血脂康胶囊对糖尿病大鼠肾脏TGF-β1表达影响及保护性研究.doc

中 文 摘 要 血脂康胶囊对糖尿病大鼠肾脏tgf-1表达影响及保护性研究摘 要目的： 观察糖尿病大鼠肾脏tgf-1表达及血脂康胶囊的治疗作用 方法： 采用 stz 注射法制作 dm 大鼠模型，随机分为正常对照组，糖尿病对照组，血脂康胶囊治疗组。灌胃给药 8 周后，分别测定24小时尿白蛋白排泄、肾小球滤过率、肾皮质 tgf-1、col-iv、fn 的表达。所采用的技术包括生化、免疫组化等。结果一、功能学变化：1. 血脂康胶囊治疗组大鼠的 24 小时 uaer 显著低于dm 对照组： 2. 血脂康胶囊治疗组大鼠的肾小球滤过率显著低于 dm 对照组 二、免疫组化：血脂康胶囊治疗组大鼠肾皮质 tgf-1、 fn、col-iv 的表达显著低于糖尿病对照组（p 0.05）。关键词：血脂康胶囊；糖尿病肾病；大鼠；氧化应激；抗炎研 究 论 文 the protective effects of xiezhikang on the kidney of diabetic rats and the study of mechanismabstractobjective to investigate the effects of xiezhikang on the kidney of diabetic rats, as well as possible the mechanism involved in.methodsafterbeing injected with streptozotocin(stz) the dm rat model was established. rats were randomly divided into 4 groups. group 1 was normal group.group 2 was diabetic control group. group 3 was given the c. after 8 weeks of administration, uaer, gfr of rats were determined respectively. tgf-1, fn, col-iv, in the cortex of rats were also observed. techniques.including biochemistry, immuhisto chemistry, results 1. 24h uaer of xiezhikang group were significantly lower than those of diabetic control group2. gfr of xiezhikang group were significantly lower than those of diabetic control group 4. the expression 4of tgf-1, fn ,col-iv, in the cortex of xiezhikang group (0.8g kg-1) were lower than those of diabetic control group (p 0.05) conclusion the xiezhikang decoction at the range of dosage has protective effect on the kidney of early diabetic nephropathy. the protective mechanism may be associated with the its improvement of oxidative stress and anti-inflammatory activity. in addition, it might relate to inhibitory effect on the proliferation of murine mesangial cells.key words： clerodendranthus; nephropathy; rat; oxidative stress; anti-inflammatory前 言糖尿病肾病（ dn）为糖尿病的主要慢性并发症之一，而且已成为导致终末期肾衰的重要原因。dn 发病机制复杂，其中涉及糖代谢紊乱、肾脏血流动力学改变，多种细胞因子及遗传背景等。目前国内外研究认为，tgf-1等多种细胞因子分泌增多和细胞外基质（ecm）蛋白代谢异常，在 dn 发病机制的各个环节起着重要的作用，本实验拟血脂康胶囊作为干预因素，观察其对糖尿病大鼠尿白蛋白排泄率，肾小球滤过率（gfr），肾脏皮质 tgf-1、col-iv、fn 表达等指标的影响。探讨血脂康胶囊对早期糖尿病肾病是否有保护作用，为临床医医生诊治早期糖尿病肾病提供依据。材 料 与 方 法1.1 实验动物：清洁级雄性 sd 大鼠 50 只，体重 180-200 克，1.2 实验药物：血脂康胶囊购自廊坊市医药分公司1.3 糖尿病大鼠模型的制备：腹腔注射低温下配制的 stz。