动物细胞培养和核移植技术(第1课时).pptVIP

2.2.1动物细胞培养和核 移植技术 高二生物选修3专题2第2节第1小节 细 胞 工 程 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和 分子生物学 细胞整体水平 或细胞器水平 按照人们的意愿来 改变细胞内的遗传 物质或获得细胞产 品 概念 分类 植物细胞工程 动物细胞工程 复习回顾：植物细胞工程采用的技术 手段有哪些？其理论基础是什么？ 所采用技术 的理论基础 植 物 细 胞 工 程 通常采用的 技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞全能性 动 物 细 胞 工 程 通常采用的 技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 动物细胞核移植 是其他动物细胞工程技术的基础。 从动物机体中取出相关的组 织，将它分散成单个细胞，然 后，放在适宜的培养基中，让 这些细胞生长和增殖。 原理：细胞增殖 一、动物细胞培养的过程: 要求： 画出流 程图。 动物组织块 细胞悬浮液 原代培养 传代培养 单个细胞 加培养液 剪碎、胰 蛋白酶 分装 l1.选材时一般选择动物胚胎或幼龄动物的器 官或组织，为什么？ l2.为什么要对取出的动物组织进行处理，使 细胞分散？ l3.由组织块获得单个细胞一般用什么方法？ l4.用胰蛋白酶来分散细胞，说明细胞间的物 质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ l5.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？要注 意些什么？ 1.选材时一般选择动物胚胎或幼龄动物的器 官或组织，为什么？ 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们的 细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺盛， 容易培养。 2.为什么要对取出的动物组织进行处理，使 细胞分散？ 分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排 出代谢废物；而用大块组织培养时，内部细胞 的营养供应和代谢废物的排出都较困难。 3.由组织块获得单个细胞一般用什么方法？ 4.用胰蛋白酶来分散细胞，说明细胞间的物 质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤维） 。 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于 6时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的 适宜环境pH为7.28.4。多数动物细胞培养的适 宜pH为7.27.4。 先用剪刀剪碎,后用胰蛋白酶或胶原蛋白酶 处理 5.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？ 要注意些什么？ 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外 ，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细 胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的 消化时间。 l6.为什么要求培养瓶或培养皿内表面光滑、 无毒？ l7.什么叫原代培养？ l8.什么叫传代培养？为什么需要传代培养？ l9.传代培养的细胞都能一直传代下去吗？ l10.动物细胞培养能否象植物组织培养那样 获得克隆个体？ 6.为什么要求培养瓶或培养皿内表面光滑 、无毒？ 悬液中分散的细胞置于适宜环境中培养 ，很快就巾附在瓶壁上，称为细胞贴壁。培 养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上 才能生长增殖。 7.什么叫原代培养？ 取材（动物组织） 细胞分散初次培养 8.什么叫传代培养？为什么需要传代培养？ 培养的细胞细胞分散继续培养 接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互 接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象 称为细胞的接触抑制。 9.传代培养的细胞都能一直传代下去吗？ 细胞 悬浮 液 10代 细胞 50代 细胞 无限传 代 随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖 增殖缓慢，以至于完全停止。 少部分细胞核型可能发生变化。 少部分细胞获得 不死性，遗传物 质发生改变。 10.动物细胞培养能否象植物组织培养那 样获得克隆个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多 ，不能发育成新的动物个体 1、无菌、无毒 2、营养（培养基成分） 3、适宜的温度和PH值 4、必要的气体条件 （糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、 血清、血浆等。） O2和CO2 添加一定量的抗生素 定期更换培养液 培养液和培养器具无菌处理 培养基的不同是 动物细胞培养和 植物组织培养最 重要的区别 36.5 +0.5度 PH为7.2-7.4 COCO 2 2 的主要作用是维持培养液的的主要作用是维持培养液的PHPH 二、动物细胞培养的条件: 人们对细胞所需的营养物质还没有完 全搞清楚。血清可以提供有利于细胞生长 增殖所需的激素、生长因子或提供合成培 养基所缺乏的营养物质等。 为什么对动物细胞进行培养时通常 要添加血清？ 保证细胞顺利 的生长增殖 （1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗 、干扰素、单克隆抗体等。 （2）获得大量自身的皮肤细胞，用于 植皮。 （3）用于检测有毒物质 （4）用于生理、病理、药理等方面的 研究，为治疗和预防疾病提供理论依据 三、动物细胞培养的应用: 比较项目植物组织培养动物细胞培养 原理 培养基性 质 培养基特 有成分 培养结果 培养目的 细胞的全能性细胞增殖 植物组织培养和动物细胞培养的比较 固体培养基液体培养基 蔗糖 植物激素葡萄糖 动物血清 植物体细胞 快速繁殖、培育 无病毒植株 获得细胞或细胞分 泌蛋白 1.用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下 列叙述正确的是 A都需用培养箱 B都须用液体培养基 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性 C 外界条件适宜 ，植物细胞不 需要。动物细 胞培养一般需 要培养箱。 2、下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要 区别的是 A.培养基成分不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株 A 3、目前使用的或冷冻保存的 正常细胞通常为 A.分裂10次以内的细胞 B.未经培养的细胞 C.传代50代以内的细胞 D.传代10代以内的细胞 D 愈伤组织 条件适宜 可以传代 培养不分 化。 4、培养10代以内细胞的特点是 A遗传物质没有改变，可以无限传代 B遗传物质发生改变，不可无限传代 C遗传物质没有改变，不可无限传代 D遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以 无限传代 5、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养 条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为: A原代培养 B传代培养 C细胞株 D细胞系 C D 6、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚 胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要 原因是这样的组织细胞 A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强 D 7.（09江苏）下图是一个新生小鼠的肝脏小块 培养装置示意图。请回答下列问题。 （1）肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞 。 （2）气室中充入5C02：气体的主要作用是 。 （3）培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生 长，但要注意选择抗生素的 ，以 保证抗生素对肝脏无害。 吸收氧气和营养物质、排出代谢废物 维持培养液适宜的pH 种类和剂量 8.(07江苏)动物细胞体外培养时，通常要在培 养基中补充一定浓度的某些物质。右图是血清对正 常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供 的信息可以获得的正确结论有 A正常细胞与癌细胞的增殖速率相同 B有无血清对正常细胞培养的影响不同 C培养基中补充 血清有助于正常细 胞的培养 D培养基中是否 补充血清对癌细胞 的培养影响不大 BCD 9.回答下列有关动物细胞培养的问题： 在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂 生长到细胞表面 时，细胞会停止分 裂增殖，这种现象称为细胞的 。此时 ，瓶壁上形成的细胞层数是 ，要使贴壁的 细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶 是 。 随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停 止，进而出现 的现象；但极少数 细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发 生改变而变成 细胞，该种细胞的黏 着性 ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白） 的量 。 相互接触 单层 胰蛋白酶 衰老甚至死亡 接触抑制 不死性 降低 减少 9.回答下列有关动物细