KF-3106-3-023-01 BC-5390 血液细胞分析仪标准操作程序.doc

保密密级： 【秘密】 KF-3106-3-023-01-1.0 文件类型开发文档保密密级秘密文件编号KF-3106-3-023-01项目代码3106适用范围3106BC-5390血液细胞分析仪标准操作程序相关文档文件编号文件名称版本修订记录 版本修订内容概述修订人修订日期1.0创建冯冠男2012-08-15保密文件，知识产权属迈瑞公司所有 第 2 页 共 21 页医院BC-5390版本：科执行日期： 年 月 日室仪器编号：第20页，共19页BC-5390血液细胞分析仪标准操作程序1 预期用途适用于血液白细胞计数及分类，红细胞计数，血红蛋白，血小板计数，红细胞压积，红细胞体积分布宽度，平均红细胞血红蛋白含量，平均红细胞血红蛋白浓度，平均红细胞体积，血小板体积分布宽度、平均血小板体积和血小板压积等检验。2 测试原理2.1 白细胞测量n 激光流式细胞技术当一定量的血细胞被吸入并经过特定量的试剂作用后，血样经喷嘴注入充满稀释液的圆锥形流动室中。在稀释液形成的鞘液包裹下，细胞单个排列成行地穿过流动室的中央。当悬浮在鞘液中的血细胞经过二次加速后通过激光检测区时，血细胞受到激光束的照射，产生的散射光性质与细胞大小、细胞膜和细胞内部结构的折射率有关。低角前向散射光反映了细胞的大小，高角前向散射光则反映细胞的内部精细结构和颗粒物质。光电二极管接收这些散射光信号并将其转化为电脉冲，根据采集到的这些电脉冲数据，可以得到血细胞大小及细胞内部信息的二维分布图，称为散点图，横坐标反映细胞的内部复杂度信息，纵坐标反映细胞的体积。从DIFF通道散点图可得到淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞各自占白细胞总数的百分比。n 阻抗法本分析仪利用库尔特原理对白细胞/嗜碱性粒细胞进行计数。检测样本经过二次稀释后进入WBC检测单元。检测单元有一个小的开口，叫做检测小孔。小孔两侧有一对正负电极，连接恒流电源。由于细胞具有不良导体的特性，稀释样本中的细胞在恒定负压的作用下通过检测小孔的时候，电极间的直流电阻就会发生变化，从而在电极两端形成一个同细胞体积大小成比例的脉冲信号。当细胞连续地通过小孔，就在电极两端产生一连串的电脉冲。脉冲的个数与通过小孔的细胞数相当，脉冲的幅度与细胞的体积成正比。将采集到的电脉冲放大后与正常的白细胞/嗜碱性粒细胞体积范围所对应的通道电压阈值相比较，计算出电脉冲幅度落在白细胞/嗜碱性粒细胞通道内的电脉冲个数。由此，所有采集到的电脉冲根据不同的通道电压阈值进行了分类，落在白细胞/嗜碱性粒细胞通道内的电脉冲个数就是白细胞/嗜碱性粒细胞的个数。依据脉冲电压幅度划分的每一个通道范围内的细胞个数决定了细胞的体积分布。用横坐标表示细胞体积，纵坐标表示细胞相对数量的二维图就是反映细胞群体分布情况的直方图。2.2 血红蛋白浓度测量n 比色法在比色池中，被稀释的样本加入溶血剂后，红细胞溶解，释放出血红蛋白，后者与溶血剂结合后形成血红蛋白复合物，在比色池的一端让LED光管发出中心波长为525nm的单色光照射血红蛋白复合物溶液，在另一端通过光电管接收透射光,并将光强信号放大后转换为电压信号,通过与比色池中加入样本之前（比色池中只有稀释液）测得的本底透射光强产生的电压比较，得到样本的血红蛋白浓度。2.3 红细胞/血小板测量n 阻抗法原理本分析仪利用阻抗法原理对在RBC检测单元对红细胞/血小板进行计数。检测单元有一个小的开口，叫做检测小孔。小孔两侧有一对正负电极，连接恒流电源。由于细胞具有不良导体的特性，稀释样本中的细胞在恒定负压的作用下通过检测小孔的时候，电极间的直流电阻就会发生变化，从而在电极两端形成一个同细胞体积大小成比例的脉冲信号。当细胞连续地通过小孔，就在电极两端产生一连串的电脉冲。脉冲的个数与通过小孔的细胞数相当，脉冲的幅度与细胞的体积成正比。将采集到的电脉冲放大后与正常的红细胞/血小板体积范围所对应的通道电压阈值相比较，计算出电脉冲幅度落在红细胞/血小板通道内的电脉冲个数。