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文档简介
观察根尖分生组织细胞有丝分裂 必修一 实验九 一、实验目的 1、制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片; 2、观察植物细胞有丝分裂的过程,识别有 丝分裂的不同时期,比较细胞周期不同时期的 时间长短。 二、实验原理: 1、 高等植物体内,有丝分裂常见根尖、茎尖等分 生区细胞。各个细胞的分裂是独立的。通过在显微 镜下观察各个时期细胞内染色体(染色质)的存在 状态,判断这些细胞各处于有丝分裂的哪个时期( 间期、前期、中期、后期和末期)。 2、碱性染料(龙胆紫溶液或醋酸洋红液龙胆紫溶液或醋酸洋红液)能将染色 体(或染色质)染成深色。 3、盐酸使植物细胞之间的果胶质层松散,用盐酸处 理植物的根尖,可以使根尖细胞彼此容易分离。 三、材料用具:三、材料用具: 1 1、洋葱(或大蒜)根尖,、洋葱(或大蒜)根尖, 2 2、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管等,、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管等, 3 3、解离固定液 :盐酸和酒精混合液盐酸和酒精混合液(1:1(1:1) 4 4、龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)龙胆紫溶液(或醋酸洋红液) 1.生根培养:将切除老根的洋葱或 大蒜的磷基置于盛水的小烧杯上, 于2225下进行生根培养。 四、实验步骤 磷 基 2.取材: 待根长到 5cm左右 时剪取根 尖2-3mm。 取材部位 看一看植物看一看植物细胞的细胞的 分裂(根尖)分裂(根尖) 根冠 分生区伸长区 成熟区 根尖纵剖结构示意图 3、装片的制作: 解离 漂洗 染色 制片 盐 酸 使植物细胞之间的果胶质 层松散,细胞相互分离 放入请水中漂洗洗去盐酸,便于碱性染料染色 龙胆紫溶液或醋酸龙胆紫溶液或醋酸 洋红等碱性染料洋红等碱性染料 使染色体着色,便于显 微镜下观察 用镊子压扁,加盖 玻片,再加载玻片压 散细胞 使细胞分散开 观察 先用低倍镜观察 在低倍镜下找到分生区细胞 ;正方形、排列紧密 依次观察分裂中期、前期、 后期、末期、的细胞间期、 再用高倍镜观察 4、显微镜观察: 思考:思考: 为何只截取为何只截取根尖根尖23mm23mm? 有利于找到分生区细胞有利于找到分生区细胞 解离的目的:解离的目的: 使组织中的细胞相互分离开使组织中的细胞相互分离开。 漂洗漂洗的的目的:目的: 洗去药液,防止洗去药液,防止解离过度解离过度。 用用碱性染料碱性染料染色目的染色目的: 使使染色质和染色质和染色体着色,便于观察。染色体着色,便于观察。 制片的目的:制片的目的: 使细胞分散开(成一层细胞),利于观察。使细胞分散开(成一层细胞),利于观察。 (6)分生区的特点是什么? (7 7)本实验所观察到的细胞还能继续分裂吗?)本实验所观察到的细胞还能继续分裂吗? 细胞小,排列密而整齐,细胞 壁薄,细胞核大,细胞质浓,无液 泡。具有很强的分裂能力,能够不 断的分裂产生新细胞,再由这些细 胞分化形成其他组织。 原本细胞都是叠加在一起 的,在显微镜下很难观察清楚 ,酒精和盐酸就是使细胞分散 分离并杀死细胞,显微镜观察 的是死亡的细胞那时处于的状 态,所以,有的细胞正处于中 期,有的处于间期。 镜检结果分析 进行有丝分裂的细胞分裂相 间期: 完成DNA分 子的复制和 有关蛋白质 的合成。 镜检结果分析 间期分裂相图 前期: 核仁和核膜逐渐消 失。 核内染色质逐渐浓 缩为细长而卷曲的 染色体,每一染色 体含有两染色单体 ,它们具有一个共 同的着丝点;两级 发出纺锤丝形成纺 锤体。 镜检结果分析 前期分裂相图 中期: 染色体形态、数目 清晰,便于观察。 各染色体的着丝点 排列在赤道板上, 纺锤丝与染色体的 着丝点相连。 镜检结果分析 中期分裂相图 后期:各染色体着丝点分裂为二,其每条染色 单体也相应地分开,并各自随着纺锤丝 的收缩而平均移向两极,每极有一组染 色体,数目和原来的相同。 镜检结果分析 后期分裂相图 末期:核膜、核仁重新出现,分开在两极的染色体各自组 成新的细胞核,在细胞中央出现细胞板形成新的细 胞壁,使细胞分裂为二,形成二个子细胞。这时细 胞又进入分裂间期。 末 期 分 裂 相 图 实验结束后: 1、将盖玻片和载玻片擦洗干净。 2、显微镜复原,套上塑料袋。 3、整理试验台。 