《制药工程校内实训实习》（344006）课件2微球的制备及质量检测评价

微球的制备 吉林大学 国家级生物基础实验教学示范中心 1、目的要求 2、实验原理 3、试剂与器材 4、实验步骤 5、注意事项 6、思考题 吉林大学生物基础实验教学中心 目的要求 1.掌握O/W法制备微球的工艺。 2.掌握微球粒径的检测方法。 吉林大学生物基础实验教学中心 实验原理 自从19世纪30年代微胶囊化技术诞 生以来，其在药物传递方面的应用得到 了越来越多的关注。为了达到更好的效 果，应用最广泛的微胶囊化技术-微球传 递系统必须满足一些原则 吉林大学生物基础实验教学中心 （i）具有高的包封率，（ii）在包封及 储存过程中药物活性能得到很好的保护 ，（iii）能够容易的到达靶向位点，(iv) 能够控制释放速率，减小药物所带来的 副作用。通过微球体给药的好处不仅能 够保护包封药物免受体内环境的影响， 而且能够控制药物释放，服药频率降低 能够使病人感到更加舒适，改善顺应性 。 吉林大学生物基础实验教学中心 到目前为止，已有各式各样的材料应用到微球当中， 由于生物不可降解材料最终需要采用外科手术移除，所以 现在研究的热点为生物可降解材料。通过使用天然的聚合 物，如天然存在的乳酸和羟基乙酸制得的藻酸盐，壳聚糖 ，胶原质或者合成的聚合物，可生产出具有生物可降解和 生物相容性的微球。使用天然的高分子材料必须慎重，因 为它们可能被内毒素或具有免疫原性的蛋白所污染。 19世 纪70年代，生物可降解能力好，生物相容性强的聚乳酸（ PLA）问世，目前，以他为基础的共聚物羟基乙酸（PLGA ）已经成为最受欢迎的聚合物材料，PLGA具有众多优点， 如：不宜被污染，可以根据分子质量控制其释放速率，还 可以根据需要修饰乳酸/羟乙酸的比例。 吉林大学生物基础实验教学中心 冷冻干燥技术 将含有大量水分的物料预先进行降温， 冻结成冰点以下的固体.在真空条件下使 冰直接升华，以水蒸气形式除去，得到 干燥产品的一种技术（升华干燥） 吉林大学生物基础实验教学中心*7 water phase diagram 技术原理 吉林大学生物基础实验教学中心*8 冷冻干燥过程曲线 吉林大学生物基础实验教学中心*9 技术装备 吉林大学生物基础实验教学中心*10 冷冻干燥机 吉林大学生物基础实验教学中心 。 试剂与器材 试剂： 羟基聚乳酸共聚物（PLGA）或聚乳酸（PLA）， 利培酮（Ris），聚乙烯醇（PVA），二氯甲烷 器材： 磁力搅拌器，光学显微镜，5ml注射器，10mlEP 管，载玻片，盖玻片，100ml烧杯 吉林大学生物基础实验教学中心 实验步骤 1.处方 油相：利培酮 200mg PLGA （或PLA） 300mg 二氯甲烷 5ml 水相： PVA 375mg 去离子水 75ml 吉林大学生物基础实验教学中心 2.操作 (1)油相的配制：取处方量的利培酮，PLGA置于 10mlEP管中，加入5ml的二氯甲烷溶解，即得 。 (2)利培酮微球的制备：取PVA约30ml于50ml烧 杯中，置磁力搅拌器上搅拌溶解（如室温过低 需要加热加快溶解），待PVA完全溶解后，用 5ml注射器吸取油相，匀速将油相注入水相中 （要求注入部位尽量接近搅拌桨，注入时间不 超过30s） ，注入后继续搅拌4小试，使二氯甲 烷完全蒸发除去，取下磁力搅拌器，镜检，即 得。 吉林大学生物基础实验教学中心 (3)利培酮微球的冻干 取利培酮微球置于冻干机中，按冻干曲 线进行冻干。 吉林大学生物基础实验教学中心 3.质量检查与评定 微球的形态与粒度(冻干前) 取少量微球混悬液置于载玻片上，盖上盖 玻片，用有刻度标尺（刻度已校正器每格 的um数）的接目镜的显微镜观察微球表面 形态，测量不同大小计数。 微球的粒度分布（冻干后） 取少量微球混悬液置于激光粒度分析仪中 进行分析。 吉林大学生物基础实验教学中心 微球的含量测定： （冻干后） 精密称取微球样品约10mg，置于25ml容 量瓶中，用2ml丙酮溶解，待完全溶解后 ，振摇下加入0.1mol/