《不同分析方法测定》PPT课件.ppt

不同分析方法测定苹果中单宁的含量 络合滴定法 分光光度法 氧化滴定法 单宁是多酚中高度聚合的化 合物，广泛存在于自然中， 主要应用于日化、食品、医 药、制革等领域。 络合滴定法 一、实验原理 络合滴定法是以络合反应为基础的容量分析方法，又 称螯合滴定法。单宁分子中含有多个酚羟基可以与一 个中心离子，如铜、锌、铋、铁、汞等进行络合，形 成多核络合物，在一定的pH 条件下沉淀，再通EDTA 反滴定过量金属离子来确定单宁的含量。络合法所使 用的指示剂一般为金属指示剂，指示终点到达时要求 具有较深的颜色，如铬黑T。利用Zn2+ 只与单宁反应 的特性来沉淀分析溶液中的塔拉单宁， 以铬黑T 作指 示剂，用EDTA 溶液滴定剩余的Zn2+. 二、试剂和仪器 1.试剂 (1) 0.08mol/L醋酸锌溶液: 1.756g醋酸锌加蒸 馏水溶解再加数滴冰醋酸, 以蒸馏水定容至100ml, 摇 匀。 (2) 0.005mol/L EDTA溶液: 0.185g乙二胺四乙 酸二钠盐加蒸馏水溶解,定容至100ml摇匀。 (3) pH10 NH4ClNH4OH缓冲液: 6.75gNH4Cl 溶于20 ml蒸馏水中, 加57ml浓氨蒸馏水, 再加蒸馏水 至100ml。 (3) 铬黑T指示剂: 0.5g铬黑T 加4.5g盐酸羟胺(以 少量蒸馏水溶解)加95%乙醇100ml溶解。 （4）标准单宁酸溶液：称取单宁酸0.1000g加蒸馏 水溶解, 定容至100ml 三、实验步骤 1. 单宁酸标准曲线制备: 取7个50ml容量瓶, 均加入5ml 0.08mol/L醋酸锌及1.4ml浓氨水, 摇动至沉淀完全溶解, 分别加入单宁酸标准液020ml, 摇匀, 室温 下放置片刻, 加蒸馏水至50ml, 混匀, 过滤, 取滤液5 ml, 加20ml左 右蒸馏水, 2.5ml pH10 NH4OHNH4Cl缓冲液, 3滴0.1%铬黑T溶 液(95%乙醇), 以0.005mol/L EDTA溶液滴定, 终点由酒红色变为天 蓝色, 记下EDTA滴定体积数。用EDTA滴定的ml数作纵坐标, 单宁 mg量作横坐标, 绘制单宁酸标准滴定曲线。 2、仪器 工业天平(感量0.01g)；微量滴定管(5ml或10ml)；移液管(2ml、5ml)；容量瓶 (50ml、100ml)；具塞三角瓶(250ml)。 2 样品中单宁含量的测定: 样品粉碎, 过60目筛, 称取粉碎样品13g, 放入250ml 具塞三角瓶中, 加50ml蒸馏水, 在80水浴中提取一小时( 并间歇摇动), 取出, 冷却至温, 过滤, 弃去前面数ml滤液, 取滤液1020 ml, 按制备单宁标准曲线的方法进行测定, 另取同量滤液作空白滴定. 四结果计算 由样品滴定消耗的EDTA体积(ml数)减去样品空白滴定消 耗的EDTA毫升数, 查单宁酸标准滴定曲线或代入回归直线方 程式y=a+bx中, 即可算得待滴定样品液中单宁毫克数。 式中: A查标准滴定曲线所得测定液中单宁含量(mg) V测定液总体积(ml) W样品称量(g) 分光光度法 n一、实验原理 n分光光度法是通过测定被测物质在特定波长或一定波长范 围内光的吸收度，以此对该物质进行定性和定量分析的方 法。分光光度法的应用光区包括紫外光区、可见光区、红 外光区，其中常用的是紫外光区和可见光区，两者的波长 范围分别为200400 nm 和400760 nm。分光光度法 的基本原理是朗伯- 比尔定律，即当一束平行的单色光通 过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓 度、液层厚度乘积成正比。 二、仪器和试剂 v1、仪器 单光束紫外可见分光光度计、 pH 计、磁力搅拌器 、50ml 容量瓶、 50ml 烧杯、 50ml 量筒 2、试剂 （1）氯化铁溶液:称取1gFeCl3，定容至100ml。 （2） 碳酸钠溶液：称取50mgNa2CO3，定容至 100ml。 （3）单宁标准溶液: 准确称取GR 级单宁0.05 克, 溶 于水并稀释至100ml 摇匀. 三、实验步骤 1、标准曲线的绘制 量取40ml 蒸馏水加入50ml 烧杯中,开动搅拌器, 用 0.05% Na2CO3 滴定到pH 取为9.95, 记录Na2CO3 的毫 升数a。 取1ml 单宁标准溶液加入50ml 烧杯中, 再加入40ml 蒸 馏水, 开动搅拌器, 用0.05%Na2CO3 滴定至pH 值为9. 95, 记录Na2CO3 用量毫升数b。 准确吸取单宁标准溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、 1.0ml 分别放入50ml 容量瓶中, 各加入40ml 蒸馏水, 依次 滴加0.05%Na2CO3 溶液a+ 单宁mg 数 2 ( b - a) ml, 摇匀后分别加入0.5ml1%FeCl3 溶液, 定容到50ml, 摇匀。 三分钟后测定在530nm 处的吸光值, 以“ 0”管调零点, 并做 出标准曲线。 2 、样液的制备 （1）取10ml 未澄清果汁用蒸水定容到50ml,用干滤纸 过滤。吸取样品滤液1ml 放入50ml 烧杯中,加入40ml 蒸 馏水, 在搅拌情况下用0.05%Na2CO3 溶液滴定至pH 值为 9. 95,记录Na2CO3 毫升数d。 （2 ）在50ml 容量瓶中加入1ml 滤液, 40ml蒸馏水, 滴 加dml0.05% Na2CO3 溶液, 混匀后加入0.5mlFeCl3 溶液 , 定容至50ml, 摇匀。三分钟后于530nm 处测定吸光值, 以” 0” 管为空白, 从标准曲线上查出样品相应标准的单宁 含量。 氧化滴定法 一、实验原理 单宁可被高领土（或活性炭）吸附和被高锰酸钾氧化 ，根据吸附前后氧化值差即可计算样品中单宁的含量。指 示剂靛（靛蓝二磺酸钠）被高锰酸钾氧化，从蓝色转变为 黄色，从而指示终点。 反应式如下： 二、试剂 n1、高锰酸钾标准溶液 0.01 mol/L ： 称0.160g 高锰酸钾溶于 100 ml 蒸馏水中， 盖上表面皿，加热至沸并保持微 沸状态约 1h冷却后，放 暗处一周后用垂熔玻璃漏 斗或玻璃丝过滤，将滤液 移至棕色瓶内暗处 保存 。 2、粉状活性炭 、苹果、靛红溶液 三、实验步骤 1、称取样品4.0g于小烧杯中，用约15mL的水移入50mL 容量瓶中，充分振荡后定容，摇匀，用离心机离心分离。 用吸量管吸取澄清的样品溶液10.0mL，置于100mL烧杯中 ，准确加入靛红溶液25.0mL、水75mL，用高锰酸钾标准 溶液快速滴定至呈黄绿色，再慢慢滴定至明亮的金黄色即 为终点，记录消耗的高锰酸钾标准溶液的体积V1。 2、另取样品溶液10.0mL于100mL小烧杯中，加入骨