96h 后，经尾静脉采血测血糖，代谢笼收集尿液测尿糖。糖尿病动物模型成立，列入研究观察对象。随机血糖16.7mmoll-1尿糖强阳性。将 30 只成模大鼠随机分为模型组 10 只，血脂康治疗组 10 只。另设正常对照组 10 只。药物灌胃，糖尿病对照组及正常对照组给予等体积蒸馏水灌胃，以上各组均连续给药 8周。放免法测定尿微量白蛋白排泄率，苦味酸法测定尿肌酐。测定肾小球滤过率（采用内生肌酐清除率 ccr 公式计算）。 1.4免疫组化检测：采用sabc法检测肾组织中的tgf-1 ，按sabc试剂盒说明进行。根据光镜下染色面积和强度进行半定量评分。2 统计学方法：采用 spss11.0 医学统计软件进行方差分析。所有计量资料数据结果采用 xs，免疫组化染色采用半定量统计。结果 1、24 小时尿白蛋白排泄率变化比较见表1表1 治疗8周后各组gfr、uaer比较 组别 例数 gfr(ml/min/kg) uaer(ug/24h) 正常组 10 448 0.3 404 糖尿病组 10 787 08 645054 血脂康组 10 12108 1712072、治疗8周后各组肾皮质tgf-1 、fn、col-iv表达活性比较见表2 表2 治疗8周后各组肾皮质tgf-1 、fn、col-iv表达活性比较 肾小球 肾小管 tgf-1 fn col-iv tgf-1 fn col-iv 例数正常组 10 0.76 1.13 1.54 1.34 1.06 1.43 糖尿病 10 2.45 4.65 4.67 3.87 1.85 3.23血脂康 10 1.02 2.88 2.33 1.56 1.09 2.38 讨 论一、 糖尿病大鼠肾脏tgf-1表达的相关研究肾皮质免疫组化提示肾小球系膜区 tgf-1、fn、col-iv 表达增强并且肾小管及间质病变同样明显，证实 tgf-1 活化后所诱发的 ecm 增生参与了 dn 肾单位纤维化的过程。二、血脂康胶囊对糖尿病肾小球的保护与糖尿病对照组相比，血脂康胶囊治疗组 24 小时尿白蛋白排泄率、gfr 及肾重体重指数明显降低，血脂康胶囊治疗组肾皮质 tgf-1、fn、col-iv 的表达程度明显减轻，提示血脂康胶囊有降低早期糖尿病肾病大鼠尿白蛋白排泄率及减少过高的 gfr、抑制肾组织增生、抑制肾皮质 tgf-1、fn、col-iv 表达等保护作用。三、血脂康对肾小球的保护机制血脂康具有降低血脂、降低动脉硬化的尖端科技生物产品。延缓动脉粥样硬化的进展，改善血管内皮功能，降低黏附分子的生成。血脂康的治疗效果及药理作用强、具有副作用少等优点，其调血脂作用的主要成分是洛伐他汀类，降脂作用明显高于洛伐他汀。血脂康还含有8的不饱和脂肪酸，其中亚油酸占48.13，对高脂血症患者特别是高甘油三酯血症患者，有良好的降脂作用。血脂康中的甾醇可与胆固醇竞争吸收部位，干扰胆固醇的吸收，使外源性胆固醇吸收减少。肾病综合征及肾小球硬化患者服用血脂康后，可使24小时尿蛋白定量明显减少，血浆白蛋白明显升高。并可增加肝脏的白蛋白合成，提高肾病综合征的治疗效果，防止细胞外基质过分积累和肾小球硬化的发生与发展。参考文献1 atkins rc. mesangial cells and their interactions. in: zhang j, et al. eds.nephrology. proc 4th apcn. beijing, international academic pubishers,2006,91-982 kimura y, okuda h, okuda t, et al. studies on the activities of tannins andrelated compounds, x.effects of caffeetannins and related compounds onarachidonate metabolism in human polymorphonuclear leukocytes. j natprod ,2007,50（3）：392-3993 kelm ma, nair mg, et al. antioxidant and cyclooxygennase inhibitoryphenolic compounds from ocimum santum linn. phytomedicine, 20005mar,7(1):7-134 heinrich m. ethnobotany and natural products:the search for newmolecules, new treatments of old diseases or a better understanding ofindigenous cultures? curr top med chem, 2007,3(2):141-1545 陶寿淇 积极开展中国心血管病人群防治 20086 the scandinavian simvastatin survival study group randomised trial of cholesterol 10 lowering in 4