、0.5、0.25、0.1、0.05、0.025、0.01，单位为 mg/ml；vb1、vc和烟酸的母液浓度为 1mg/ml，vb2的母液浓度则为 0.2mg/ml。 1.2.2.2 脂溶性维生素标准曲线的制备 准确称取各标准品适量(精确至 0.1 mg)，用超纯水超声波溶解并定容至 100ml 容 量瓶中，作为各标准样母液(2.5mg/ml)；临用时稀释为 5 个浓度梯度溶液，为 1、0.5、0.025、0.01、0.005，单位为 mg/ml。 1.2.3 色谱条件 1.2.3.1 水溶性维生素和有机酸的色谱条件 色谱柱：美国 agilent 公司生产的 zorbaxsb-c18column rt 250mmx4.6mm，填 料直径为 5m；柱温为 28。 梯度洗脱：vb1、vb2、vc和烟酸采用梯度洗脱，流动相5为：(50mmol/l)见表 1。 有机酸流动相6为甲醇：h3po4-nah2po4缓冲液(0.01mol/l，ph=2.0 ) (2:98)，使用前均 用 0.45m 滤膜过滤。 第 5 页 表1 维生素测定所用的流动相及比例 磷酸乙腈 0min100%0% 6min60%40% 流速均为：1ml/min；进样量 20l。 检测波长：vb1检测波长为 270nm，有机酸检测波长为 210nm，其余为 254nm。 1.2.3.2 脂溶性维生素的色谱条件 色谱柱7：美国 agilent 公司生产的 zorbaxsb-c18 column rt 250mmx4.6mm， 填料直径为 5m；柱温为 28。 流动相：流动相为甲醇。 流速：流速均为 1ml/min；进样量 20l。 检测波长：vd检测波长为 265nm、ve检测波长为 290nm。 1.2.4 实验操作步骤 1.2.4.1 水溶性维生素和有机酸测定的操作步骤 前处理： 取两个品种的水蜜桃样品阳山红花和小湖景各适量，编号，洗净，用不锈钢刀将 可食部分切成适当大小的块状，充分混匀后，按四分法取样 200g，分别放入组织捣碎 机中打成匀浆；转移至离心管中，转速 3000r/min，室温下离心 15min；吸取上层清液 定容至 200ml，取其中 5ml 以 0.45m 滤膜过滤，置于冰箱保藏，待测。 检测：高效液相色谱仪检测。 1.2.4.2 脂溶性维生素测定的操作步骤 前处理： 取水蜜桃样品两个品种阳山红花和小湖景适量，编号，洗净，用不锈钢刀将可食 部分切成适当大小的块状，充分混匀后，按四分法取样 100 至 200g，各加入 40ml 的 流 动 相 时 间 第 6 页 16g/l 焦性没食子酸和 20ml 50%的氢氧化钾，于 80水浴 30min（避光） ；取出后各 加入等体积的石油醚萃取 3 次（可先离心） ，合并上层石油醚相，分别转移至旋转蒸发 仪（135）蒸干后，用 10ml 甲醇分三次溶解，再以 0.45m 滤膜过滤，于冰箱保藏， 待测。 检测：高效液相色谱仪检测。 2 结果与分析 2.1 标准曲线 2.1.1 水溶性维生素标准曲线 水溶性维生素标准曲线见表 2 和图 1。 vb1 y=40234x+98.916 r2 =0.9993 0.50.0025mg/ml vb2 y=40723x+154.15 r2 =0.9968 0.20.0005mg/ml vc y=39719x+69.631 r2 =0.9999 0.50.0025mg/ml 尼克酸 y=28254x+31.70 r2 =0.9998 0.50.0025mg/ml 表 2 水溶性维生素标准曲线浓度记录 浓度 mg/mlvcvb1vb2尼克酸 1 0.519873.119995.314080.2 0.2510059.910567.87215.4 0.28157.2 0.14141.94216.74457.72968.7 0.052136.02119.11418.7 0.021224.8 0.0251056.01075.6737.2 0.01421.0435.4627.3274.6 0.005208.0210.1323.1130.9 0.002128.7 0.002596.592.057.3 0.00166.6 0.000532.6 第 7 页 y = 39719x + 69.631 r2 = 0.9999 y = 40234x + 98.916 r2 = 0.9993 y = 28254x + 31.737 r2 = 0.9998 y = 40723x + 154.15 r2 = 0.9968 0 5000 10000 15000 20000 25000 30000 35000 40000 45000 00.511.5 vc vb1 尼克酸 vb2 线性 (vc) 线性 (vb1) 线性 (尼克酸) 线性 (vb2) 图 1 水溶性维生素标准曲线 2.1.2 有机酸标准曲线 有机酸标准曲线见表 3、表 4 和图 2。 