血培养标准操作课件

血培养标准操作 2 血流感染发病率高 发病率高：尽管新型广谱抗生素的使用不断更新，但BSI的 发病率、死亡率并未得到相应的控制。发病率从1986年的 1.6%增至2006年的3.1%，年度增长率为0.1%，病死率达 21.0%48.0%1 。 涉及面广：各组织器官感染均可继发各临床科室均有发生。 病情严重：发病急，病死率高。 1.Rodriguez- Creixems M, et al. Medicine (Baltimore). 2008 Jul;87(4):234-49. 3 科室感染情况 不同各科室的血流感染发生率亦是不同 感染发生率最高的是在不同专业的ICU病房，多见于革兰阳 性菌感染、真菌感染。 其次在外科病房，在外科感染中尤其在外科术后及烧伤病房 中厌氧菌感染率高，往往混合性感染较多见。 在儿科尤其新生儿病房，革兰阳性球菌及条件致病菌感染最 为常见。 此外，感染科、血液透析室、血液科、肿瘤科也有较高的感 染发生率。 4 什么是血培养？ 血培养是实验室试验，从患者体内采血，并将其装入含有培 养基的瓶中，以此来确定导致患者感染的微生物（细菌或真 菌）是否已经浸入患者的血液。 完整的血培养过程包括： 收集样本 检测、分离并鉴定导致血流感染的微生物 为临床医生提供抗菌药物敏感性试验结果 5 血培养过程 医师开出医嘱 护理人员收集送检样本 实验室培养、分离并鉴定导致血流感染的微生 三级报告：为临床医生提供抗菌药物敏感性试验结果 6 血培养标准化采集 采集血培养的时机 采血量 采集血培养的次数 厌氧瓶的应用 血培养的正确采集 7 什么时候进行血培养？ 当怀疑血流感染或菌血症时，应该做常规血培养。 怀疑患儿有血流感染的症状和情况有： 不明原因的发烧(38)或体温过低(36) 严重的局部感染，如脑膜炎、心内膜炎、肺炎、肾盂肾炎、 腹部术后感染等 侵入性处置，如静脉导管留置、导尿管留置、机械通气等 休克，寒颤，僵直 心率异常加快 低血压或高血压 呼吸频率加快 8 采集血培养的时间 估计寒战或体温高峰到来之前（通常在下午）采血 使用抗菌药物之前采血 当可疑临床症状出现后，应尽可能早地采血培养。在应用抗 菌药物之前采血培养是最理想的。如果患儿已经开始应用抗 菌药物进行治疗，则应该在下一次用药前采血培养。 9 0 3060 时间 (分钟) 体温 血培养采血时机 细菌浓度 采集血培养的时间 10 血培养的采血量 成年人推荐的采血量是每对培养瓶接种20毫升血液。 每对培养瓶包括一个需氧瓶和一个厌氧瓶。 每个瓶子应该接种5-10ml的血液。 要提高血培养检测阳性率，增加采血量是最显著的 11 血培养的采血量 VersaTREK 80 ml需氧瓶和厌氧瓶 FDA认可的最低的采血量0.1 10 ml 对于特殊病人，没有办法获得足够标本量时，一滴血就能挽救生命！ VersaTREK Redox1 需氧培养瓶 Redox2 厌氧培养瓶 12 采集血培养的次数 通常推荐在短时间内(例如1小时内)在不同位置连续采血，做 2对至3对(2瓶/对)血培养。 当怀疑感染性心内膜炎或其它的血管内感染(导管相关性)菌 血症和真菌血症时，则间隔采血(例如每隔1-2小时采血一次) ，便于连续监测。 13 采血量、次数与阳性率关系 一项最近的研究显示，用连续血培养监测系统累积统计血培养敏感性结果，观察 到多对血培养组合的累积检出率（每次采血量20ml，每瓶10ml）随采血次数增 加而递增。 由于多数病例中，细菌和真菌均一过性存在于血液中，所以单次血培养检测的敏 感性是有限的。 为了保证对菌血症的检出率，取两对以上的血培养是必要的。 Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548 14 应用厌氧瓶的原因： 不仅培养厌氧菌，可以帮助提高兼性厌氧菌的阳性率 如果抽取的血液量少于推荐量，血液应先足量接种需 氧瓶，剩余的血液应该接种到厌氧瓶中。 