由此，所有采集到的电脉冲根据不同的通道电压阈值进行了分类，落在红细胞/血小板通道内的电脉冲个数就是红细胞/血小板的个数。依据脉冲电压幅度划分的每一个通道范围内的细胞个数决定了细胞的体积分布。用横坐标表示细胞体积，纵坐标表示细胞相对数量的二维图就是反映细胞群体分布情况的直方图。3 一般资料设备名称全自动血液细胞分析仪设备英文名称AUTO HEMATOLOGY ANALZER型号BC-5390仪器编号技术规格仪器体积595752.5cm测试速度全血：不低于60样本/小时；预稀释：不低于60样本/小时光 源半导体激光检测系统流式细胞检测器主机号国 别中国制造商深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司出厂日期设备到货日期设备到货状态新设备使用条件环境要求温度范围：1530；相对湿度：3085%。电源要求电压：（100V-240V）允差10%，输入功率：300VA，频率：（50Hz/60Hz）1Hz设备验收情况合格开始服役日期代理商代理商联系人代理商电话设备安放位置设备当前状态良好仪器说明书状态及存放处主要负责人使用人4检验项目中文名称缩写白细胞数目WBC嗜碱性粒细胞数目Bas#嗜碱性粒细胞百分比Bas%中性粒细胞数目Neu#中性粒细胞百分比Neu%嗜酸性粒细胞数目Eos#嗜酸性粒细胞百分比Eos%淋巴细胞数目Lym#淋巴细胞百分比Lym%单核细胞数目Mon#单核细胞百分比Mon%异常淋巴细胞数目ALY#（研究参数）异常淋巴细胞百分比ALY%（研究参数）巨大未成熟细胞数目LIC#（研究参数）巨大未成熟细胞百分比LIC%（研究参数）红细胞数目RBC血红蛋白浓度HGB平均红细胞体积MCV平均红细胞血红蛋白含量MCH平均红细胞血红蛋白浓度MCHC红细胞分布宽度变异系数RDW-CV红细胞分布宽度标准差RDW-SD红细胞压积HCT血小板数目PLT平均血小板体积MPV血小板分布宽度PDW血小板压积PCT大血小板比率P-LCR大血小板数目P-LCC5配套试剂M-53稀释液M-53D稀释液M-53溶血剂M-53LEO(I)溶血剂M-53LEO(II)溶血剂M-53LH溶血剂/M-53P探头清洁液所有试剂应参照试剂的使用说明进行保存。变质、超过效期的所有试剂不能使用。6 标本类型EDTA-K2或EDTA-K3抗凝静脉全血或末梢血标本（具体请参考手册）原始样品采集、制备、处理、检验和存放见检验科相关规范。6.1末梢血标本准备注意事项n 采集标本前，应使患者尽量保持平静，减少运动；n 尽量避免药物或饮食对检验结果的影响；n 除特殊情况外，尽量避免从耳垂采血，易受温度因素的影响；n 所选择的采血部位应完整，避免出现烧伤、冻疮、发绀、炎症等因素；n 采集过程中请勿使劲挤压，造成大量的组织间液和细胞内液的混入，以血液自然流出为好；n 尽可能使用同一规格的采血针，保证穿刺深度的一致性和足够的深度，便于血液的采集，避免交叉感染；n 采用末梢全血模式测定，建议采集末梢血血量为80-100ul；n 末梢全血样本混匀方式：用右手食指轻轻弹击装有末梢血的抗凝管底部8-10次，使抗凝管内末梢血与抗凝剂充分混匀；n 末梢全血检测时间：-在样本采集后3分钟到2小时内进行样本测定；n 末梢预稀释样本检测时间：建议样本与稀释液混匀后在半小时内检测；n 请勿将末梢全血样本置于2-6度低温保存。7 性能指标设备操作条件：环境要求温度范围：1530；相对湿度：3085%。电源要求电压：（100V-240V）允差10%，输入功率：300VA，频率：（50Hz/60Hz）1Hz空间要求左、右两侧大于100cm，背面大于50cm。