溶血性贫血的实验室检查_1课件

溶血性贫血的 实验室检查 Laboratory diagnosis of hemolytic anemia 南方医科大学第一临床医学院 实验诊断学教研室 熊石龙 本章提纲 一、溶血性贫血定义和分类 二、溶血性贫血的确诊试验 三、溶血性贫血原因的实验室检查 贫血 外周血中单位容积内红 细胞计数、血红蛋白含量 或红细胞比容（Hct）低于 正常下限。 症状: 疲乏困倦； 气促；心悸；食欲差 ，腹帐、便秘； 头晕、眼花，嗜睡， 精力不集中 体征： 皮肤黏膜苍白； 黄疸； 肝脾肿大 贫 血 v失血性贫血 v缺铁性贫血 v巨幼细胞性贫血 v再生障碍性贫血 v溶血性贫血 溶血性贫血：各种原因使红细胞生存时间缩短， 破坏增多，骨髓造血代偿不足时发生的一类贫血 红细胞破坏增加红细胞代偿性增加 v溶血：红细胞非自然衰老而提前遭受破坏的过程。 v溶血性疾病：发生溶血而骨髓能够代偿，未出现贫血。 v溶血性贫血：溶血程度超过造血代偿能力，出现贫血。 定义 溶血性贫血的分类 根据红细胞破坏的场所： 血管内溶血：在血流中被破坏 获得性因素和酶缺陷 血管外溶血：在单核-巨噬系统中被破坏 膜缺陷、珠蛋白异常、 脾功亢进 原位溶血： 在骨髓中被破坏 巨幼细胞贫血、急性白血病 溶血性贫血的分类 根据发生机制： 代表疾病 膜 酶 血红蛋白 红细胞 内在缺陷 遗传性球形红细胞增多症 遗传性椭圆形红细胞增多症 G6PD缺陷症 PK缺陷症 珠蛋白生成障碍性贫血 异常血红蛋白病 溶血性贫血的分类 红细胞外在 因素损伤 免疫因素 非免疫因素 AIHA CAS PCH 药物诱发的免疫性溶贫 新生儿同种免疫性溶贫 溶血性输血反应 PNH 微血管病性溶血性贫血 心源性溶血性贫血 行军性血红蛋白尿症 砷化物、硝基苯、苯肼、蛇毒等中毒 溶血性链球菌、疟原虫、产气荚膜 杆菌等感染 （一）显示红细胞破坏增加的依据 1 红细胞寿命缩短、破坏增加的检验 v红细胞寿命测定； v红细胞形态改变； v血浆LDH测定 2 血红蛋白代谢的检验 v血浆游离血红蛋白测定(4%为异常， 重型 地贫30-90%， 遗传性胎儿血红蛋白持续存在综合症100% （四）HbA2定量测定 诊断轻型地贫的重要依据 （五）限制性内切酶谱分析 四、自身免疫性溶血性贫血检验 自身免疫性溶血性贫血 （autoimmune hemolytic anemia,AIHA) 1.病因：抗红细胞自身抗体的产生机制尚未阐明，有以 下的解释：病毒感染可激活多克隆B细胞或化学物与红细 胞膜相结合，改变其抗原性，导致自身抗体产生 2.分类： 本病可为原发性的，也可继发于结缔组织病、造血系统 肿瘤、感染等。 按抗体反应最适温度分为温抗体型和冷抗体型，后者 又分为冷凝集素综合征和阵发性冷性血红蛋白尿 （一） Coombs试验（抗人球蛋白试验） 原理：不完全抗体(IgG)，无法架接两个邻近的红细胞，而只 能和一个红细胞抗原相结合。 抗人球蛋白抗体是完全抗体,可与多个不完全抗体的Fc 段相结合,导致红细胞凝集现象,称为抗人球蛋白试验阳性。 目的：检查红细胞表面的或血清中游离的不完全 抗体，用于诊断AIHA。 v直接Coombs Test(+)说明病人RBC表面上包被有不完全抗体 v间接Coombs Test(+)则说明病人血清中存在着不完全抗体 Coombs 血清（抗 人球蛋白 血清） （一）直接试验 正常人：阴性 直接反应阳性，最常见于AIHA（其他有药物诱 发的溶贫、阵发性冷性Hb尿、新生儿同种免疫溶 血病、SLE、类风湿关节炎、恶性淋巴瘤等）。 