CLSICLSI的准则认为对于厌氧瓶目前没有选择性的标准，的准则认为对于厌氧瓶目前没有选择性的标准， 为避免漏检，需要常规做厌氧瓶。为避免漏检，需要常规做厌氧瓶。 厌氧瓶的应用 15 血培养的盲点 微弱生长的革兰氏阴性细菌 -空肠弯曲菌，布鲁氏菌等 SPS抑制作用 -淋球菌，脑膜炎奈瑟氏菌，阴道加德纳菌，消化 链球菌，厌氧菌和嗜麦芽寡食单胞菌。 16 VersaTREK 培养瓶 最佳的效果 - 特殊的培养基配方，80ml大容量提供更多营养成分 - 不含影响细菌生长的物质，如荧光及产色指示剂 SPS含量低 - REDOX1需氧瓶含量低，仅为0.0125%， - REDOX2 厌氧瓶中不含SPS 大大提高了细菌，尤其是肺炎链球菌和厌氧菌的检出率 17 杜克大学医学中心6000多份临床样本培养数据 VersaTREK对于链球 菌和肠球菌有更高的 检出率。 Controlled Clinical Comparison of VersaTREK and BacT/ALERT Blood Culture System 18 杜克大学医学中心模拟真菌血症培养数据 Microorganism TREK O2 No Blood BacT/ALERT O2 No Blood TREK AnO2 No Blood BacT/ALERT AnO2 No Blood Group B -streptococci0 0 0 0 E. faecalis 0 0 0 0 E. faecium 0 0 0 0 M. catarrhalis 0 0 3 0 N. gonorrheae 0 1 1 1 N. meningitidis 0 2 3 2 H. aphrophilus 0 1 0 0 A. actinomycetemcomitans 0 2 0 0 C. hominis 0 3 3 1 Eikenella sp. 2 3 3 0 Kingella sp. 0 3 3 1 B. bronchiseptica 0 0 1 2 C. jejuni 0 3 3 1 P. aeruginosa-ATCC 27853 0 0 0 1 B. fragilis-ATCC 25285 1 1 0 1 S. pneumoniae-ATCC 6305 0 0 0 0 Total 3 19 20 10 VersaTREK 需氧瓶和厌氧瓶分别检出34株和17 株细菌，需氧和厌氧组合未能检出部分艾肯氏菌。 BacT/Alert 需氧瓶和厌氧瓶分别检出18株和27株细菌，未能检出部分淋病奈瑟氏菌、脑膜炎奈瑟氏菌、 人类心杆菌、脆弱拟杆菌。 培养瓶结果(没有加血) 19 标本采集的要点 先检查血培养瓶是否有损坏或污染迹象。 检查每个瓶子上印的有效日期 每一对瓶血培养应该从身体的不同部位采取 用来培养的血应该是外周静脉血而不是动脉血，动脉血诊断意义不大 。 根据推荐，应该避免从静脉导管或动脉导管抽血，因为通常这些装置 污染率较高。 如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培 养标本，以帮助阳性结果的判读。 20 皮肤消毒 种类 浓度消毒时间 过敏是否需清除婴儿2月 碘酊 30秒有 是 洗必泰2-4%30秒无不必 不能用 次氯酸 不必 碘伏 90秒有是 异丙基乙醇70-90%30秒有不必 采集标本前的皮肤消毒非常重要 对年龄小于2个月的新生儿，需使用70%的异丙基乙 醇进行皮肤消毒。消毒剂需要有足够的作用时间以 保证消毒效果。 21 如何减少污染 皮肤消毒前，血培养瓶的橡皮塞需使用70异丙基乙醇 消毒并干燥，然后再进行穿刺部位的皮肤消毒。 严格按照皮肤消毒步骤操作（酒精、碘酊、酒精），并 等待足够的消毒时间 严格无菌操作，不允许在消毒后按压静脉，除非带有无 菌手套 不要换针头，尽量采用真空采血装置以降低污染率 血培养可接受的污染率=3% 22 血培养运送要求 采集后的血培养瓶应立即送往实验室。 接种前后的血培养瓶均不得冷藏或冷冻。 尽快(最好在2小时内)将标本送到微生物实