表 3 有机酸标准曲线方程 方 程相关系数线性范围 琥珀酸 y=1790.4x+8.7663r2 =1 2.50.001mg/ml 柠檬酸 y=1041.8x+10.858r2 =0.9998 2.50.001mg/ml 苹果酸 y=954.78x+9.691r2 =0.9997 2.50.001mg/ml 表 4 有机酸标准曲线浓度记录 浓度 mg/ml苹果酸柠檬酸琥珀酸 2.52384.02602.44476.2 1.0990.11078.01813.6 0.5499.8546.1916.7 0.25251.3276.0460.8 0.1100.6110.0185.5 0.0550.155.493.4 0.02525.227.945.4 0.0110.911.518.8 第 8 页 y = 954.7x + 9.691 r = 0.999 y = 1041.x + 10.85 r = 0.999 y = 1790.x + 8.766 r = 1 0 1000 2000 3000 4000 5000 0123 峰面积 浓度(mg/ml) 苹果酸 柠檬酸 琥珀酸 线性 (苹果酸) 线性 (柠檬酸) 线性 (琥珀酸) 图 2 三种有机酸标准曲线 2.1.3 脂溶性维生素的标准曲线 脂溶性维生素（维生素 d、维生素 e）标准曲线见表 5，图 3。 vd y=61968x+58.454 r2 =0.9902 0.0250.005mg/ml ve y=25663x+33.692 r2 =0.9924 0.0250.005mg/ml 表 5 vd、ve标准曲线浓度记录 y = 61968x + 58.45 r = 0.990 y = 25663x + 33.69 r = 0.992 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 00.010.020.03 vd ve 线性 (vd) 线性 (ve) 图 3 vd、ve标准曲线 浓度 vdve 0.0251589.9668.8 0.01749.2316.2 0.005315142.6 第 9 页 2.2 色谱图分析 2.2.1 水溶性维生素的色谱图 2.2.1.1 vb1液相色谱图 图 4、图 5 为无锡水蜜桃阳山红花和小湖景两个样品 vb1的液相色谱图。 min02468 mau 0 20 40 60 80 100 120 dad1 e, sig=270,4 ref=360,100, tt (lxlpure07072624.d) 2.272 3.096 3.385 3.525 4.941 5.108 5.328 5.623 5.907 6.335 6.500 6.827 7.015 7.202 7.510 7.611 7.840 8.142 8.367 8.678 9.147 图 4 阳山红花 vb1液相色谱图 min02468 mau 0 20 40 60 80 100 120 dad1 a, sig=270,4 ref=360,100, tt (lxlpure07072624.d) 2.272 2.397 3.096 3.385 3.525 4.067 4.942 5.341 5.629 5.907 6.330 6.497 6.822 7.204 7.510 7.612 7.853 8.186 8.373 8.677 9.147 图 5 小湖景 vb1液相色谱图 2.2.1.2 vb2、vc和尼克酸的液相色谱图 图 6、图 7 是无锡水蜜桃阳山红花和小湖景 vb2、vc和尼克酸的液相色谱图。 第 10 页 min02468 mau 0 20 40 60 80 100 120 dad1 a, sig=254,4 ref=360,100, tt (lxlpure07072624.d) 2.272 2.397 3.096 3.385 3.525 4.067 4.942 5.341 5.629 5.907 6.330 6.497 6.822 7.204 7.510 7.612 7.853 8.186 8.373 8.677 9.147 图 阳山红花 vb2、vc和尼克酸的液相色谱图 min0246810 mau 0 50 100 150 200 250 300 dad1 a, sig=254,4 ref=360,100, tt (lxlpure07072623.d) 4.934 5.327 5.614 5.900 6.158 6.322 7.204 7.507 7.847 8.369 图 小湖景 vb2、vc和尼克酸的液相色谱图 从无锡水蜜桃阳山红花和小湖景两个品种样品的 vb1色谱图中我们可以看出，维生 素 b1 的出峰时间约为 4.941 分钟。