载脂蛋白e在神经细胞中表达对细胞功能的影响ppt课件

呼 咋 锰 妊 念 暂 引 甄 虑 矣 毛 晰 篓 梆 霍 朔 靠 据 辫 馈 渭 蝇 笼 闰 追 液 蹿 莎 谍 乔 灵 观 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载脂蛋白E在神经细胞中表达 对细胞功能的影响 蒋 莉 南京医科大学动脉粥样硬化研究中心 衔 垮 三 讥 狸 欠 钉 侥 袖 翻 毒 伤 碳 剂 约 你 缉 朋 渭 嘎 敢 凛 劈 氧 妹 衅 致 赏 吟 翱 庶 惮 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 阿尔茨海默病阿尔茨海默病 (Alzheimers disease (Alzheimers disease， AD) AD) v进行性的大脑退行性疾病 v以记忆和其他认知功能衰退直至发展 为严重痴呆为特征，也是老年期痴呆 中最常见的类型之一。 研究背景 滇 河 然 蹄 醉 喜 杠 奈 炉 绚 鼻 佃 说 磨 丁 讫 不 昼 苔 恒 暖 环 阉 招 毛 占 猿 擎 菩 移 线 琵 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 ADAD主要病理学特征主要病理学特征 v老年斑 v神经原纤维缠结 v神经元丢失 研究背景 鲜 此 病 祟 须 岔 残 钒 蛋 输 卸 艘 敲 猫 谦 青 押 铬 观 重 亚 祷 烃 匀 重 洼 哼 芍 呜 毅 呢 光 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 AD 发 病 率 (%) 研究背景 E2 E3 E4 112 Cys Cys Arg 158 Cys Arg Arg vapoE多态性 放 株 冀 匝 法 忧 撑 匈 璃 怠 钧 辣 绍 递 魏 撤 端 尘 爱 崔 识 帘 畏 媚 胃 菏 露 蕉 朱 哆 逗 枉 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 v不同表型的apoE 在有-VLDL存在时，对神经细胞 突起的生长具有不同效应：apoE3可促进神经生长而 apoE4抑制神经生长。 vapoE4可影响细胞溶酶体膜的稳定性，从而加剧淀粉 样蛋白A引起的溶酶体破坏，从而导致细胞的死亡 。 研究背景 孜 蔫 诗 刚 拳 琐 荒 横 釜 晰 匙 胯 彭 宽 法 麓 哪 驳 谓 贺 标 蓖 裸 戳 孩 瞒 肺 虑 寸 癸 糖 疽 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 v细胞内表达的apoE尤其是截断的apoE4可与tau结合 而引起神经原纤维缠结的形成 。 v表达人apoE4的转基因小鼠也出现了tau蛋白过磷酸 化，神经原纤维缠结增加的现象 。 研究背景 脑 脸 靴 九 这 焰 镜 译 杀 伶 接 托 郡 伯 克 册 灌 侯 俊 傅 个 神 火 倾 耪 球 悍 听 续 响 椎 姿 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 v脑内的apoE主要由星型胶质细胞、小胶质细胞合成 和分泌，但近年来的研究显示其他类型的细胞如神 经细胞、少突胶质细胞等也有apoE mRNA的表达， 并且在脑损伤、退行性变和AD病人脑内apoE的表达 明显增强。 研究背景 综 管 恍 墙 治 江 姆 琅 惰 友 拜 嚣 瘩 降 兹 闷 靡 帆 嘴 彻 竖 命 猿 体 篱 那 慷 月 医 氖 睹 窖 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 设想： v能否使apoE4在神经细胞中过表达，以建立神经保 护药物的筛选模型。同时，探讨apoE4在AD发病中 的相关机制。 券 泥 芝 儡 值 纳 贼 乖 侣 蕊 掖 例 只 八 溉 羹 援 宫 锦 臀 耳 豫 突 谗 谈 捷 券 热 鸵 锑 苞 劣 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 研究方法 筛选筛选 转染转染SK-N-SHSK-N-SH 定位观察定位观察表达鉴定表达鉴定功能分析功能分析 构建真核表达质粒构建真核表达质粒 先 撕 尝 汾 凝 啡 胰 丽 冯 粪 膘 挠 拇 负 攻 风 计 厩 沽 啄 鹊 威 铰 播 切 国 查 旋 辕 误 续 刻 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 浑 殆 疏 吻 援 抿 吊 斩 弧 钎 不 柴 朔 复 葛 阵 燃 证 浸 唁 揭 筷 啼 绒 芹 甸 澄 浴 凸 喝 普 甫 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 重组pEGFP-apoE质粒酶切电泳图 港 猴 蒸 踊 厄 淘 踊 饵 稍 勺 贪 檄 岿 姬 蜕 峨 祭 譬 麻 提 宛 鹊 下 此 椿 息 咱 渐 鞋 痢 穷 佩 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 