抗菌药物的敏感性试验VIP

抗菌药物 的敏感性试验 1 1 第一节 抗菌药物敏感性试验 的目的及试验指征 2 2 抗菌药物敏感性试验的定义 抗菌药物敏感性试验 （antimicrobial susceptibility test，AST） 简称药敏试验，是在体外测定抗菌药物抑制 或杀灭细菌的能力，亦即是测定细菌对抗菌 药物敏感性（或耐药性）的试验。 3 抗菌药物敏感性试验的目的 测定细菌对抗菌药物的敏感性 地区性耐药监测 评价新药的抗菌药效 分析医院感染流行株的药敏谱 4 抗菌药物敏感性试验的指征 当某些致病菌或条件致病菌的药敏特点不能 从其种属特征上了解时，或其药敏结果易变时，这 些菌的临床分离株必须进行药敏试验。如：肠杆菌 科的细菌、革兰阴性葡萄糖非发酵菌、葡萄球菌属 和肠球菌属的细菌等. 5 第二节 药敏试验用药 的选择和分组 6 6 常用的抗菌药物 内酰胺类 (1) 青霉素类 (2) 头孢烯类 (3) 内酰胺类和内酰胺酶抑制剂的复方制剂 (4) 青霉烯类 (5) 单环类 7 常用的抗菌药物 糖肽类 氨基甙类 大环内酯类 四环素类 8 常用的抗菌药物 喹诺酮类 磺胺类和甲氧苄氨嘧啶 其它抗菌药物：抑制蛋白质合成的抗 菌药，如氯霉素；作用于细胞膜的脂 肽类抗生素，如多粘菌素B；抑制RNA 合成的药物，如利福平；抑制细胞壁 合成的药物，如磷霉素。 9 药敏试验用药的选择依据和方法 致病菌的固有耐药特点 本地流行株的耐药谱和耐药趋势 药物的活性和毒性 药物的价格及其供应情况 10 药敏试验中抗菌药物的分组 通常将抗菌药的临床应用划分为一、二、三线 ： 一线抗菌药为常用的、价格较便宜的、已有一定 使用时间的有效抗菌药；三线抗菌药常为新开发 的抗生素，效果较好，价格通常亦较贵；一些效 果好而副作用较大的抗菌药，通常也不放在第一 线。 美国临床和实验室标准化学会（Clinical and Laboratory Standards Institute ,CLSI；过去称作 NCCLS）经常更新和发布临床微生物实验室常规药 敏试验的药物选择、分组和报告指南，可供参考 。 11 第三节 敏感、中介和耐药的概念 1212 敏感 所谓敏感(susceptible，S)是指当使用常规推 荐剂量的抗菌药物进行治疗时，该抗菌药在 患者感染部位通常所能达到的浓度可抑制该 感染菌的生长。 13 耐药 所谓耐药(resistant，R)是指使用常规推荐剂量的 抗菌药物进行治疗时，该抗菌药在患者感染部位通 常所能达到的浓度不能抑制该感染菌的生长；或者 该药对该感染菌的临床疗效尚未在以往的治疗研究 中被证实是可靠的；或者抑菌圈直径落在特定细菌 发挥耐药机制（如-内酰胺酶）的合适范围。 14 中介 一些抗菌药物敏感试验结果的表示方法还包括“中介 ”（intermesiate，I），它包含几层不同的意思： (1)抗菌药对感染菌的MIC接近该药在血液和组织中 的浓度，感染菌的临床应答率可能低于敏感菌； (2)结合药代动力学资料分析； (3)若某药在高剂量使用时是安全的（如-内酰胺类 药物），则中介意味着高剂量给药可能奏效； (4) 中介的数据位置处于敏感与耐药之间，它可作为 一个缓冲带 15 第四节 抗菌药物敏感性 试验的方法 1616 纸片扩散法 原理 材料 ：培养基 、药敏纸片 试验菌液的制备 直接菌落悬液法（direct colony suspension method） 生长法（growth method） 17 纸片扩散法 接种 贴药敏纸片 孵育 结果判读 结果报告 18 19 稀释法 稀释法药敏试验（dilution method）是在体外定 量检测抗菌药物对细菌之抗菌活性的方法，它测定 的是抗菌药物的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration ,MIC），故稀释法药敏试验常简称为 “MIC测定”。 20 一、 常量肉汤稀释法 试验材料 抗菌药物溶液的制备、储存和稀释 接种物的准备和接种 孵育 结果判读 结果报告 21 22 二、微量肉汤稀释法 微量肉汤稀释法的含药微孔板（条）有多种 现成的商品试剂供应，并常与自动化仪器配 套使用。 23 三、琼脂稀释法 琼脂稀释法是将药物稀释于琼脂培养基中（其基础 培养肉汤同肉汤稀释法），一块平板为一个药物稀 释度，菌液点种于含药琼脂平板上，每点约1l 菌 液，菌液浓度约为5106 CFU/ml.。点种菌液处未见 细菌生长即是被药物所抑制。同样，抑制生长的最 小药物浓度为MIC。 24 浓度梯度纸条扩散法 浓度梯度纸条扩散法（gradient diffusion method）又称E试验(E test) 优点：融合了纸片法操作简单和稀释法可给出 定量结果（MIC）的优点，不仅可用于一般细菌 的MIC测定，对于一些慢生长菌、厌氧菌和真菌 的药敏也适用； 缺点：成本较贵 25 26 抗菌药物的联合药敏试验 纸片法联合药敏试验 纸片法联合药敏试验所用的培养基、药敏纸片 、菌液和培养条件等均和纸