对比图 6、图 7，无锡水蜜桃阳山红花和小湖景 vb2、vc 和尼克酸的液相色谱图，vb2出峰时间约为 7.204 分钟，vc出峰时间约为 7.850 分钟，尼克酸出峰时间约为 8.371 分钟。在 vb1色谱图中同样我们可以看出 vb2、vc和 尼克酸三种维生素在波长为 270nm 下的出峰情况，但对比图 6 和图 7 可以看出 vb2、vc 和尼克酸三种维生素在波长为 254nm 下出峰效果更好。实验中，笔者主要是根据出峰 情况来判定是否出现主成峰，其中主要看其出峰的时间与标准品进样得到的图谱进行 对比，进行初步判定。本次实验测定的项目并没有包含水蜜桃中所有的营养组分，比 如此部分我们所测定水溶性维生素是以 vc、 vb1 、vb2和尼克酸四种常见的水溶性维生 素为代表，而事实上水溶性维生素远不止这三种。以 b 族维生素为例，除了 vb1和 vb2 以外，还有 vb6、vb12、泛酸生物素和叶酸，另外不常见的胆碱和肌醇人们也习惯将其 第 11 页 划分为 b 族维生素。在水溶性维生素中，以 vb1、vb2、尼克酸（pp）和 vc对机体的代 谢调节最为重要。因此，在上述维生素液相色谱图中，我们还看到尾随的很多小峰， 可能就是其他水溶性维生素多种，但由于条件和时间的限制，本实验没有作进一步的 研究。 2.2.2 水溶性维生素含量 根据水溶性色谱图以及相应的标准曲线，得出阳山红花和小湖景两个水蜜桃品种 样品中维生素的含量，见表 6。 表 6 两个水蜜桃品种的维生素含量 从表 6 我们可以看出，阳山红花和小湖景两个水蜜桃品种中水溶性维生素含量存 在差异：小湖景所含的 vc和尼克酸的含量均为阳山红花的 1.5 倍；而两者的 vb1 和 vb2含量则差不多，小湖景中 vb1 的含量为阳山红花的 0.95 倍，vb2的含量为阳山红 花的 0.93 倍。 2.2.3 有机酸的色谱图 图 8、图 9 是无锡水蜜桃阳山红花和小湖景有机酸的液相色谱图。 min0123456789 mau 0 100 200 300 400 500 600 dad1 a, sig=210,4 ref=360,100, tt (lxlpure07072711.d) 2.333 2.754 3.273 3.882 4.055 5.378 6.297 6.926 图 阳山红花有机酸液相色谱图 vc （mg/100g） vb1 （g /100g） vb2 （g /100g） 尼克酸 （mg/100g） 小湖景3.2115.2511.270.375 阳山红花2.1416.1012.080.258 第 12 页 min02468 mau 0 100 200 300 400 500 600 dad1 a, sig=210,4 ref=360,100, tt (lxlpure07072713.d) 2.329 2.747 3.268 3.875 4.031 5.353 6.284 8.938 图 小湖景有机酸的液相色谱图 从图 8 和图 9 阳山红花和小湖景的有机酸液相色谱图，我们可以看出苹果酸、柠 檬酸和琥珀酸三者的出峰时间分别是 2.221、3.270 和 6.290 分钟左右，有机酸出峰时 峰形略显连带现象。水蜜桃中同时还含有酒石酸和乳酸等其他有机酸，所以有机酸色 谱图中出现了其他有机酸峰，由于实验条件和时间的限制本次实验并没有作进一步研 究进行一一鉴定。 2.2.4 有机酸含量 根据有机酸液相色谱图以及相应的标准曲线，得出阳山红花和小湖景两个水蜜桃 品种样品中有机酸的含量，见表 7。 表 7 两个水蜜桃品种的有机酸含量 根据表 7 结果，对比两个水蜜桃品种所含的三种有机酸，我们可以看出阳山红花 和小湖景两个水蜜桃品种中的有机酸和维生素含量存在差异：就有机酸中的苹果酸而 言，小湖景为阳山红花的 1.6 倍；而柠檬酸含量则相反，阳山红花是小湖景的 2.4 倍； 两者琥珀酸含量相当，小湖景中琥珀酸的含量为阳山红花的 1.07 倍。 