细胞工程实验一器材的清洗包装消毒与灭菌

临床血液学实验室 张伶 细胞工程实验 器材的清洗，包装和灭菌 实验目的: 1.掌握细胞培养常用器材清洗、包装和灭菌方法 2.掌握湿热灭菌法和滤过除菌法的操作 实验内容： 常用实验器材 清洗 包装 消毒 常用实验器材 橡皮器材 玻璃器材塑料器材 金属器材 细胞培养瓶 移液管（1ml） 离心管 血清瓶 滴头 EP管 塑料离心管 瓶盖 细胞培养板 手术器械 不锈钢筛网 不锈钢滤器 连接胶管 胶塞 玻璃器材清洗 浸泡 超声波震动15 min 洗衣粉 刷洗，流水冲掉洗衣粉 清洁液浸泡 过夜（12h） 自来水冲洗15次 去离子水冲洗3次 烤干75 ,1 h 待包装：吸管塞棉花，装好 待高压灭菌 备用 注意事项 1.新玻璃器材在5 稀酸中浸泡过夜以中和 碱性物质；使用后的实验器材应立即投入清 水中浸泡 2.浸泡，酸泡的器皿内要充满液体，不得有气 泡 塑料器材 清洗 浸泡 超声波加洗涤剂清洗 冲洗干净 清洁液浸泡 过夜（12h） 自来水冲洗15次 去离子水冲洗3次 烤干 注意事项 塑料培养板主要为一次性商品，仍可经过清 洗和消毒灭菌重复使用 使用后应立即投入清水中浸泡 紫外线或辐射灭菌备用 橡皮器材清洗 浸泡 洗涤剂刷洗，冲洗干净 5%NaOH煮10 -20min, 冲洗干净 4%盐酸煮10 -20min 自来水冲洗8-10次 去离子水冲洗3次 晾干备用 注意事项 胶塞洗刷的重点部位是胶塞使用面，用刷 逐个刷洗 金属器材清洗 纸擦去表面的油脂 洗衣粉煮沸或用1%碳酸氢钠煮沸15min 水洗 95%酒精纱布擦干 待包装灭菌 常用包装器材： 牛皮纸 硫酸纸 棉布 铝制饭盒 注意事项 手指与器材接触面积要小 玻璃管道口（尖吸管，移液管手持端塞棉花 ） 包装 1.湿热消毒 2.干热消毒 3.滤过除菌 消毒 湿热消毒湿热消毒 1.消毒物品不能装得太满 2.加热升压前，打开排气阀门排放消毒器内冷空气 3.达到所需压力时开始计算消毒时间 常用物品消毒压力及时间 培养液和橡胶制品：65kPa(115 ) 10min 玻璃制品和金属器械：101.3kPa(121.3 ) 20min 4.消毒完毕，待压力指针降至零位，等数分钟后， 打开消毒器盖 高压蒸汽灭菌器 压力蒸汽指示胶带 【结构与性能】压力蒸汽灭菌化学指示胶带，将特殊热敏化学染料与显 色剂及其辅料制成油墨，以斜形条纹或形状印制在特制的胶纸上制成；在 一定温度压力的饱和蒸汽作用下，经过一个灭菌周期处理后，指示剂变成灰 黑色或黑色；灭菌后的颜色不易褪色。 【使用范围】压力蒸汽灭菌化学指示胶带可适应各种型号压力蒸汽灭菌 器，用于固定物品包或标示物品包（或容器）是否已经过灭菌处理过程。 【使用方法】截取适当长度的压力蒸汽灭菌化学指示胶带，黏贴在待灭 菌物品包外，放入120下排汽压力灭菌器中20分钟，或放入132预真空 压力灭菌器中3.5分钟，胶带上指示剂由浅黄色变为灰黑色或黑色，表明灭菌 过程符合要求。 【注意事项】不要将压力蒸汽灭菌指示胶带与易形成冷凝水的金属，玻 璃等硬质表面直接接触，以防被冷凝水浸湿，使化学指示胶带的热敏化学染 料失去准确性。 【保存方法】贮存于避光，室温1530和50%相对湿度，避免接触 腐蚀性气体。 【有效期】自生产日期起24个月。 干热消毒干热消毒 烤箱，主要用于消毒玻璃器皿 1.冷空气存留，因此用较高的温度和时间达到消毒目 的 160 90120min才能杀死芽孢 2.消毒完毕后不可马上打开烤箱门 滤过除菌滤过除菌 血清，合成培养液，酶和含有生物活性的液体 ，不能采用高压消毒的