hbv慢性感染与树突状细胞功能异常研究进展(1)

HBVHBV 慢性感染与树突状细胞功能异常研慢性感染与树突状细胞功能异常研 究进展究进展(1)(1) 【关键词】树突状细胞;HBV 慢性感染;CTL 应答; 拉米夫定 我国是 HBV 感染高流行区，一般人群 HBsAg 阳性率约 为%，慢性乙型肝炎患者约 3 千万人。乙型肝炎病毒 （HBV）持续感染的机制虽仍不完全清楚，但大量实验表明， 树突状细胞（dendriticcellDC）功能异常可能是其主要原 因。早期人们注意到感染者体内细胞因子的表达水平与树 突状细胞的功能异常有关，近年来又发现 HBV 感染本身也 影响 DC 成熟，并针对提高 DC 功能的抗 HBV 治疗进行了有 益的探讨。本文综述 HBV 慢性感染与树突状细胞功能异常 研究进展。 1DC 分类与功能 DC 呈树突状的外形，通常以未成熟形态居于外周组织 1，2 ，具有强大的吞噬能力，而移动能力很低，能非常 有效地摄入抗原和处理可溶性蛋白，仅低表达 CD54、CD40、CD80 等共刺激分子和粘附分子，高表达 CD86 和 HLA-DR。当受到外来物质或细胞因子刺激时，则发展成 为成熟的 DC。成熟的 DC 吞噬能力下降，增殖能力亦有所下 降，但其移动能力和抗原提呈能力却大大增强;MHC- 、MHC-、CD40、CD80、CD86、ICAM-1 等协同刺激分子 表达上调。体内的 DC 主要分为髓系 DC（myeboid，mDC，DC1）和淋巴系 DC（lymphooid，pDC，DC2）两类，均起源于多能造血干细 胞。外周血单核细胞在 GM-CSF 和 IL-4 作用可产生非成熟 髓系 DC，在 TNF- 或内毒素作用后变为成熟髓系 DC。血 液或扁桃体中 CD4CD3-CDllc-浆细胞（DC2 前体细胞）与 IL-3 作用后可产生非成熟淋巴系 DC，在经 CD40L 作用后分 化为成熟淋巴系 DC。DC1 与单核、粒细胞有共同的祖细胞， 能分化发育成巨噬细胞，DC2 与 T、NK 细胞有共同前体细胞， 能分化为淋巴细胞。一般认为，DC1 其表面标志为 Lin- HLA-DRCD4CD11c，主要发挥抗原递呈作用，并分泌 IL-12， 作用于 Th0 使之向 Th1 型细胞分化;DC2 其表面标志为 LinHLA-DRCD4CD123，主要产生干扰素 ，具有较弱的抗原 递呈功能，并分泌 IL-4，作用于 Th0 使之向 Th2 分化。DC 是机体内功能最强的专职性抗原提呈细胞，具有激活 CD8CTL 和 CD4Th 的能力，在免疫应答中发挥重要作用。DC 通过双信号机制启动抗原特异性的 T 细胞免疫应答，抗原 提呈细胞将抗原捕获、加工成为肽段后，负载到主要组织 相容抗原复合物（MHC）分子表面，形成启动 T 细胞免疫应 答的第一信号，DC 表面的共刺激分（CD80、CD86 等）与抗 原特异性 T 细胞表面的共刺激分子受体（CD28 等）相结合， 形成强烈的共刺激信号，即为第二信号。 2 慢性乙型肝炎患者的 DC 功能 DC 作为体内免疫反应的始动子、调节子和效应子3 ， 一旦受损会影响到机体免疫的各个环节4 。慢性乙型肝 炎患者外周血 DC 的数量与功能往往是有缺陷性。 DC 数量及亚群比例的异常 国内研究者对 73 例感染者和 25 例 HBsAb 健康者进行 检查，82%病人外周血中 DC 百分率明显低于健康者5 。 Beckebaum 等发现，慢性乙肝患者体内 mDC 比例下降而 pDC 比例上升，因此 mDC/pDC 比值降低6 。Kunitani 等而却 发现相关的慢性肝炎和肝硬变患者外周血 mDC 和 pDC 水平 均下降7 。