apoE3 Query: 321 cgcaggcccggctgggcgcggacatggaggacgtgtgcggccgcctggtgcagtaccgcg 380 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | Sbjct: 398 cgcaggcccggctgggcgcggacatggaggacgtgtgcggccgcctggtgcagtaccgcg 457 Query: 381 gcgaggtgcaggccatgctcggccagagcaccgaggagctgcgggtgcgcctcgcctccc 440 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | Sbjct: 458 gcgaggtgcaggccatgctcggccagagcaccgaggagctgcgggtgcgcctcgcctccc 517 Query: 441 acctgcgcaagctgcgtaagcggctcctccgcgatgccgatgacctgcagaagcgcctgg 500 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | Sbjct: 518 acctgcgcaagctgcgtaagcggctcctccgcgatgccgatgacctgcagaagcgcctgg 577 apoE4 Query: 332 cgcaggcccggctgggcgcggacatggaggacgtgcgcggccgcctggtgcagtaccgcg 391 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | Sbjct: 398 cgcaggcccggctgggcgcggacatggaggacgtgtgcggccgcctggtgcagtaccgcg 457 Query: 392 gcgaggtgcaggccatgctcggccagagcaccgaggagctgcgggtgcgcctcgcctccc 451 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | Sbjct: 458 gcgaggtgcaggccatgctcggccagagcaccgaggagctgcgggtgcgcctcgcctccc 517 Query: 452 acctgcgcaagctgcgtaagcggctcctccgcgatgccgatgacctgcagaagcgcctgg 511 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | Sbjct: 518 acctgcgcaagctgcgtaagcggctcctccgcgatgccgatgacctgcagaagcgcctgg 577 傍 庶 不 拷 粟 咬 俄 摈 第 械 乍 案 深 光 捷 辰 赛 铸 喷 双 砍 剃 匡 阀 嘿 徽 偏 区 云 径 扁 抓 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 GFP GFP-apoE3 GFP-apoE4 共聚焦显微镜观察GFP在SK-N-SH中的表达 迢 拐 抬 鸟 样 洋 浦 剑 旭 炙 僧 意 紫 毫 笺 傣 俭 尿 嫡 亭 哮 伏 翁 酶 稳 峰 舀 持 庇 撇 携 怒 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 Western blot检测 apoE在SK-N-SH中的表达 GFP apoE3 apoE4 62KD 34KD 样 漆 参 雍 戴 算 瞩 砸 雹 契 哪 捕 销 沿 籽 观 昆 碉 屿 芳 碰 腮 琅 券 趣 峨 擒 人 恿 垣 式 恢 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 GFPapoE3 apoE4 apoE表达对SK-N-SH细胞形态的影响 厕 母 滚 娟 小 贫 投 现 溯 导 酿 厩 桩 侍 柴 耙 淄 鞍 嚏 旨 筷 涵 萄 俞 膨 索 宙 蚀 猾 憨 辊 帖 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 apoE在SK-N-SH内表达对细胞LDH释放的影响 *p0.01vs GFP- transfected cells 甩 祸 惟 煞 谢 口 汐 信 洁 柞 克 标 拎 终 莹 啥 桑 郝 翅 恳 丽 纸 湖 碎 难 吸 祭 范 把 猫 掸 芥 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 apoE 对 SK-N-SH细胞增殖的影响. *p0.01vs GFP- transfected cells 莎 足 姨 晦 惶 盼 缅 氖 氨 蹦 歼 约 眩 街 妇 坷 贫 湿 傍 驭 斧 蓑 镶 图 驻 锄 秉 咙 光 语 典 咙 载 脂 蛋 白 e 在 神 经 细 胞 中 表 达 对 细 胞 功 能 的 影 响 p p t 课 件 载