主要参数显示范围：参数显示范围WBC0.00109/L999.99109/LRBC0.001012/L18.001012/LHGB0 g/L300g/LPLT0109/L9999109/LHCT0%80%本底范围：参数本底范围WBC0.30 109 / LRBC 0.03 1012/ LHGB 1 g / LHCT 0.5 %PLT 10 109/ L线性范围：测量项目线性测量范围线性允差（全血模式）线性允差（预稀释模式）WBC0.00109/L100.00109/L0.30109/L或5 0.60109/L或 6 100.01109/L 400.00109/L1012RBC0.00/L1012/L8.001012/L0.051012/L或50.101012/L或 10HGB0 g/L250g/L2g/L或24g/L或 4PLT0109/L1000109/L10109/L或820109/L或 161001109/L 5000109/L1220HCT0%67%2%（HCT值） 或 3% (误差百分比)4%（HCT值） 或 6% (误差百分比)重复性指标：参数范围全血样本重复性（CV/绝对偏差d）预稀释样本重复性（CV/绝对偏差d）WBC 4.0109/L15.0109/L2.0 4.0 Neu%50.0%70.0%4.0(绝对偏差) 8.0(绝对偏差) Lym%20.0%40.0%3.0(绝对偏差) 6.0(绝对偏差) Mon%5.0%10.0%2.0(绝对偏差) 4.0(绝对偏差) Eos%2.0%5.0%1.5(绝对偏差) 2.5(绝对偏差) Bas%0.5%1.5%0.8(绝对偏差) 1.2(绝对偏差) RBC 3.501012/L6.001012/L1.5% 3.0% HGB 110g/L180g/L1.5% 3.0% MCV70 fL120 fL1.0% 2.0% PLT100 109 / L 149 109 / L6.0%10.0%150 109 / L 500 109 / L4.0%8.0%MPV/4.0% 8.0% ：绝对偏差 d = 测量值测量平均值携带污染率：参数携带污染率WBC 0.5 %RBC 0.5 %HGB 0.6 %HCT 0.5 %PLT 1.0 %8 使用要求8.1安装要求8.1.1 空间要求n 仪器应安装在稳固工作台上。n 保证操作台面以及主机下方有足够的空间放置稀释液、废液桶。8.1.2 环境要求n 仪器设备周围应尽可能无尘、无机械振动、无污染、无大噪音源和电源干扰；n 无强电磁干扰源以及电刷型电机、闪烁荧光灯和经常开关的电接触性设备；n 不应放在通风条件差、阳光直射的环境中，或热源及风源前。8.2 仪器安全n 在仪器设备上面和周围不要使用可燃性危险品，避免引起火灾和爆炸。n 在电源打开状态下，禁止打开仪器前上面、侧面及背面面板，以免损害线路板；n 仪器设备使用前，必须认真检查设备之间连接及外接线(件)是否正确、正常，电源插头是否正确插接，设备是否处于正常状态。n 实验过程中如遇水、电故障或中断，应立即关闭影响仪器设备安全的有关开关，并实施安全保护措施。n 仪器设备的运输必须按BC-5390血液细胞分析仪使用说明书规定进行搬运，禁止鲁莽装卸，应避免倾斜，振动和碰撞。n 如果标本、试剂溢出在分析仪上，立即擦掉并依照检验科生物安全相关规范处理。8.3 人员安全在仪器工作过程中，勿触及所有运动部件，避免直接人身伤害。n 禁止触摸BC-5390血液细胞分析仪内部的电路，尤其避免湿手触摸，以免造成电击。n 所有物品（样本、质控物、校准物、试剂、废液等），以及同这些物质接触的区域都有潜在的生物传染性危险。操作者在实验室接触相关物品和区域时，应遵守实验室生物安全操作规定，并穿戴好个人防护装备（如实验室防护衣，手套等）。n 试剂一旦接触皮肤，立即用大量水冲洗，如有需要请接受医生治疗；n 试剂一旦接触眼睛，立即用大量水冲洗，并接受医生治疗。9 开关机程序9.1 开机前准备1）检查电源连接是否正常；2）检查配套电脑是否正常；3）检查与仪器网线连接是否正常；4）检查试剂有无及连接是否正常；5）检查废液桶是否为空；6）检查打印设备是否连接正常。9.2 开机程序注：液路初始化过程中会进行本底测试，本底结果必须满足；WBC0.3 109/L、RBC0.031012/L、HGB1g/L、HCT0.5%、PLT10 109/L。如果本底不满足要求，请参照仪器提示操作，执行清洗或探头液维护。9.3 关机程序10 仪器校准 10.1 仪器校准原则1. 仪器在进行校准前必须对液路系统进行彻底清洗。2. 建议血液细胞分析仪校准周期为半年一次；3. 机器的初始校准是由迈瑞公司在机器出厂时进行的。