苹果酸（mg/100g）柠檬酸（mg/100g）琥珀酸（mg/100g） 小湖景28918 78 阳山红花18143 73 第 13 页 2.2.5 脂溶性维生素的色谱图 2.2.5.1 阳山红花脂溶性维生素液相色谱图 min02468101214 mau 0 100 200 300 400 500 dad1 b, sig=265,4 ref=360,100, tt (lxlpure07072722.d) 1.878 2.137 2.227 2.329 2.583 2.788 2.896 3.113 3.487 3.660 3.985 4.153 4.443 5.034 5.875 6.790 8.446 9.919 11.441 12.823 14.246 图 10 阳山红花 vd液相色谱图 min02468101214 mau 0 20 40 60 80 100 120 140 dad1 a, sig=290,4 ref=360,100, tt (lxlpure07072722.d) 1.882 2.137 2.232 2.329 2.584 2.796 2.897 3.113 3.497 3.671 3.885 3.981 4.104 5.013 6.492 6.790 9.913 11.444 图 11 阳山红花 ve液相色谱图 2.2.5.2 小湖景脂溶性维生素液相色谱图 min024681012 mau 0 25 50 75 100 125 150 175 200 dad1 b, sig=265,4 ref=360,100, tt (lxlpure07072723.d) 1.909 2.087 2.183 2.317 2.587 2.776 2.908 3.116 3.501 3.561 3.740 3.804 3.971 4.336 6.818 7.474 9.943 10.776 12.856 图 12 小湖景 vd液相色谱图 第 14 页 min024681012 mau 0 5 10 15 20 25 30 35 dad1 a, sig=290,4 ref=360,100, tt (lxlpure07072723.d) 1.911 2.088 2.185 2.318 2.588 2.749 2.909 3.113 3.237 3.507 3.739 3.970 4.307 11.469 图 13 小湖景 ve液相色谱图 从 vd、ve色谱图中我们可以看出，该法测定 vd、ve两种脂溶性维生素的效果并 不是很好，尾随的杂质峰很多，而且峰与峰之间连在一起。笔者初步断定样品中还有 其他类似于 vd、ve结构的其他物质，由于条件和时间的限制，本实验没有作进一步的 研究。 目前，采用液相色谱法测定含脂溶性维生素样品中各种成分的含量，重要的是样 品的前处理。样品采集后要尽快地制备成适合色谱分析的样品，以便进行色谱分析， 尤其是含有脂溶性维生素的样品，如果不及时进行前处理，样品中的脂溶性维生素含 量会逐渐降低，这样会影响测定结果的准确度。经典的样品处理方法是用氯仿、乙腈、 石油醚、乙醚等做萃取液，经过样品与萃取液混合、ph 调节、组份萃取液的回洗、附 加的 ph 调节成二次溶剂分配完成萃取8。这种方法被广泛使用于组份的分离、提取或 纯化。 在进行高效液相色谱分析时，应根据所选样品和所测成分的不同选用合适的液相 色谱法。当所测样品不同时，选用的固定相、流动相和检测器也不相同。脂溶性维生 素常用的分离检测方法有液相色谱与紫外检测器(包括二极管阵列检测器 dad)、荧光 检测器、电化学检测器等9。 2.2.6 脂溶性维生素含量 根据脂溶性维生素液相色谱图以及相应的标准曲线，得出阳山红花和小湖景两个 水蜜桃品种样品中两种脂溶性维生素的含量，见表 8。 第 15 页 表 8 两个水蜜桃品种的脂溶性维生素含量 根据表 8，可以明显看出两个品种水蜜桃样品中所含脂溶性维生素 vd、ve含量很 低，小湖景 vd 0.0195 mg/100g，ve0.0117 mg/100g；阳山红花 vd 0.02 mg/100g，ve0.034 mg/100g。两者所含的 vd含量差不多，而 ve阳山红花则是小湖景 的 2.9 倍。一般来说，水果中营养成分主要看其水溶性维生素、有机酸和矿物质的含量， 而脂溶性维生素含量本身就很低，实验结果与此也符合，故最后可以考虑忽略水蜜桃 中脂溶性维生素（vd、ve）的含量不计。 3 全文总结 本文以无锡水蜜桃的两个品种阳山红花和小湖景为样，采用高效液相色谱法对水 蜜桃中维生素（vb1、vb2、vc、vd、ve、烟酸）和有机酸（苹果酸、柠檬酸、琥珀酸） 的含量进行测定。结果如下： 1、水溶性维生素：小湖景所含的 vc和尼克酸的含量均为阳山红花的 1.5 倍；而 两者的 vb1 和 vb2含量则差不多，小湖景中 vb1 的含量为阳山红花的 0.95 倍，vb2的 含量为阳山红花的 0.93 倍。 2、有机酸：就有机酸中的苹果酸而言，小湖景为阳山红花的 1.6 倍；而柠檬酸含 量则相反，阳山红花是小湖景的 2.4 倍；两者琥珀酸含量相当，小湖景中琥珀酸的含量 为阳山红花的 1.07 倍。 3、脂溶性维生素： 两个品种水蜜桃样品中所含脂溶性维生素 vd、ve含量很低，小湖景 vd 0.0195 mg/100g，ve0.