国内研究者发现 mDC 在急性肝炎和慢性肝炎 阶段无明显下降，到肝炎肝硬变阶段出现细胞比例和绝对 数的下降。pDC 数量在慢性乙肝阶段即降低，而肝炎肝硬变 阶段 pDC 进一步降低。因此，pDC 比 mDC 更早出现数量的降 低。至于不同研究者结果不同，可能与病例选择、病人遗 传背景等因素有关，具体机制需要进一步研究8 。 DC 功能的异常 慢性乙型肝炎患者 DC 表面表达的共刺激分子 CD80、CD86、CD1a 及 HLA-DR 的水平明显降低9 ，且分泌 的 Th1 类细胞因子 IFN-、IL-12 的水平低于正常 10，11 。患者 DC 表面共刺激分子的减少，将会使 DC 抗 原提呈能力的下降，使 DC 不能有效的激活特异性的 CD4 的 Th 细胞与 CD8 的 CTL 细胞。而患者 DC 分泌 IL-12 水平的缺 失，则是慢性乙型肝炎患者 DC 刺激 T 淋巴细胞增殖能力降 低的另一个重要原因。IL-12 是 DC 细胞释放的迄今为止所 发现的最有效的 CTL 和 NK 细胞活性刺激因子。IL-12 可促 进由丝裂原激活的 CTL 和 NK 细胞的增殖，增强这两种细胞 的细胞毒作用并诱导其 IFN- 产生，同时增强许多效应细 胞，如:NK 细胞、淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK） 、T 细胞 以及巨噬细胞等的溶细胞活性。且 IL-12 可与共刺激分子 协同作用，调节 Th0 细胞向 Th1 细胞的发育，促进 Th1 细 胞分泌 IFN- 和 IL-2，介导细胞免疫应答4 。 对慢性乙型肝炎患者 DC 进行混合淋巴细胞反应 （MLR）检测发现，其刺激淋巴细胞增殖能力亦明显低于正 常人。并且在 MLR 上清液及纯的 DC 培养上清液中其产生 IL-12 水平下降，而 NO 水平却升高。NO 被认为可通过抑制 多种酶的作用而损伤健康组织9 。 用 3H-TdR 掺入法测定慢性乙肝患者 DC 的提呈抗原的 能力，发现其 DC 的刺激指数低于正常，提示其抗原提呈能 力较正常低下，诱导特异性免疫反应的能力就随之下降 10 。以往研究中发现慢性肝炎患者 DC 的抗原摄取能力 并未受影响，只是出现成熟障碍12，13 。国内研究者发 现慢性肝炎患者 DC 的膜表面分子表达降低的同时，抗原摄 取功能力也是降低的。郑曲波等人对 73 例感染者进行检测， 大部份病人外周血中 DC 百分率明显低于健康者，而且凡是 DC 百分率低下者，在外周血中加入 HBsAg 进行孵育后，DC 的百分率没有增加，提示 HBV 感染者外周血 DC 不仅数量减 少，而且缺乏应答功能。进一步检测感染者的 T 细胞经激 活后的应答能力，发现感染者的 T 细胞应答功能也呈低下 表现，其原因究竟是 DC 递呈功能异常抑或是 T 细胞本身应 答功能异常所致，尚待深入研究5 。范春蕾等人对 HBV 和 HCV 合并感染者的研究发现，DC 的膜表面分子表达降低， 同时抗原摄取功能及刺激异体淋巴细胞增殖的能力降低， 但这并不影响机体对 HBV 或 HCV 的清除和抗原特异性的细 胞免疫应答的产生。DC 非病毒特异性免疫功能下降不是导 致 CTL 作用不足以及肝炎病毒持续感染的原因，慢性 HBV 和 HCV 合并感染中 HBV 和 HCV 的清除均与体内是否存在特 异性的 CTL 相关14 。CTL 对 HBV 清除至关重要，已有试 验证实慢性 HBV 持续感染中 CTL 应答非常微弱，甚至检测 不到15 。病毒感染、CTL 作用的不足和 DC 功能的异常总 是伴随出现，但其相互作用的细节有待进一步研究。