在用户端安装后，由授权安装人员验证合格后转交用户使用，使用者仅仅在需要时才进行机器校准，并维持良好的质控操作性能，确保系统的准确度。4. 在用户端的校准，应将校准数据做好记录，并报实验室负责人审核后仪器才能投入使用。5. BC-5390血液细胞分析仪更换了关键的部件(如宝石孔或电路板等)，质控数据存在明显偏差或长期闲置恢复使用时，需要进行校准；6. 血液细胞分析仪更换关键部件后，应先测试质控物进行验证。如果质控结果合格，仪器不用校准；如果质控结果不合格，则需要进行校准。10.2 仪器校准步骤BC-5390血液细胞分析仪为保证仪器检测结果的可溯源性，为WBC/RBC/HGB/MCV/PLT五项参数提供三种校准方式：n 人工校准：人为在计数界面进行校准，手动计算校准系数后在此界面输入；n 新鲜血校准：在此界面下按照仪器提示完成新鲜血校准，仪器自动计算并保存校准系数；n 校准品校准：在此界面下按照仪器提示完成校准品校准，仪器自动计算并保存校准系数。11 室内质控室内质控步骤如下：n 质控设定n 质控分析n 查看质控图n 查看质控列表BC-5390仪器为用户提供4种质控方式：n L-J质控n X-B质控n X-R质控n X质控以下介绍最常用的L-J质控流程，其余质控详见手册。11.1 质控设定1）点击“质控”标签，在“质控类型”下拉列表中选择“L-J质控”。2）点击“设定”按钮，进入L-J质控设定界面。3）根据质控靶值单进行各参数靶值及偏差限设定。4）选择执行质控分析的质控文件号，界面显示对应的文件信息。11.2 质控分析1）质控准备2）选择质控文件号 3）根据文件号，选择相应高中低值质控进行测试11.3 质控结果回顾11.3.1质控图回顾11.3.2 质控列表回顾11.4 失控处理各实验室应制定本实验室质控失控规则，或者根据厂家提供的质控允许偏差限来进行是否失控的判断。11.4.1 失控原因分析及采取相应措施如果质控结果超出质控偏差范围，建议按以下步骤操作，直至问题解决。1. 检查质控编辑内容，如输入有误，进行修改。2. 检查质控是否过有效期、质控开瓶时间是否超过2周。2. 执行本底检测，如本底异常，参考“故障处理”进行排除。3. 重新执行质控计数： 当质控测试超出偏差限，用同瓶质控再测试一次，在偏差限范围则仪器工作正常，如还超偏差限，记录“室内质控失控报告单”。 同一批号换一瓶质控进行测试2次，如其中一次结果在偏差限范围则仪器工作正常，如都超偏差限，记录“室内质控失控报告单”，评估是否对仪器进行校准或维修。4. 如果上述步骤都未能得到在控结果，提示仪器可能出现故障，应联系维修人员。12 常规标本测定 12.1 样本准备12.1.1 全血样本准备12.1.2 预稀释样本准备12.2 计数过程13 试剂更换1. 试剂用完时仪器会有报警音提醒，并在DMU界面右下角会给出报警提示，点击后弹出故障对话框。2. 取一桶/瓶试剂，打开桶/瓶的包装盖，将试剂瓶盖组件插入后拧紧。3. 点击故障对话框中的“消除故障”。或进入仪器控制面板的“常规保养”“试剂”，对所更换的试剂执行更换试剂操作。n 开放试剂机型：选中需更换的试剂，设置试剂有效期，如使用外接条码扫描仪，则直接扫描条码，完成后点击“更换”按钮。n 封闭试剂机型：选中需更换的试剂，手动输入试剂条码，或使用外接条码扫描仪扫描试剂条码，完成后点击“更换”按钮。4. 进行空白测试，测试合格后继续进行样本的测试。14 仪器设备的维护保养程序14.1 定时维护仪器所有的维护都已写入软件，根据软件提示进行日常的维护即可保证仪器正常使用，也可在设置界面设置维护时间等。在定时维护设置界面设置每日定时探头液浸泡的时间和提醒时间，则每天提醒时间到时会提示执行探头液浸泡。关机操作相当于定时探头液浸泡。如每天关机，此操作系统将自动跳过。14.2 按需维护14.2.1 清洗维护在以下情况下需要对相应部件进行清洗：n 如果WBC和（或）HGB本底结果超出本底范围，可执行WBC池的清洗。如果效果不佳，可执行WBC探头液浸泡操作。n 如果RBC和（或）PLT结果超出本底范围，可执行RBC池的清洗。如果效果不佳，可执行RBC探头液浸泡操作。n 如果本底结果的散点图中粒子较多，或者WBC分类的效果不好，