本实验的一些替代和改进之处: 1.材料的替代:大蒜;大葱;蚕豆;绿豆;小麦 2.2.取材的长短:所有材料的根最好是培养到0.5 1cm,此时细胞分裂相最多。 3. 试剂的改进:稀释的龙胆紫染液(用10冰醋 酸以3:1比例稀释质量浓度为0.01g/ml的龙胆紫染 液);2的醋酸洋红染液;改良苯酚品红染液,1 :1稀释的医用紫药水 4.根尖的固定:目的是迅速将组织和细胞 杀死 ,并使细胞结构尽可能保持生活时的状态。把处于 分裂旺盛时期的根尖放入装有卡诺氏固定液的培养 皿内(3份95的酒精和1份99的冰醋酸混合而成 ),盖上培养皿盖固定1224h,再用95酒精冲洗2 次后,转入70酒精中置4冰箱中保存待用。 5.实验仪器的替代:用化学实验室学生实验中用的 瓷质反应板(又称点滴板或比色板)来替代玻璃皿 ,既方便操作又容易清洗。 6. 解离、漂洗、染色仪器的改进:在反应 板的一个穴中滴入质量分数为15盐酸和95酒精 的混和液(1:1)数滴(穴的容积约为5ml),另 一穴中滴12滴0.01g/ml龙胆紫溶液,其余的穴中 滴加清水用于根尖漂洗。 7. 压片法的改进:在盖波片上盖23层吸水 纸,用拇指轻压,或用铅笔的橡皮端或玻璃滴管上 的橡皮头,对准盖波片下的材料在盖波片上轻轻敲 击,使根尖细胞均匀扩散成淡淡的云雾状。 1.(09江苏卷)有1位同学做根尖有丝分裂实验,在 显微镜中观察到的图像如图所示。造成这种情况的 原因可能是 ( ) 取材位置不合适 取材时间不合适 制片时压片力量不合适 解离时间不合适 视野选择不合适 A.B. C.D. 解析 此实验需找到呈正方形、排列紧密的分生区细 胞,该视野中细胞多呈长方形,可能原因是取材位 置不合适、取材时间不恰当或没有找到分生区。 C 2.(08江苏生物)29(7分)在完成了观观察洋葱根尖分生区细细胞 有丝丝分裂实验实验 后,教师给师给 学生提供了2份资资料。 资资料一 一份“实验报实验报 告”的部分内容 (一)解离:剪取洋葱根尖5cm,放入盛有质质量分数为为15%的 盐盐酸和体积积分数为为95%的酒精混合液(体积积比为为1:1)的玻璃 皿中,在室温下解离35min。 (二)染色:把根尖放在盛有0.01g/mL龙龙胆紫溶液的玻璃皿中 染色35cm。 (三)漂洗:将根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约约10min。 (四)制片:将根尖放在载载玻片上,加一滴清水,并用镊镊子把 根尖弄碎,盖上载载玻片,用拇指轻轻轻轻 按压载压载 坡片 (1)请改正“资料一”中的3处错误。_ 将“5cm”改成“23mm”;实验操作步骤应改为先漂洗后染色;将“盖 上载玻片”改成“盖上盖玻片后,再加一片载玻片” BD 4在下列实验中,实验材料必须始终保持生活 状态的是 A.在光学显微镜下观察植物细胞有丝分裂 B.在光学显微镜下观察植物细胞质的流动 C.在光学显微镜下观察马蛔虫受精卵的有丝分裂 固定装片 D.在光学显微镜下观察植物细胞质壁分离和质 壁分离复原 5.对洋葱根尖分生区细胞的正确描述是 A. 既小且方 B. 形态不规则 C. 细胞已经开始分化 D. 无间期细胞 6、在“观察根尖分生组织细胞的 有丝分裂”实验中,以下操作和 结论正确的是 A.剪取5cm根尖,用酒精和吡 罗红混合液解离染色 B.右图是高倍显微镜下调解细 准焦螺旋看到的视野 C.持续观察,视野中的K细胞将 分裂成两个子细胞 D.视野中,N细胞的染色体数目 是M细胞的一半 B 7、实验材料的选择 (1)洋葱的根尖可用于观察 的实验, 这是因为其根尖分生区细胞进行有丝分裂;而 植物细胞有丝分裂 细胞可用于观察植物细胞的质壁 分离和复原的实验,这是因为其具有 ,同时 还可以利用洋葱鳞片叶内表皮观察 在细胞中 的分布。 (2)人的 可用于观察 及 在细胞内的分布情况,而观察 时则选用动物的精巢细胞作为实验材料。 (3)观察叶绿体时常选用藓类的叶,因为 。 洋葱鳞片叶的外表皮 紫色大液泡 DNA和RNA 口腔上皮细胞线粒体 DNA和RNA 细胞减 数分裂 藓类 植物的叶片薄而小,常是一层细胞,叶绿体清楚,易 于观察和操作 吡罗红罗红 或派 洛宁染液 红红色 线线粒体 染色体 紫色 醋酸洋红红 RNA 健那绿蓝绿色 龙胆紫 红色 8、染色剂的使用 试剂试剂 被染成分 呈现颜现颜 色 DNA 绿绿色 甲基绿 9、小鼠常被用作研究人类遗传类遗传 病的模式动动物。请请填充观观察 小鼠细细胞减分裂的实验实验 步骤骤
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