目的：测定吸附于红细胞表面的不完全抗体 方法： 结果： （二）间接试验 有过剩抗体时直接、间接均为阳性。 AIHA分三型：C3型12%，IgG型24%，IgG+C3型60% 。冷凝集素病为IgM抗体。 目的：测定血清中游离的不完全抗体 方法： 结果：间接阳性，见于AIHA，正常人为阴性。 病人血清正常RBC抗 IgG (二)冷凝集素试验： 冷凝集素是一种可逆性抗体，在低温 时可与自身红细胞、“O”型红细胞或患者同 型红细胞发生凝集，当温度增高时，凝集 块又消失 参考值：效价 140，反应最适温度4C 临床意义：阳性见于冷凝集素综合症 冷凝集素综合症冷凝集素综合症 以中老年患者为多，寒冷环境有耳廓、鼻、手指发绀，但加以中老年患者为多，寒冷环境有耳廓、鼻、手指发绀，但加 温后即可消失。温后即可消失。 除贫血和黄疸外其他体征少见除贫血和黄疸外其他体征少见 实验室检查：实验室检查： 有轻到中度贫血，反复发作有含铁血黄素尿。冷凝集素试验有轻到中度贫血，反复发作有含铁血黄素尿。冷凝集素试验 阳性阳性 (三)冷热双相溶血试验 阵发性寒冷性血红蛋白尿症（PCH）患者的 血清中有双相溶血素，在0-4C时，溶血素与红细 胞结合，并吸附补体，但不溶血；当升温至30- 37C则发生溶血 参考值：阴性 临床意义： 阳性见于阵发性寒冷性血红蛋白尿患者 五、阵发性睡眠性血红蛋白尿 1.病因:红细胞膜缺陷引起的慢性血管内溶血 睡眠时加重 发作性血红蛋白尿 全血细胞减少症 阵发性睡眠性血红蛋白尿 (paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, PNH) （一）Ham试验（酸化溶血试验） （acid hemolysis test, Hams test) PNH是造血干细胞水平发生了突变，导致红细胞膜出 现获得性缺陷，影响了膜的结构，使之对正常血清中的补体敏 感而发生溶血，特异性高，是国内外公认的PNH确诊试验。 目的：了解有无PNH补体敏感红细胞 原理： PNH补体敏感红细胞可被正常人新鲜血清所溶解，但 在酸性条件下（PH6.46.5）更为显著。 要有补体存在 有酸性环境 这个试验关键有两点 （二）蔗糖溶血试验（sucrose hemolysis test) 原理：蔗糖溶液加强补体与红细胞结合，导致溶血增强。 临床意义： 敏感性最高，特异性差。是PNH的筛选试验。阴性常可 排除PNH，阳性需再做Ham 试验。阳性率90-91%。 （三）蛇毒因子溶血试验 原理：蛇毒因子直接激活补体C3，旁路途径激活补体系统， 攻击PNH病人红细胞。 临床意义： 是特异性PNH试验，敏感性优于Ham试验 常用的溶血性贫血病因实验检查项目 项项目结结果常见见疾病 红细红细 胞脆性试验试验增高遗传遗传 性球形红细红细 胞增多症 抗人球蛋白试验试验阳性自身免疫性溶血性贫贫血；药药物免疫性 溶血性贫贫血；新生儿同种免疫容血病 ；冷凝集素综综合症 酸溶血试验试验阳性PNH（确诊试验诊试验 ） 蔗糖溶血试验试验阳性PNH（筛选试验筛选试验 ） 高铁铁血红红蛋白还还原试验试验还还原率减低G6PD缺乏症 血红红蛋白电电泳异常用于检查检查 HbC、HbBartS